1. 细胞培养:取对数生长期的细胞,按1×106cells/ mL以1mL接种24孔板或2mL接种于6孔板内,进行所需的处理(比如加入药物),特定时间后终止培养,进行下一步的实验。2. 细胞固定: 800rpm离心5min,收集细胞沉淀,弃上清,用预冷PBS洗涤两次,加入预冷75%乙醇,于4℃固定4h以上。3. 细胞染色:1500rpm离心5min,弃上清,以3mL的PBS洗涤一次,加入400uL溴化乙锭(PI,50ug/mL),100ul RNase A(100ug/mL ),4℃避光孵育30min。4. 流式分析: 以标准程序用流式细胞仪检测,一般计数2~3万个细胞,结果用细胞周期拟和软件ModFit分析。细胞周期是指能持续分裂的真核细胞从一次有丝分裂结束后生长,再到下一次分裂结束的循环过程。细胞周期的长短反映了细胞所处状态,这是一个细胞物质积累与细胞分裂的循环过程。癌变的细胞以及特定阶段的胚胎细胞常常有异常的分裂周期。......阅读全文
细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。细胞周期是一个重要的检测参数,研究细胞周期变化的影响对于肿瘤的发展及药物研发有着重要的作用。例如,已知抑制有丝分裂的化合物大都用来减缓肿瘤细胞的生长。细胞周期内有两个阶段最为重要:G1 到
细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。细胞周期是一个重要的检测参数,研究细胞周期变化的影响对于肿瘤的发展及药物研发有着重要的作用。例如,已知抑制有丝分裂的化合物大都用来减缓肿瘤细胞的生长。细胞周期内有两个阶段最为重要:G1 到
前言监测对细胞周期变化的影响对于肿瘤的发展及药物研发有着重要的作用。例如,已知抑制有丝分裂的化合物大都用来减缓肿瘤细胞的生长。活细胞高内涵的筛选已被验证可以区分细胞的每个周期。此技术结合BacMam转染系统,可使细胞表达两种细胞周期相关荧光融合蛋白。延时监测实验持续2-3天,细胞置于ImageXpr
在肿瘤细胞培养过程中,细胞多处于不同的细胞周期时相中。不同时相的细胞对药物干预存在不同的反应,会影响实验的重复性,因此需要制备细胞周期一致的细胞。细胞同步化是解决该问题的好办法。细胞同步化是利用药物或其他方法使细胞停止在细胞周期的某个时相的技术,其基本原则是使细胞停留在细胞周期的特定时相上;停滞过程
细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,分为间期与分裂期两个阶段。过程间期间期又分为三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。1.G1期(first gap) 从有丝分裂到DNA复制前的一段时期,又称合成前期,
10月1日, 国际学术期刊 Nature Communications 在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)周斌组与上海交通大学胸科医院何奔组合作的研究成果“Cell proliferation fate mapping reveals regional c
在具有核(真核生物)的细胞(即动物,植物,真菌和原生质细胞)中,细胞周期分为两个主要阶段:间期和有丝分裂(M)阶段。在间期,细胞生长积累有丝分裂所需的营养,并复制其DNA和一些细胞器。在有丝分裂阶段,复制的染色体,细胞器和细胞质分成两个新的子细胞。为了确保细胞
12月28日,嘉和生物1类新药lerociclib片临床试验申请获CDE受理。拟开发用于治疗HR+/HER2 -转移性乳腺癌。 Lerociclib是G1 Therapeutics开发的一款潜在“best-in-class”的口服CDK 4/6(细胞周期蛋白依赖性激酶 4/6)抑制剂。今年6月
以有丝分裂方式增殖的细胞从一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的过程。这一过程周而复始。细胞周期是50年代细胞学上重大发现之一。在这之前认为有丝分裂期是细胞增殖周期中的主要阶段,而把处于分裂间期的细胞视为细胞的静止阶段。1951 年霍华德等用32P-磷酸盐标记了蚕豆根尖细胞,通过放射自显影研究根尖
张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。*张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%第二张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比*张图的S期有所增高,但G2期下降了。细胞周期是基于细胞处于不同分
*张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。*张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):21.7%第二张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比*张图的S期有所增高,但G2期下降了。细胞周期是基于细胞处于不同
请帮忙分析一下第一张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。能说明转染后的细胞增值能力强了吗,怎么看出来的。据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比第一张图的S期有所增高,但G2期下降了。细胞周期是基于细胞处于不同分裂时期具有不同的DNA含量而分析细胞处于不同的时期的方法。确切的说结果
