“克隆”牛肉技术在英美引发争议
牛肉一直是人们餐桌上的美食。但现在，牛肉也可能重新走下餐桌，走回农场。最近美国科学家从屠宰的牛肉中提取出了细胞，准备用于克隆研究。而大西洋彼岸的英国人也不甘示弱，撇开了可能造成的巨大伦理争议，加入到牛肉“复活计划”的研究队伍中。缘起 去年底，荷兰的几名科学家从肉汤中提取了动物的肌肉细胞，为人造肉的诞生奠定了基础。在一种电流的刺激下，这些肌肉细胞开始复制，最后长成了肌肉组织，黏稠程度与生鸡蛋差不多。 但让科学家真正动了这一念头的事件，是三头克隆牛的后代最终加入了英国的食品产业链，开始流入食品市场。这三头牛均是在美国出生的“超级小牛”的后代，最近它们获得了正式的认证，官方称克隆牛的肉和奶都是安全的。 其实在这件事上，美国人早就走在了英国人的前面。他们早就开始克隆这些家畜，以满足国内农副产品日益增长的需求。他们还进行了一系列的质量检测，包括产量、动物寿命和肉产品质量等，这些程序都是在动物被屠宰之后进......阅读全文
单克隆抗体(monoclonal－antibody)克隆化技术
经过抗体测定的阳性孔，可以扩大培养，进行克隆，以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长，互相争夺营养和空间，而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早，太早细胞性状不稳定，数量少也易丢失。 克隆化的阳性杂交瘤细胞，经
克隆经验:帮助新手快速做出克隆2
（提示 关于酶量的问题。通常的内切酶效价在10U/μL左右，3μL内切酶相当于30U，足够切10μL的质粒。因为通常小提质粒的浓度在200－600ng /μL，一般浓度达不到1μg/μL。根据1U酶切1μg质粒的原则，这一酶量是足够的。）1%琼脂糖回收胶回收（碎胶、酚氯仿抽提法）1. 酶切产物加入1
克隆心得：帮助新手快速做出克隆1
本方法的核心部分是医科院基础所的生化脂蛋白组的吴刚老师所创，我在其基础上进行了一些改动，主要是DNA回收上采取了更简单的方法。（本方法最适用于双酶切制作片断并进行克隆的情况。对于分步酶切制作片断，也可以使用本方法，但需要加倍起始酶切DNA的量。）一、片断平移的克隆（也适用于多片断连接）简介：将用作载
克隆经验:帮助新手快速做出克隆1
本方法的核心部分是医科院基础所的生化脂蛋白组的吴刚老师所创，我在其基础上进行了一些改动，主要是DNA回收上采取了更简单的方法。（本方法最适用于双酶切制作片断并进行克隆 的情况。对于分步酶切制作片断，也可以使用本方法，但需要加倍起始酶切DNA的量。）一、片断平移的克隆 （也适用于多片断连接）简介：将用
克隆经验—帮助新手快速做出克隆5
1. 连接产物10μL、5×KCM溶液10μL、双蒸水30μL，（共50μL）混匀，置冰上。2. 从-70℃冰箱中取 1支感受态细胞，置冰上。融化后立即取50μL，加入步骤1中的混合液中，轻轻吹打数次混匀（不可用力过大，不可涡旋）， 立即置冰上。3. 冰上放置20 分钟。4. 室温放置10分钟。5.
克隆经验—帮助新手快速做出克隆4
9. 在一新1.5mL 离心管中加入 900μL 预冷 无水乙醇、20μL 3M的醋酸钠。将步骤8的上清小心加入本步骤离心管中。颠倒数次混匀。12000rpm 4℃ 离心15分钟。（提示 吸取步骤8中的上清时，千万不要将有机相吸入，宁可放弃一些上清，否则影响后面的连接反应。 另外，本方法
PCR扩增产物的克隆——TA克隆法
实验方法原理TA克隆 系统由Invitrogen公司（San Diego，CA）发展而来的商业性试剂盒，它用于PCR 产物的克隆 和测序。其原理是利用Taq酶能够在PCR 产物的3'末端加上一个非模板依赖的A，而T载体是一种带有3'T突出端的载体，在连接酶作用下，可以快速地、一步到位
简述单克隆抗体的动物免疫
单克隆抗体制备的宿主动物一般选用BALB/c小鼠，鼠单抗的应用范围相当广泛，一些国内外公司均开发出了兔的单克隆抗体制备技术。 免疫原分为可溶性抗原和颗粒性（细胞）抗原，用无菌盐水稀释并与佐剂混合，腹腔注射抗原与佐剂彻底混匀后形成的稳定乳状液，在免疫原提供持续的免疫应答基础上进行加强免疫 周期
关于多克隆抗体免疫动物的介绍
供免疫用的动物主要是哺乳动物和禽类，常选择家兔、绵羊、山羊、马、骡和豚鼠及小鼠等。动物的选择常根据抗体的用途和量来决定，也与抗原的性质有关。如要获得大量的抗体，多采用大动物；如要是获得直接标记诊断的抗体，则直接采用本动物；如要获得间接的标记诊断用抗体，则必须用异源动物制备抗体；如果难以获得的抗原
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP -巯基乙醇 IPTG X-gal 平末端限制酶 连接缓冲液 T4DNA 连接酶
核糖克隆实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液DNA 缓冲液（TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素（Sigma)四环素Ticarcil
多克隆抗体
Making Antibody· Production of Polyclonal Antibody in Rabbit (Walter Steffen)Provides detailed protocol for immunizatioin, bleeding procedure,
miRNA克隆实验
在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外，还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA（noncoding RNA，ncRNA），非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用，如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达，还有一部分则起着调控基因表达的作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主
