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免疫沉淀的方法特点和应用

免疫沉淀是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后,再与蛋白A/G(ProteinA/G)或二抗偶联的珠子(agarose或Sepharose)孵育,通过离心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物,沉淀经过洗涤后,重悬于电泳上样缓冲液,煮沸5-10min,在高温及还原剂的作用下,抗原与抗体解离,离心收集上清,上清中包括抗体、目的蛋白和少量的杂蛋白。......阅读全文

免疫沉淀的方法特点和应用

免疫沉淀是利用抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后,再与蛋白A/G(ProteinA/G)或二抗偶联的珠子(agarose或Sepharose)孵育,通过离心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物,沉淀经过洗涤后,重悬于电泳上样缓冲液,煮沸

免疫沉淀(Immunoprecipitation)实验材料和方法

免疫沉淀是利用特异性抗体识别并分离抗原的方法。材料:上样buffer的配方(用前现配):2ul 1.25M Tris-HCL , pH 6.835ul distilled water2.5ul 2-mercaptoethanol12.5ul 10%SDS10ul 80% glycerol2ul br

可用于免疫沉淀的抗体类型和特点介绍

有3种类型的抗体可用于免疫沉淀:多克隆抗体,混合单克隆抗体和单克隆抗体。多克隆抗体混合单克隆抗体单克隆抗体反应强度极好抗体依赖性(极差到极好)极好特异性一般良好(有时本底高)极好,但有些出现交叉反应极好,避免使用有交叉反应的抗体优点稳定,多价反应特异供应不受限制稳定,多价反应特异供应不受限制缺点本底

放射免疫沉淀法的方法特点

中文名称放射免疫沉淀法英文名称radioimmunoprecipitation定  义以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

光聚合的方法特点和应用

光聚合是指用光化学反应使单体聚合的方法。单体可以直接受光激发引起聚合,或者由光敏剂、光引发剂受光激发而引起聚合,后者又称光敏聚合。这种方法具有聚合温度低、反应选择性高和易控制等特点,可以发生一般分子不能进行的反应,扩大了获得高分子的手段。光聚合所用的光源主要是高压或中压汞灯(不连续光)和氙灯(连续光

渗析方法的技术特点和应用

利用半透膜的选择透过性来分离不同的溶质粒子(如离子)的方法称为渗析。在电场作用下进行渗析时,溶液中的带电的溶质粒子(如离子)通过膜而迁移的现象称为电渗析。利用电渗析进行提纯和分离物质的技术称为电渗析法,它是20世纪50年代发展起来的一种新技术,最初用于海水淡化,现在广泛用于化工、轻工、冶金、造纸、医

免疫沉淀的方法步骤

   说到实验,毕竟是“说”,重要的是动手“做”。其实我们所发布的一些过程步骤等相当于说明书,我们能够给出的是一些知识与提醒注意,一个实验是不能看会的,所以朋友们可通过来了解,需要的朋友们可以自己动手来实践的。我们今天说的这个实验呢是免疫沉淀的实验,过程还是比较简单的。    免疫沉淀一般用于分析抗

免疫沉淀法的技术特点

免疫沉淀法(Immunoprecipitation, IP)是一种研究蛋白质间交互作用的生物技术,这种技术是将蛋白质视为抗原,并利用抗体与之进行特异性结合的特性,来进行研究。这项技术可用来将含有上千种不同蛋白质的样品中,分离和浓缩出特定蛋白质。进行免疫沉淀法时,抗体需要和一个受质结合。

牵出试验的技术方法和应用特点

中文名称牵出试验英文名称pull down experiment定  义分子生物学中指利用分子间的相互结合特性来分离特定分子的一种技术,常用于体内和体外蛋白质的分离和分析。如将一种蛋白质沉淀分离的同时,与这种蛋白质特异结合的另一种蛋白质也带出来,就能达到分离后者或证明两种蛋白质能够特异性结合的目的。

表达克隆的方法特点和应用

中文名称表达克隆英文名称expression cloning定  义通过进行基因表达而克隆目的基因的方法。用表达载体构建互补DNA(cDNA)或基因组DNA表达文库,转入细菌或细胞内进行表达,再通过特定表型进行筛选,从而获得目的基因克隆。该方法可以对任何能表达可筛选表型的基因进行克隆。应用学科生物化

夹心法分析的方法特点和应用

中文名称夹心法分析英文名称sandwich assay定  义利用一种分子有两个不同特异性反应区域所设计的分析方法。如在免疫测定中,将固相化的抗体或抗原与待测抗原或抗体结合后,再以标记的另一种抗体或抗原(识别不同部位)与之反应;分子杂交时,固相化的目标核酸分子先与连接地高辛精的探针结合,然后用带标志

电穿孔的方法概念和应用特点

电穿孔(Electroporation)也叫电转染,是通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。这种技术可以将核苷酸、DNA 与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。

荧光分析的方法原理和应用特点

荧光分析法是指利用某些物质被紫外光照射后处于激发态,激发态分子经历一个碰撞及发射的去激发过程所发生的能反映出该物质特性的荧光,可以进行定性或定量分析的方法。由于有些物质本身不发射荧光(或荧光很弱),这就需要把不发射荧光的物质转化成能发射荧光的物质。例如用某些试剂(如荧光染料),使其与不发射荧光的物质

