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细胞的存储方法

细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:◆包含10%甘油的完全培养基,◆包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基,◆50% 细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基,或◆50% 细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:◆50% 细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基,或◆包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。1.悬浮细胞●计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。●以1×107到5×107细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中......阅读全文

上市公司跨界争夺细胞免疫治疗 产业化为时过早

  清华大学医学中心细胞治疗研究所所长张明徽没有想到,他研制的NKT细胞免疫治疗新技术的第一个志愿者是他学生的父亲,并且疗效出人意料。  “2010年,我的学生的父亲到了肝癌晚期,在北京肿瘤医院手术后仍然有残留癌没法清除干净,一个月后又出现了明显的肺部转移病灶,也没有有效的后续治疗方法可用,这种情况

细胞治疗产品研究与评价技术指导原则(试行)

为规范和指导按照药品研发及注册的细胞治疗产品的研究与评价工作,国家食品药品监督管理总局组织制定了《细胞治疗产品研究与评价技术指导原则(试行)》(见附件),现予发布。特此通告。食品药品监管总局2017年12月18日细胞治疗产品研究与评价技术指导原则(试行)一、前言近年来,随着干细胞治疗、免疫细胞治疗和

高通量药物筛选的简介

1. 化合物样品库化合物样品主要有人工合成和从天然产物中分离纯化两个来源。其中,人工合成又可常规化学合成和组合化学合成两种方法。2.自动化的操作系统自动化操作系统利用计算机通过操作软件控制整个实验过程。操作软件采用实物图像代表实验用具,简洁明了的图示代表机器的动作。自动化操作系统的工作能力取决于系统

免疫细胞治疗市场的上中下游分析

细胞治疗作为很有可能完全治愈癌症的新方法,这几年是收到“各路豪杰”的追捧。国外大的药企纷纷开始“联姻富国之路”;而国内的上市药企也不甘示弱,甚至是本不属于该领域的上市公司都在争先的挤入该领域来分羹,这类公司有姚记扑克,钢丝上的细胞——新日恒力等。细胞治疗产业包括干细胞治疗和免疫细胞治疗,上次已经介绍

还在为车厘子自由焦虑?有钱人追求的是“干细胞自由”

  当我们还在为“车厘子自由”奋斗时,不少有钱人已经将“干细胞自由”作为财务目标。据《中国经营报》报道,疾病面前人人平等可能已是句空话,现在有钱人见面不再比拼好房好车,而是问“你今天打了哪种干细胞?”  “现代长生不老药”?  干细胞现已成为国内高收入人群的宠儿。去年4位国内富豪组成“回春团”远赴乌

2018年糖尿病专题盘点

  2018年即将过去,年末为大家献上生物谷本年度糖尿病专题盘点,希望读者朋友们能够喜欢。1. Nature:利用细胞替换疗法治疗1型糖尿病取得重大进展!胞外基质组分决定着胰腺祖细胞的命运DOI: 10.1038/s41586-018-0762-2  I型糖尿病是一种自身免疫性疾病,它会破坏胰腺中产

流式细胞术的工作原理与发展综述

摘要:流式细胞术(flow cytometry, FCM)是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。是一项多学科交叉研究的结晶。流式细胞术及流式细胞仪的出现融合了医学,计算机学,物理学等众多学科背景。。它不仅测量速度快、准确度好、灵敏度高,而且还

流式细胞仪技术概述

  流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电

细胞培养的注意事项(二)

13.如何选择正确的血清种类?14.可否使用与原先培养条件不同的血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。15.血清灭活是否必须?这个问题

Nature:利用MEMOIR方法读取细胞的历史

  2016年11月22日/生物谷BIOON/--在一项新的研究中,来自美国加州理工学院的研究人员开发出一种新的方法来读取细胞的历史和“谱系图”。 这种被称作光学原位读取人工突变存储(Memory by Engineered Mutagenesis with Optical In situ Read

