铁蛋白免疫电镜技术原理和操作步骤
实验概要本文介绍了铁蛋白免疫电镜技术的原理、材料试剂和操作方法等。实验原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。主要试剂1．马脾铁蛋白2．硫酸铵3．硫酸镉4．双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante ，XC)以0.30mol/L pH9.5硼酸盐缓冲液将XC配制成1%溶液。注意配制的水及容器必须特别清洁，配制后放置4℃数天，以不出现沉淀为准。如出现沉淀XC的多聚体形成，应重配。5．0.30Mol/L pH 9.5硼盐酸缓冲液6．0.1Mol/L硫酸铵液7．0.05Mol/L pH7.4 PBS液实验步骤1．铁蛋白的提取 1) 配制2%硫酸铵液，并以1mol/L的NaOH或HCl调pH值，正好为5.85。取1g铁蛋白溶于100ml的2%硫酸铵液中。 2) 加入20%硫酸镉，使最终浓度......阅读全文
铁蛋白免疫电镜技术原理和操作步骤
实验概要本文介绍了铁蛋白免疫电镜技术的原理、材料试剂和操作方法等。实验原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。主要试剂1．马脾铁蛋白2．硫酸铵3．硫酸镉4．双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante
铁蛋白免疫电镜技术原理和操作步骤
实验概要本文介绍了铁蛋白免疫电镜技术的原理、材料试剂和操作方法等。实验原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。主要试剂1．马脾铁蛋白2．硫酸铵3．硫酸镉4．双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante
铁蛋白免疫电镜技术原理、材料试剂和操作方法
（一） 原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。（二）材料与试剂1．马脾铁蛋白2．硫酸铵3．硫酸镉4．双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante ，XC)以0.30mol/L pH9.5硼酸盐缓冲液
铁蛋白免疫电镜技术
（一） 原理 免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。（二）材料与试剂1．马脾铁蛋白2．硫酸铵3．硫酸镉4．双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol/L pH 9.5硼酸盐
铁蛋白免疫电镜技术
一、 原理 免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。 二、材料与试剂 1．马脾铁蛋白 2．硫酸铵 3．硫酸镉 4．双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol/L pH 9.5
免疫铁蛋白电镜技术
1．基本原理 铁蛋白的分子量460kD，为一种含铁(约占23%)的蛋白质。直径10―12nm。目前常用的间接免疫染色技术是应用低分子量的双功能试剂将第二抗体与铁蛋白相连，制备标记抗体。此复合物既保留了抗体的免疫活性，又因铁蛋白含有2000―3000个铁原子的致密铁离子核心，形成四个圆形致密区，所以
免疫学技术：铁蛋白免疫电镜技术
一、 原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。二、材料与试剂1．马脾铁蛋白2．硫酸铵3．硫酸镉4．双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol/L pH 9.5硼酸盐缓冲液将
酶免疫电镜技术原理、材料和操作方法
（一）原理酶免疫电镜技术是利用酶的高效率的催化作用对其底物的反应形成不同的电子密度，借助于电子显微镜观察，证明酶的存在，从而对抗原进行定位。（二）材料与试剂1．PBS液取NaCl 8.5g，Na2HPO40.85g，KH2PO40.54g，加水至1 000ml即可。2．DAB溶液取5mgDAB(3、
免疫铁蛋白技术的技术特点和原理
中文名称免疫铁蛋白技术英文名称immunoferritin technique定 义将抗体以共价键与铁蛋白连接，利用电子密度大的铁蛋白在电子显微镜下为相应的抗原定位提供标记的方法。铁蛋白也可以标记抗原或其他蛋白质。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
非标记抗体免疫电镜技术原理、材料和操作方法
（一） 原理标记抗体法虽然具有许多优点，但也存在一些难以克服的问题，如标记抗体的分子增大，对细胞膜和组织的穿透力减弱；化学交联反应对抗体和酶的活性有所影响；结合物中未标记的抗体可与抗原竞争结合，影响检测方法的敏感性等。不标记抗体法可以避免上述的不利影响因素，通过一系统的非标记抗体的免疫学反应，对组织
铁蛋白免疫电镜实验
铁蛋白免疫可应用于：（1）检测抗原；（2）定位细胞内铁蛋白抗体位置。实验方法原理免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。实验材料马脾铁蛋白试剂、试剂盒硫酸铵硫酸镉双异氰酸镉二甲苯硼盐酸缓冲液硫酸铵液 PBS蒸馏水仪器、耗材
铁蛋白免疫电镜实验
实验方法原理 免疫铁蛋白技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。实验材料 马脾铁蛋白试剂、试剂盒 硫酸铵硫酸镉双异氰酸镉二甲苯硼盐酸缓冲液硫酸铵液 PBS蒸馏水仪器、耗材 离心机显微镜微孔滤膜实验步骤 一、材料与试剂准备 1. 马
非标记抗体免疫电镜操作步骤
1．经典法（1）将被检病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀释的特异性免疫血清0.1ml充分混合。（2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃过夜。（3）以17 000r/min～23 000r/min离心90min。（4）吸去上清，将离心管口倒置于滤纸上，吸去残留液体。（5）沉淀物中加少量H2
RFLP和RAPD技术原理和操作步骤
