在ASMS上推出净化磷酸肽的离心柱
一种可替代C18树脂的更有效的净化磷酸肽的离心柱 在ASMS 2010上被推出 赛默飞世尔科技在ASMS 2010上推出了一种可代替C18树脂，更有效地净化磷酸肽的离心柱。 ROCKFORD, Ill（2010年5月24日）——服务科学全球领先的赛默飞世尔科技，今天推出了Thermo Scientific Pierce 石墨离心柱（Pierce Graphite Spin Columns），用于纯化磷酸肽。Pierce 石墨离心柱能够有效地结合亲水的多肽，例如磷酸化肽。相比C18树脂来说，它可以去除尿素、盐类和其它污染物。对于从蛋白消解物，强阳离子交换馏分，从TiO2 和固定化金属亲合色谱（IMAC）柱和tip头上洗脱下来的磷酸化肽样品来说，Pierce石墨离心柱对于提高上述样品的质谱分析效果是非常理想的。 Pierce石墨离心柱将在犹他州盐湖城召开的第58届ASMS质谱年会会议期间，在Salt ......阅读全文
磷酸化位点分析实验确定磷酸化氨基酸类型
了解肽或蛋白质中磷酸化氨基酸的类型，可以限定可能的磷酸化位点，并因此简化(对多肽链中磷酸化残基的确认。磷酸化残基类型通常由磷酸氨基酸分析或磷酸氨基酸特异性免疫检测确定。磷酸氨基酸分析是对肽键进行气相或液相水解，此水解条件下要至少保留一段磷酸酯键完整。 32p标记的磷酸蛋白质或磷酸肽的水解产物与磷酸氨
磷酸化位点分析实验用酶和化学方法去磷酸化
实验材料蛋白样品实验步骤这种方法得到特别关注、但它能提供磷酸肽中磷酸化氨基酸的定位，可以在非磷酸肽占主导地位的混合物中鉴别磷酸肽，此方法使用的是磷酸酶 。用简单的 MALDI-TOF仪器就可以得到磷酸化蛋白水解后产生肽段的质量，同样的样品用磷酸酶处理后，除去了丝氨酸，苏氨酸和酪氨酸上的磷酸，再分析其
磷酸化和非磷酸化蛋白分子量一样吗
理论上讲是不一样的，磷酸基图大概9.9KD左右，磷酸化后条带按道理应该发生迁移
用SepPak－C18柱层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
试剂、试剂盒 乙腈碳酸氢铵TE 溶液放射性标记寡核苷酸仪器、耗材 离心干燥机微量离心管放于管架或收集器Sep-Pak 经典层析柱注射器实验步骤 材料溶液和缓冲液稀释贮存液至适当浓度。乙腈（5%、30% 和 100%)毎个 Sep-Pak C18 柱用 10 ml 髙效液相（HPLC) 级乙腈（100
用SepPak－C18柱层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
试剂、试剂盒 乙腈 碳酸氢铵 TE 溶液 放射性标记寡核苷酸 仪器、耗材 离心干
识别特异性酪氨酸磷酸化多肽抗体的制备
实验步骤基 本 方 案 1 多克隆抗磷酸肽抗体的制备材料B S A -琼 脂 糖 亲 和 基 质（Sigma) 填 装（如辅助方案 2 ) 于柱床体积IOml的层析柱磷酸化酪氨酸亲和基质层析柱（IOml 柱床体积；见辅助方案3)磷酸肽-B S A 偶联物免疫家兔的粗制血清PB S /叠氮钠.•含有0
用交换反应进行5突出端DNA分子的磷酸化
T4 噬菌体多核苷酸激酶催化的交换反应（Van de Sande et al. 1973; Berkner and Folk 1977) 是一个标记 5' 端 DNA 的快速方法。与正向反应不同的是，它无需 DNA 去磷酸化。正向反应在略偏酸性（pH 6.4）的咪唑缓冲液中进行，以刺激酶促去
用交换反应进行5突出端DNA分子的磷酸化
实验方法原理 T4 噬菌体多核苷酸激酶催化的交换反应（Van de Sande et al. 1973; Berkner and Folk 1977) 是一个标记 5' 端 DNA 的快速方法。与正向反应不同的是，它无需 DNA 去磷酸化。正向反应在略偏酸性（pH 6.4）的咪唑
用交换反应进行5突出端DNA分子的磷酸化
实验方法原理 T4 噬菌体多核苷酸激酶催化的交换反应（Van de Sande et al. 1973; Berkner and Folk 1977) 是一个标记 5' 端 DNA 的快速方法。与正向反应不同的是，它无需 DNA
免疫PCR技术材料方法和注意事项（一）
（一）材料与方法1. 生物素标记特异性抗体的制备 基存免疫球蛋白（如IgG、IgM）的Fc片段上有糖在，因而可用能与糖基结合的Biotin-hydrazide作生物素标记。 （1） 将纯化的抗体（IgM或IgG， 0.1~1.0ml）在标记缓冲液（0.1Mol/L NaAc，pH值5.