全自动细胞计数仪在单细胞测序中的应用

单细胞基因组学技术目前正应用得如火如荼,比如单细胞RNA测序(scRNA-seq)和染色质转座酶可接近性测序(ATAC-seq)。与传统的大量细胞测序方法相比,单细胞基因组学技术突出了细胞之间的差异,有助于更深入地了解样本材料。例如,scRNA-seq能够比较健康和疾病状态下的转录图谱,而ATAC-

MIT研究长期记忆神经回路,海马体和新皮层记忆同时产生

  当我们拜访一个朋友或去海滩时,大脑会在一个叫做海马体的部分存储短期的记忆。一段名为海马脑部的经验的短暂记忆。这些记忆之后会被“巩固”——即转移到大脑的另一部分进行长期存储。  一项最新的针对基于这一过程的神经回路的MIT 研究首次揭示出,记忆是在海马体和大脑皮层中的长期储存区同时形成的。然而,在

材料疗法的突破:用食用海藻“培养”血管

  当我们的皮肤或肌肉上有小伤口时,它们通常可以自行愈合。但是更深层的伤口,如糖尿病患者或在心脏病发作后的肌肉组织中,修复就变得困难了。此类问题通常需要更复杂的治疗,如果愈合不完全的话,最终可能需要截肢或移植。  虽然器官移植可以挽救生命,但是可供移植的器官却很短缺。因此,我们需要替代方法。  生物

CD34阳性细胞计数-2

其他研究组也对影响计数结果的因素进行了广泛的检查,如通过提供统一试剂或发行标准分析方案来进行。尽管这些研究减少了一些检测差异,但要进一步地提高实验的精确性需对各个检测中心进行全面的培训并发展标准的计数方案。此项工作由Nordic Myeloma研究组广泛开展,他们组织了两个协作组来制定计数标准方案并

培养细胞时需要注意的事项(二)

15.血清灭活是否必须?这个问题现在有争议。有人主张价格不菲的血清中含有诸如生长因子,维生素,氨基酸等珍贵物质,而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟的热处理会对血清中的生长因子,氨基酸等成分带来的负面影响。尽管如此,在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行,尤其是在昆虫细胞和胚胎干细胞培

GFP 和荧光共振能量转移技术测定蛋白质相互作用实验

            实验材料 进行转染的细胞株 按第二阶段所介绍的方法制备表达了蛋白质探针的细胞 试剂、试剂盒

干细胞治疗市场上中下游分析

导语:21世纪是生命科学大发展的世纪,干细胞研究促进了再生医学的发展,这是继药物治疗、手术治疗之后的又一场医疗革命。- 2009年11月3日.温家宝总理发表《让科技引领中国可持续发展》讲话细胞治疗作为有可能完全治愈癌症的新方法,收到各路资本的竞相追捧。国外大的医药企业通过投资、并购以及强强联合来巩固

血细胞分析仪50年发展历程和未来展望

1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜,1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大,后来被列文霍克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞,他是第一个见到红细胞的人,开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计并生产出第一

全球细胞治疗市场解析(附上市产品名单)

细胞疗法是一种将活细胞注射到病人体内以治疗某些疾病的方法。例如,注射T细胞用于治疗癌症,因为这些细胞能够在免疫治疗的过程中对抗癌细胞。近年来,细胞库的建设和发展,以及由此带来的细胞生产、存储等能力的扩展,增强了全球细胞疗法市场的容量。同时,引入有效的细胞疗法制造指南以及细胞治疗产品的有效性不断得到证

Nature子刊:实现同时编辑几十个基因!

