免疫反应的操作步骤

1、将膜用TBS从下向上浸湿后,移至含有封闭液的平皿中,室温下脱色摇床上摇动封闭1h。2、将一抗用TBST稀释至适当浓度(在1.5ml离心管中);撕下适当大小的一块儿保鲜膜铺于实验台面上,四角用水浸湿以使保鲜膜保持平整;将抗体溶液加到保鲜膜上;从封闭液中取出膜,用滤纸吸去残留液后,将膜蛋白面朝下放于抗体液面上,掀动膜四角以赶出残留气泡;室温下孵育1~2h后,用TBST在室温下脱色摇床上洗两次,每次10min;再用TBS洗一次,10min。3、同上方法准备二抗稀释液并与膜接触,重复步骤(2)中最后一步,进行化学发光反应。......阅读全文

关于免疫组化法的操作步骤介绍

  1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行  2.缓冲液洗 3min/2 次。  3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。  4. 缓冲液洗 5min/2 次。  5. 滴加 Ultra

间接免疫荧光法的操作步骤介绍

  1、细胞准备与固定  (1)单层生长细胞:取对数生长细胞,用0.25%胰蛋白酶消化,制成单细胞悬液。将细胞接种到预先放置几张6×22mm盖玻片的培养瓶或培养皿中,置二氧化碳培养箱培养1-3天,待细胞接近长成单层,取出盖玻片,进入PBS(0.01 mol/L,pH7.4)洗2次,然后根据实验目的,

低温恒温反应浴使用准备和操作步骤

  低温恒温反应浴使用准备和操作步骤:   1、用保温软管把该设备的进、出液口分别与实验设备的出、进口对应连接好。(保温软管是设备所带配件相关)   2、打开保温盖从水槽口加入水或其它介质,液体必须掩盖住蒸发器。   3、接通电源 在连接电源之前要确定安全开关是关闭的。 将电源接头插入专用的插座上,

微波化学反应器操作使用步骤

 微波这种东西,不可谓不熟。它是一种波长极短的电磁波,和无线电波、红外线、可见光一样,都属于电磁波,微波的频率范围从300MHz到300KMHz,即波长从1毫米到1米的范围。微波加热的原理:微波加热就是将微波作为一种能源来加以利用,当微波与物质分子相互作用,产生分子极化、取向、摩擦、碰撞、吸收微波能

免疫组化实验操作步骤有哪些

   免疫组化实验所需试剂    1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L.    2)0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠

免疫组化实验操作步骤有哪些?

  免疫组化实验所需试剂    1)PBS缓冲液(pH7.2~7.4):NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L.    2)0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液(CB,pH6.0,1000ml):柠檬酸三钠 3g,

免疫组化具体操作步骤

   免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技

Western-免疫印迹实验原理和操作步骤

[实验原理]Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶

免疫组化具体操作步骤

  免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞

免疫荧光操作步骤(漂片,冰冻切片)

实验概要免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定

免疫荧光操作步骤(漂片,冰冻切片)

实验概要免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定

微波化学反应仪的操作分为五个步骤

微波化学反应仪操作步骤:1.把微波化学反应仪电源接通,打开电源开关。电源指示灯、炉灯、液晶屏同时亮起。 2.微波腔体内必须放置好您所需要反应的化学物质。 3.设定工作时段的参数反应器共分五个工作时段。每个工段下档位,温度,时间独立可调。档位输入范围01-10,01为较低档,表示10%功率。10为较,

逆转录聚合酶链反应的操作步骤

1. 总RNA的提取:见相关内容。2. cDNA第一链的合成:试剂公司有多种cDNA第一链试剂盒出售,其原理基本相同,但操作步骤不一。现以GIBICOL公司提供的SuperScript Preamplification System for First Strand cDNA Synthesis 试

全自动酶联荧光免疫分析系统的操作步骤

①根据所要鉴定的某类菌,准备该菌的样本,一般为该菌的增菌液。②在电脑上选择所需鉴定菌的鉴定程序。③把试条放入预设的位置,加入样品。④放 SPR

免疫印迹法的操作步骤及注意事项

  操作步骤  一蛋白质样品获得:细菌诱导表达后,可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞,真核细胞加匀浆缓冲液,机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃,13,000r离心15min。取上清液作为样品。  二电泳:制备电泳凝胶,进行SDS-PAGE。  三转移:(半干式转移)  1、电泳结束后将胶条

聚合酶链反应(PCR)详细实验操作步骤

  一、实验原理  聚合酶链反应(PCR)技术是在体外进行的由引物介导的酶促DNA扩增反应。PCR的原理是在模板DNA、PCR引物、四种脱氧核糖核苷酸(dNTP)及适当浓度的Mg2+存在的条件下,依赖于DNA聚合酶的体外酶促合成反应。两个引物分别位于靶序列两端,同两条模板的3’端互补,由此限定扩增片