固相技术方法特点和应用

中文名称固相技术英文名称solid phase technique定  义将反应物固定在载体上或用其他方式使其以不溶的方式参与反应的技术。如固相杂交、固相免疫分析、固相多肽合成、固相序列测定等都是固相技术的应用,能提高效率,使操作快速、简便、自动化。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技

液氮罐的特点、使用方法和应用

液氮罐通常包含液氮贮存罐以及液氮运输罐两种。室内液氮的静置贮存主要使 贮存罐,其不适合在工作状态下作远距离运输使用。液氮运输罐作了专门的防震设计以便使运输的条件得到满足。液氮运输罐不但能够静置贮存,而且还能够在充装液氮状态下,作运输使用,然而剧烈的碰撞和震动也需要避免。下面就让小编带你了解一下液氮罐

免疫共沉淀的方法特点和应用介绍

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。当用预先固化在agaros

染色质免疫沉淀技术的应用

随着人类基因组测序工作的基本完成,功能基因组学逐渐成为研究的热点。而基因表达的调控又是功能基因组学的一个重要研究领域,要想提供蛋白因子直接调控的证据,需要直接检测蛋白质-DNA的相互作用,而染色质免疫沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)就是一种研

免疫沉淀的实验方法介绍

免疫沉淀的实验过程比较简单,一般分为3个阶段;①抗原溶液的制备;②裂解物非特异性本底的预处理;③免疫复合物的形成与纯化。 免疫沉淀的第一步是制备抗原溶液。任何抗原溶液均可作为免疫沉淀的材料来源,但免疫沉淀一般采用细胞或组织制备的裂解物。裂解物的制备可采用多种方法,其中首选用温和的去污剂如非离子去污剂

核酸酶保护分析的方法特点和应用

中文名称核酸酶保护分析英文名称nuclease protection assay定  义当核酸(DNA、RNA)中某段序列能与其他核酸(DNA、RNA)形成互补结合或与某种蛋白特异结合后,核酸酶(如S1核酸酶)就只能降解反应系统中未结合的核酸,留下被结合的核酸段落可以定性或定量检测出来的方法。此法可

基因组印记的方法特点和应用

基因组印记(genomic imprinting)是表观遗传学调节的一种形式。指两个亲本等位基因差异甲基化而导致的一个亲本等位基因沉默而另一个亲本等位基因保持活性的现象。通过对富含CpG岛的印记中心的差异甲基化来作用。

放射免疫沉淀法的技术特点

中文名称放射免疫沉淀法英文名称radioimmunoprecipitation定  义以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

放射免疫沉淀法技术特点

中文名称放射免疫沉淀法英文名称radioimmunoprecipitation定  义以放射性标记的抗原或抗体进行的免疫沉淀法。能大大提高检测抗原抗体复合体的灵敏度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

恒温摇床的应用和特点

恒温摇床,是一种温度可控的恒温培养箱和振荡器相结合的生化仪器,主要适用于各大中院校、医疗、石油化工、卫生防疫、环境监测等科研部门作生物、生化、细胞、菌种等各种液态、固态化合物的振荡培养。 其主要特点: A:温控精准数字显示。 B:开设有补氧孔、恒温工作腔补氧充足。 C:设有机械定时。 D

基因作图的应用和特点

基因作图(英文gene mapping)是一种遗传学作图,用来定位染色体中特定的DNA片段。是基因组研究的成果之一,主要分为以重组率为定位依据的遗传舆图,以及以DNA片段实际位置为依据的物理舆图,两这各有不同用途与优缺点。

微量层析的特点和应用

中文名称微量层析英文名称microchromatography定  义采用微型层析柱和高灵敏检测器的层析方法。适合于样品量很少的样品分析。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

D环的特点和应用

指DNA双链的局部,由具有互补性单链DNA与之结合所产生的环状结构。当DNA复制开始,在原来的双链中仅一方被新合成的短DNA单链被置换的情况下可以见到(为Displacement loop之简称)。可通过人工使DNA单链结合来制成此结构。由RNA单链所产生的类似结构称为R环。

流动相的特点和应用

色谱过程中携带待测组分向前移动的物质称为流动相。与固定相处于平衡状态、带动样品向前移动的另一相。

IGBT的概念和应用特点

IGBT(Insulated Gate Bipolar Transistor),绝缘栅双极型晶体管,是由(Bipolar Junction Transistor,BJT)双极型三极管和绝缘栅型场效应管(Metal Oxide Semiconductor,MOS)组成的复合全控型电压驱动式功率半导体器

SD序列的特点和应用

Shine-Dalgarno (SD)是细菌和古细菌中信使RNA中核糖体结合位点序列。通常位于翻译起始密码子AUG上游约8~10个碱基位置。SD序列帮助招募核糖体RNA,并将核糖体比对并结合到信使RNA(mRNA)的起始密码子,从而开始蛋白质合成。一旦被招募,tRNA可以按照密码子的指令顺序添加氨基

组织芯片的特点和应用

组织芯片(tissue chip),也称组织微阵列(tissue microarrays),是生物芯片技术的一个重要分支,是将许多不同个体组织标本以规则阵列方式排布于同一载体(使用载玻片最多)上,进行同一指标的原位组织学研究。该技术自1998年问世以来,以其大规模、高通量、标准化等优点得到大范围的推