  每个人都在谈论CRISPR-Cas。这种生物技术提供了一种相对快速和简单的方法来操纵细胞中的单个基因,这意味着它们可以被精确地删除、替换或修改。此外,近年来,研究人员也一直在使用基于CRISPR-Cas的技术系统地增加或减少单个基因的活性。无论是在基础生物学研究领域,还是在植物育种等应用领域,相

iPS细胞存储有望成为未来最大的健康保险

  近日,山东某机构实施了中国首例人体冷冻的新闻被广泛关注,在此之前,已逝重庆女作家杜虹被家属花费79万将其大脑运到美国进行冻存,盼50年后能够起死回生。这个原本仅在在科幻电影中出现的场景,在现实生活中已经开始有人付之行动。几十年后能把冷冻的人体起死回生真的可信吗?   人类都渴望得到永生,但今天

通过技术创新 驱动CAR-T制造优化

随着CAR-T疗法获批上市,优化CAR-T细胞生产工艺成为迫切需求,市场急需更高效、成本更低的细胞生产工艺。2017年全封闭自动化CAR-TXpress™系统正式进入CAR-T市场,为全球带来新一代CAR-T生产工艺,可实现CAR-T细胞高效率、低成本生产,备受瞩目。近日,《CELL

2018年9月28日Science期刊精华

  本周又有一期新的Science期刊(2018年9月28日)发布,它有哪些精彩研究呢?让小编一一道来。  1.Science:重大进展!鉴定出有害藻花产生强效神经毒素软骨藻酸的基因簇  doi:10.1126/science.aau0382; doi:10.1126/science.aau9067

原能细胞全程冷链保护自动化存储与手动化存储对细胞...

原能细胞全程冷链保护自动化存储与手动化存储对细胞的影响对比实验本文作者:徐艳红、王美霞、陈思晔、应碧、于瑶、许志峰、张雪宾、王建信、刘威、郭昊*、何晓文**通讯作者。邮箱:peterhe@canature.com (何晓文),guohao@origincell.com (郭昊)&

测量单个细胞染色质可接近性,从而揭示胚胎发育路径

  在一项新的研究中,美国华盛顿大学和位于德国海德堡市的欧洲分子生物学实验室的研究人员证实细胞类型和发育阶段能够从数千个单细胞的染色质可接近性(chromatin accessibility, 也译作染色质开放性)测量中推导出来。他们利用这种方法发现正在发育的胚胎中的细胞如何调节它们的身份,从而决定

血细胞分析仪的检测技术及发展

  谈到血细胞计数仪的发展史,不得不提到在这个领域首开先河的人。他是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter,最初是一位广播电台的电器工程师,后来做过X光机的销售员和维修工程师,在亚洲许多国家包括我国的上海工作过。1948年他在芝加哥一家公司工作时,在一间地下

通过技术创新 驱动CAR-T制造优化

  随着CAR-T疗法获批上市,优化CAR-T细胞生产工艺成为迫切需求,市场急需更高效、成本更低的细胞生产工艺。2017年全封闭自动化CAR-TXpress™系统正式进入CAR-T市场,为全球带来新一代CAR-T生产工艺,可实现CAR-T细胞高效率、低成本生产,备受瞩目。近日,《CELL &

2019年8月CRISPR/Cas最新研究进展

  基因组编辑技术CRISPR/Cas9被《科学》杂志列为2013年年度十大科技进展之一,受到人们的高度重视。CRISPR是规律间隔性成簇短回文重复序列的简称,Cas是CRISPR相关蛋白的简称。CRISPR/Cas最初是在细菌体内发现的,是细菌用来识别和摧毁抗噬菌体和其他病原体入侵的防御系统。图片

Nature:人类细胞图谱研究先锋Aviv Regev

  Aviv Regev是一位生物分析专家。现在,她正致力于绘制人体的每一个细胞。  计算生物学家Aviv Regev喜欢做一些看似不可能完成的任务。2011年,她与分子遗传学家Joshua Levin合作,测试了RNA测序的几种方法。科学家们在测试几种技术的极限,以查看哪种方法表现最佳。他们用降解

细胞免疫治疗:基因测序后的下一个万亿市场

  一、炒作导火线来源于瑞银证券日前的一篇报告  瑞银证券日前发布研报认为,免疫治疗产品有望成为肿瘤领域的下一座金矿。临床实验结果显示了肿瘤免疫(tumor immunity)治疗的良好应用前景:利用人体自身的免疫系统(immune system)治疗肿瘤,即肿瘤免疫(tumor immunity)