用SepPak－C18柱层析法纯化放射性标记的寡核苷酸实验
本方案介绍的是利用寡核苷酸对于硅胶反相亲和的特性，将放射性标记的寡核苷酸与未掺入的放射性标记物分离的方法，本方案的方法只可用于纯化 5'端放射性标记或非标记的含磷酸基团的寡核苷酸，而方案 1 所介绍的方法多用于 5'末端为游离羟基的寡核苷酸。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）上册
去磷酸化的平端或5凹端DNA分子的磷酸化
实验方法原理 在 T4 多核苷酸激酶的正向反应中，带有平端、5' 凹端或分子内切口的 DNA 底物比 5' 突出端的分子标记效率低。实验材料 T4 噬菌体多核苷酸激酶试剂、试剂盒 乙酸铵EDTA乙醇咪唑缓冲液聚乙二醇仪器、耗材 液体闪烁计数仪Sephadex G-50 离心柱Seph
去磷酸化的平端或5凹端DNA分子的磷酸化
实验方法原理 在 T4 多核苷酸激酶的正向反应中，带有平端、5' 凹端或分子内切口的 DNA 底物比 5' 突出端的分子标记效率低。 实验材料
去磷酸化的平端或5凹端DNA分子的磷酸化
在 T4 多核苷酸激酶的正向反应中，带有平端、5' 凹端或分子内切口的 DNA 底物比 5' 突出端的分子标记效率低。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理在 T4 多核苷酸激酶的正向反应中，带有平端、5' 凹端或分子内切口的 DNA 底物比 5'
磷酸化多肽及其修饰方法
蛋白质磷酸化是生物界最普遍，也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰，20世纪50年代以来一直被生物学家看作是一种动态的生物调节过程。在细胞中，大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关，如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质
磷酸化多肽及其修饰方法
蛋白质磷酸化是生物界最普遍，也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰，20世纪50年代以来一直被生物学家看作是一种动态的生物调节过程。在细胞中，大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关，如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质及多
酶法检测磷酸化实验
基本方案1 非特异酸性磷酸酶消化磷酸蛋白质 基本方案2 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶消化磷酸蛋白质 实验方法原理实验材料 含 100～200 μg 总蛋白的样品 试
什么是光合磷酸化？
光合磷酸化是指由光照引起的电子传递与磷酸化作用相偶联而生成ATP的过程。
光合磷酸化的定义
光合磷酸化是指由光照引起的电子传递与磷酸化作用相偶联而生成ATP的过程。
磷酸化蛋白指的是什么
买能够区分磷酸化构型和未磷酸化构型的两种不同抗体没有听过磷酸化因子的概念。你说的两种都是蛋白质，都是细胞分子信号通路中的重要元素。JAK是一种磷酸激酶，可以将STAT磷酸化。没有听说过JAK自身被磷酸化。所以需要区分是否磷酸化的只有STAT。