原理：DNA分子水平上的多态性检测技术是进行基因组研究的基础。RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism,限制片段长度多态性)已被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。RFLP是根据不同品种（个体）基因组的限制性内切酶的酶切位点
Southern印迹技术原理和操作步骤
实验原理:Southern印迹是将DNA片断从电泳凝胶上直接转移至膜支持物（如硝酸纤维素膜、尼龙膜）上，使DNA片断固定的技术。先将DNA经限制性内切酶消化成一系列片段，进行琼脂糖凝胶电泳，各片段因分子量不同而彼此分开，然后经碱处理凝胶，使DNA的片段被变性、中和并通过毛细作用在高盐缓冲液中在原位将
非标记抗体免疫电镜的操作步骤
1．经典法 （1）将被检病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀释的特异性免疫 血清0.1ml充分混合。（2）置37℃作用1h或37℃1h后再置4℃过夜。（3）以17 000r/min～23 000r/min离心90min。（4）吸去上清，将离心管口倒置于滤纸上，吸去残留液体。（5）沉淀物中加少量H
Western－免疫印迹实验原理和操作步骤
[实验原理]Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶
免疫酶技术的操作步骤
（1） 用微量移液器分别加待检血清、阳性对照、阴性对照各100μl于1、2、3孔中，370C水浴箱温育30min。（2） 用PBS液洗板3次，每次3min，甩干。（3） 每孔加入酶结合物2滴，370C水浴箱温育30min。（4） 用PBS液洗板3次，每次3min，甩干（5） 每孔分别加入显色A液、B
免疫荧光技术操作步骤
基本原理将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高，非特异性荧光染色少，相对使用标记抗体用量偏大。试剂与仪器磷酸盐缓冲盐水(PBS)：0.01mol/L，pH7.4荧光标记的抗体溶液：以 0.01mol/L，pH7.4 的 PBS 进行稀释缓冲甘油：分析纯无荧光的甘油
免疫电镜原理和影响因素
（一） 原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物，是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类：一类是免疫凝集电镜技术，即采用抗原抗体凝集反应后，再经负染色直接在电镜下观察；另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标记的抗体与相应抗原相结合，在电子显
免疫沉淀实验原理、仪器试剂和操作步骤
（一）原理免疫沉淀是利用抗原抗体特异性反应纯化富集目的蛋白的一种方法。抗体与细胞裂解液或表达上清中相应的蛋白结合后，再与蛋白 A／G（Protein A／G）或二抗偶联的agaose或Sepharose珠子孵育，通过离心得到珠子－蛋白A／G或二抗－抗体－目的蛋白复合物，沉淀经洗涤后，重悬于电泳上
细胞冻存和复苏技术原理和操作步骤
一、原理在不加任何条件下直接冻存细胞时，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等，能引起细胞死亡。如向培养液加入保护剂，可使冰点降低。在缓慢的冻结条件下，能使细胞内水份在冻结前透出细胞。贮存在－130℃以下的低温中能减少冰晶的形成
免疫铁蛋白技术
中文名称免疫铁蛋白技术英文名称immunoferritin technique定 义将抗体以共价键与铁蛋白连接，利用电子密度大的铁蛋白在电子显微镜下为相应的抗原定位提供标记的方法。铁蛋白也可以标记抗原或其他蛋白质。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
免疫铁蛋白技术
实验概要本文介绍了铁蛋白免疫电镜技术，铁蛋白免疫电镜技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。主要试剂1. 马脾铁蛋白2. 硫酸铵3. 硫酸镉4. 双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol
免疫铁蛋白技术
实验概要本文介绍了铁蛋白免疫电镜技术，铁蛋白免疫电镜技术是以铁蛋白标记抗体，再以铁蛋白抗体与待检抗原作用。通过电镜检查，观察到铁蛋白抗体所在的位置，即抗原所在。主要试剂1. 马脾铁蛋白2. 硫酸铵3. 硫酸镉4. 双异氰酸镉二甲苯(Metaxylene dlisocyante XC)以0.30Mol
免疫铁蛋白技术的定义和应用
中文名称免疫铁蛋白技术英文名称immunoferritin technique定 义将抗体以共价键与铁蛋白连接，利用电子密度大的铁蛋白在电子显微镜下为相应的抗原定位提供标记的方法。铁蛋白也可以标记抗原或其他蛋白质。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），方法与技术（二级学科）
免疫电镜技术
近年来，免疫学方法与电镜技术相结合，形成了一种免疫电镜技术(Immunoelec-tronmicroscopy，IEM)，使抗原定位达到了亚细胞水平。该技术由以下环节组成：(一) 组织准备 用于免疫电镜检测的组织多种多样，所以各自在组织制备时都具有其特点。一般讲，组织力新鲜并进行无活动力状态处理，例
免疫印迹（Western－blotting）实验原理、试剂和操作步骤
(一)原理Western blot是一种在PVDF或硝酸纤维素（NC）膜上进行的抗原抗体反应。蛋白电泳后，将蛋白转移至膜上，再与特异性抗体孵育，洗去游离的抗体，然后和酶标记的二抗孵育，再进行底物显色。由于抗原抗体反应特异性好，亲合力高，Western blot检测的灵敏度较高，尤其是采用
免疫电镜相关技术实验——酶标记免疫电镜技术
实验方法原理该技术是以酶为抗原—抗体反应的标记物，在不改变抗原抗体的免疫反应特异性，亦不降低酶活性条件下，与相应底物作用后形成不溶性的反应物。在电镜下形成为电子散射力强的终末产物。用于免疫电镜标记的酶有辣根过氧化物酶 (HRP)碱性磷酸酶 (AKP 或 ALP)葡萄糖氧化酶(GOP) 等。目前常用的
免疫电镜相关技术实验—病毒颗粒免疫电镜技术
病毒是极微小的生物体，用电镜观察时，由于其变形、损伤或杂质的存在，以及标本中病毒的数量有限，只靠其形态特点较难确切辨认。为了提高辨认的准确性，可应用特异性抗体，使其与病毒结合，在电镜下可清晰地辨认特异性抗体及其结合的病毒。这种将免疫学检测方法应用于电镜检查的技术就是免疫电镜技术 (Immunoele