第四节 细胞计数及活力测定一、原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞中活细胞所占的百分比叫做细胞活力,由组织中分离细胞一般也要检查活力,以了解分
细胞培养技术细胞周期的测定一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。 测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计数法
USP11通过p21调控细胞周期模式图。 湖南大学生物学院供图 湖南大学17日对外透露,该校分子科学与生物医学实验室(MBL)叶茂教授研究团队在国际上首次发现了细胞周期蛋白激酶抑制子p21的去泛素化酶USP11,证实了USP11通过去泛素化并稳定p21能够抑制细胞增殖。 细胞增殖是细胞生命活动的
实验方法原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。 单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。 BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)加入培养基后,可做为细胞
第一张是未转染的第12代,第二章是转染后的第22代。第一张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期 ):21.7%第二张图:增值率S(合成期)+G2/M(合成后期/分裂期):19.6%据此分析两者的增值没有明显的差别。虽然第二张图比第一张图的S期有所增高,但G2期下降了。细胞周期
细胞要作出一个较大的决定:它们应当进行复制还是处于静止状态?健康细胞能够以其中的任一种方式前进。癌细胞的复制开关停留在“开启”位置。如今,在一项新的研究中,来自美国科罗拉多大学博尔德分校的研究人员推翻了关于复制开关如何发挥作用的传统观点,即一种自1974年以来就被接受且被纳入到当前的教科书中的模
线粒体膜电位(MMP):使用几种染料中的其中一种就可以检测到细胞在凋亡过程中MMP的降低,如双氰基-双己氧基羰基靛蓝,它能够隐藏在活细胞的线粒体内。当MMP体系崩溃时,细胞的荧光就会减少。磷脂酰丝氨酸(PS)在细胞表面的分布情况:PS一般分布在质膜的内侧上。在细胞凋亡过程中,PS残余物会曝露在细胞表
上海科技大学生命科学与技术学院助理教授Yuu Kimata发表题为 “APC/C Ubiquitin Ligase: Coupling Cellular Differentiation to G1/G0 Phase in Multicellular Systems”的评论文章,介绍了近期发表的有
细胞周期(cell cycle)是指细胞从一次分裂完成开始到下一次分裂结束所经历的全过程,分为间期与分裂期两个阶段。(一) 间期间期又分为三期、即DNA合成前期(G1期)、DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2期)。1. G1期(first gap) 从有丝分裂到DNA复制前的一段时期,又称
抑癌基因(tumor suppressor gene)指正常细胞内存在的,能抑制细胞转化和肿瘤发生的一类基因群,当它们受到各种因子的作用失活后,细胞的生长分化失控,增加了细胞恶性转化的可能性。目前已分离克隆的抑癌基因有Rb、p53、p16、p33ING1、nm23、TIMP、KAI1、APH、MC
流式细胞仪在生物学中的应用 耿慧霞 ,王 来 ,王 强 (河南大学生命科学学院 ,河南开封 475001) 摘 要 :简要论述了流式细胞仪(flow cytometry ,FCM) 的工作原理 ,并对其在生物学基础科学研究中的应用进行阐述 ,包括 对细胞凋亡、细胞周期、免疫细胞、细胞受体的研
简介 P53蛋白主要分布于细胞核浆,能与DNA特异结合,其活性受磷酸化、乙酰化、甲级化、泛素化等翻译后修饰调控。正常P53的生物功能好似“基因组卫士(guardian of the genome)”,在G1期检查DNA损伤点,监视基因组的完整性。如有损伤,
原理: 细胞周期:细胞一世代所经历的时间从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计法等。BrdU(5溴脱氧尿嘧啶核苷)加入培养基
来自西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室的研究人员利用家蚕EST数据, 成功克隆了家蚕Cyclin B3基因(EU074796),并通过家蚕卵巢细胞系BmN-SWU1的BmCyclin B和BmCyclin B3基因RNA干涉研究,发现BmCyclin B和 BmCyclin B3 是
一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计数法等,这里介绍一种利用BrdU渗入测
真菌/酵母样品细胞细胞周期碘化丙啶红色荧光流式细胞分析试剂盒使用说明真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)红色荧光流式细胞分析试剂盒产品说明书(中文版)主要用途YIJI真菌/酵母细胞样品细胞周期碘化丙啶(PROPIDIUM IODIDE)红色荧光流式细胞分析试剂是
一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞计数法等,这里介绍一种利用BrdU渗入测
为了帮助研究人员更好地了解基本的细胞参与免疫,炎症,造血,瘤,和其他生物反应的机制,BD Biosciences公司提供了一系列工具,包括测量增殖反应的抗体,试剂盒和系统。利用流式细胞仪,免疫荧光或免疫组化,研究人员可以迅速准确地确定人口增殖的细胞周期状态的单个细胞内或组织定位。这些工具包括: B