酶法检测磷酸化实验
实验方法原理实验材料 含 100～200 μg 总蛋白的样品试剂、试剂盒 50 mmol L NN'-2-羟丙磺酸哌嗉(PIPES)Sephadex G-25 柱（可选）PIPES 2－ME 或 RPERS DTT 缓冲液马铃薯酸性磷酸酶2 × SDS－PAGE 样品缓冲液100 mmol
光合磷酸化的概念
光合磷酸化是指由光照引起的电子传递与磷酸化作用相偶联而生成ATP的过程。
自磷酸化的功能特点
当配体-受体结合时，受体胞外结构域构象变化导致相邻的单跨膜受体二聚化，以利于受体间的交互磷酸化,即自磷酸化。
磷酸化酶的性质
糖基转移酶类下的一个组群，即专司催化磷酸解作用的一类酶总称。广泛分布于动物(肝、肌)、植物、微生物中，包括糖原磷酸化酶(glycogenphosphorylase，EC2.4.1.1，分子量3.7×105)、麦芽糖磷酸化酶(EC2.4.1.8.)、1,3-β-D-低聚葡聚糖磷酸化酶(EC2.4.1.
磷酸化蛋白检测小妙招
蛋白质磷酸化是一种非常重要且广泛存在于原核生物和真核生物中的翻译后修饰调控方式,参与细胞的增殖、发育、分化、凋亡,细胞骨架调控、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢及肿瘤发生等,对许多生物的细胞功能起着生物“开/关”作用。蛋白质磷酸化指由蛋白质激酶催化的把ATP的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基（丝氨酸、苏
磷酸化的定义和方式
磷酸化（phosphorylation）是指在生物氧化中伴随着ATP生成的作用。有代谢物连接的磷酸化和呼吸链连接的磷酸化两种类型。即ATP生成方式有两种。一种是代谢物脱氢后，分子内部能量重新分布，使无机磷酸酯化先形成一个高能中间代谢物，促使ADP变成ATP。这称为底物水平磷酸化。如3-磷酸甘油醛氧化
光合磷酸化的定义
光合磷酸化（photosynthetic phosphorylation或photophosphorylation）是指在光合作用中由光驱动并贮存在跨类囊体膜的质子梯度的能量把和磷酸合成为的过程。光合磷酸化有两个类型：非循环光合磷酸化和循环光合磷酸化。
关于去磷酸化的简介
蛋白磷酸酯酶(PP)-2A和PP-2B可使AD神经原纤维缠结中的II型双螺旋丝（PHFII-tau）在Ser-199/Ser-202去磷酸化，Ser-396/Ser-404部分去磷酸化；此外，PP-2A和PP-2B可分别使PHFII-tau的Ser-46和Ser-235去磷酸化；去磷酸化后PHF
磷酸化多肽及其修饰方法
蛋白质磷酸化是生物界最普遍，也是最重要的一种蛋白质翻译后修饰，20世纪50年代以来一直被生物学家看作是一种动态的生物调节过程。在细胞中，大概有1/3的的蛋白质被认为是通过磷酸化修饰的。蛋白质的磷酸化修饰与多种生物学过程密切相关，如DNA损伤修复、转录调节、信号传导、细胞凋亡的调节等。磷酸化蛋白质
光合磷酸化的机理
光合磷酸化的机理同线粒体进行的氧化磷酸化相似,同样可用化学渗透学说来说明。在电子传递和ATP合成之间, 起偶联作用的是膜内外之间存在的质子电化学梯度。类囊体膜进行的光合电子传递与光合磷酸化需要四个跨膜复合物参加：光系统Ⅱ、细胞色素b6/f复合物、光系统Ⅰ和ATP合酶。有三个可动的分子(质子)：质体醌