铁蛋白免疫电镜技术原理和操作步骤

实验概要本文介绍了铁蛋白免疫电镜技术的原理、材料试剂和操作方法等。实验原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。主要试剂1.马脾铁蛋白2.硫酸铵3.硫酸镉4.双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante

全自动酶联荧光免疫分析系统操作步骤

  ①根据所要鉴定的某类菌,准备该菌的样本,一般为该菌的增菌液。  ②在电脑上选择所需鉴定菌的鉴定程序。  ③把试条放入预设的位置,加入样品。  ④放 SPR

铁蛋白免疫电镜技术原理和操作步骤

实验概要本文介绍了铁蛋白免疫电镜技术的原理、材料试剂和操作方法等。实验原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体,再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查,观察到铁蛋白抗体所在的位置,即抗原所在。主要试剂1.马脾铁蛋白2.硫酸铵3.硫酸镉4.双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante

免疫组化染色具体操作步骤

  免疫组化染色具体操作步骤介绍    (以美国ZYMED公司SP试剂盒为例)    1、石蜡切片脱蜡至水。    2、3%H2O2室温孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。    4、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。    5、 5~10%正

免疫组化试剂盒实验操作步骤

仪器、设备:移液器、免疫组化笔、微波炉或高压锅、计时器、孵育湿盒、染色架、盖玻片、光学显微镜、洗瓶等。溶液配制:PBS溶液配制;EDTA组织抗原修复液及DAB显色液使用详见免疫组化试剂盒产品说明书操作步骤。实验温度:15-28℃ 实验步骤:1. 脱蜡水化1) 石蜡切片置于新鲜的二甲苯中,浸泡15 m

免疫沉淀实验原理、仪器试剂和操作步骤

(一)原理免疫沉淀是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后,再与蛋白 A/G(Protein A/G)或二抗偶联的agaose或Sepharose珠子孵育,通过离心得到珠子-蛋白A/G或二抗-抗体-目的蛋白复合物,沉淀经洗涤后,重悬于电泳上

免疫组化染色具体操作步骤

   免疫组化染色具体操作步骤介绍    (以美国ZYMED公司SP试剂盒为例)    1、石蜡切片脱蜡至水。    2、3%H2O2室温孵育5~10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。    4、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟,(如需采用抗原修复,可在此步后进行)。    5、 5~10%正常山羊血

噪音计操作步骤及操作步骤

  噪音计-操作步骤  1、打开噪音计携带箱,取出噪音计,套上传感器。  2、将噪音计置于A状态,检测电池,然后校准噪音计。  3、对照常见的环境声级大小表,调节仪器的测量量程。  4、测量:可以用快(测量声压级变化较大的环境的瞬时值)、慢(测量声压级变化不大的环境中的平均值)、脉冲(测量脉冲声源)

实时逆转录聚合酶链反应的操作步骤

  1. 总RNA的提取:见相关内容。  2. cDNA第一链的合成:试剂公司有多种cDNA第一链试剂盒出售,其原理基本相同,但操作步骤不一。现以GIBICOL公司提供的SuperScript Preamplification System for First Strand cDNA Synthes

光反应的步骤

光反应包括两个步骤:(1)光能的吸收、传递和转换的过程——一通过原初反应完成。原初反应的基本单位是光合单位,由100多个天线色素和一个作用中心构成。其中作用中心由原初电子供体、反应中心色素分子(也称作用中心)、原初电子受体组成。其中反应中心色素分子具有光化学特性,其余天线色素分子仅具有光物理特性。其

PCR的反应步骤

   聚合酶链式反应在热循环设备中进行。PCR仪可以将反应管加热或冷却到每步反应所需的精确的温度。为防止反应体系中液体产生蒸气,通常在反应管上加盖加热的盖子(比加热板温度来的高),或者在反应体系表面加入一层石蜡油。一般PCR反应由20到35个循环组成,包括以下步骤[3]:  1 变性:利用高温(93

酶联免疫吸附测定的方法类型和操作步骤

ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本,干扰小可以测到每毫升纳克水平的细胞因子(或受体)的水平。在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体,②酶标记的抗原或抗体,③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出

竞争法酶联免疫吸附测定的操作步骤

⑴将特异抗体与固相载体连接,形成固相抗体。洗涤。⑵待测管中加受检标本和一定量酶标抗原的混合溶液,使之与固相抗体反应。如受检标本中无抗原,则酶标抗原能顺利地与固相抗体结合。如受检标本中含有抗原,则与酶标抗原以同样的机会与固相抗体结合,竞争性地占去了酶标抗原与固相载体结合的机会,使酶标抗原与固相载体的结

免疫印迹法实验的操作步骤和注意事项

  操作步骤  一蛋白质样品获得:细菌诱导表达后,可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞,真核细胞加匀浆缓冲液,机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃,13,000r离心15min。取上清液作为样品。  二电泳:制备电泳凝胶,进行SDS-PAGE。  三转移:(半干式转移)  1、电泳结束后将胶条