制备克隆实验
试剂、试剂盒 ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材 FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱 水浴箱实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇（可选择）IPTG(100 mm
核糖克隆实验
这个方案只是用 RNA 酶处理 PCR 产物的一种方法。有很多可选择和有效的途径来纯化 PCR 产物以除去引物，接着用酶处理 PCR 产物，然后再除去酶。值得注意的是用 PCR仪设置温浴程序是很方便的。可以在加热步骤完成后选择加上“冷却”步骤，即在冷模块中放置 5 min 甚至过夜。本实验来源于 P
miRNA－－克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外，还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA（noncoding RNA，ncRNA），非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用，如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达，还有一部分则起着调控基因表达的作用。实验材料 寡核
miRNA克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外，还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA（noncoding RNA，ncRNA），非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用，如 rRNA 和 tRNA 维持着基因
什么是克隆？
“克隆”这个词听上去并不陌生，在我们的日常生活中也会经常用到它。比如，每当春暖花开时，有人喜欢进行植物扦插的试验。从一棵植株上剪下的植条，通过扦插而形成许多遗传物质的组成完全相同的植株就是克隆；又比如有一种样子像苹果，但滋味像梨的水果——梨苹果就是采用树嫁接培育而成的。嫁接形成的产物也是克隆；还有将
定位候选克隆
当前，人类基因组研究的重心正在由“结构”向“功能”转移，一个以基因组功能研究为主要内容的所谓“后基因组时代”(post-genomics)，也即功能基因组(functional genomics)时代，即将到来。如何获取基因的功能信息，即与人类重大疾病和重要生理功能相关的基因信息，就摆在了我们面前。
靶向克隆法
靶向克隆法是一种新的基因克隆方法，该克隆方法的特点是：在基因克隆过程中不使用已有的DNA Ligase，而是使用新开发的靶向克隆酶。靶向克隆酶能够使末端序列相同的双链DNA(14bp-18bp)同源重组，从而达到克隆基因的目的。LP Recco酶，中文名：靶向克隆酶，无需传统基因克隆所需要的限制性内
制备克隆实验
试剂、试剂盒ATP-巯基乙醇IPTGX-gal平末端限制酶连接缓冲液T4DNA 连接酶平末端插入物克隆载体培养基仪器、耗材FALCON 2059 多聚丙烯试管37°C 恒温箱水浴箱实验步骤一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ATP(10 mmol/L)β-巯基乙醇（可选择）IPTG(100 mmol/L
PCR产物克隆
克隆方法：1. 平端连接 通常情况下，PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接，但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性，能在两6条DNA链的3''''末端加上一个多余的碱基，使合成的PCR产物成为3'''&#
核糖克隆实验
试剂、试剂盒 ATEN 缓冲液DNA 缓冲液（TEN)KLA 缓冲液T5E5Dpn IKlentaq LA 蛋白酶 K蛋白酶K储存缓冲液 RNA 酶 A设计好的载体已经进行 5'端生物素-TEG 修饰并且 3'端核糖胞嘧啶或者核糖尿嘧啶修饰过的引物卡那霉素（Sigma)四
克隆的种类
1.由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系（每个基因彼此相同）。2.先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的受体卵细胞中，利用微电流刺激等使两者融合为一体。（与提供细胞者基因相同）
PCR产物克隆
克隆方法：1. 平端连接 通常情况下，PCR产物可直接与平端载体DNA进行连接，但其连接效率效低。因为TaqDNA聚合酶具有非模板依赖性末端转移酶活性，能在两6条DNA链的3''末端加上一个多余的碱基，使合成的PCR产物成为3''突出一个碱基的DNA分子。这种DN
核糖克隆实验
—、材料1. 缓冲液、溶液和试剂.10XATEN 缓冲液0.5mol/LTris-HCl,pH7.92.5mol/L 氯化钠0.25mol/L Na4EDTA,pH7.9甜菜碱（SigmaB-2629)蓝色葡聚糖（bluedextran)(SigmaD
细胞克隆染色
做克隆形成率的染色非常非常简单,因为克隆产生的细胞集落非常清晰,大的甚至肉眼可辩.对染色方法只有一个基本要求,染细胞不染培养容器就可以了.非常多的染料可以用作此用途.像是一楼所说的结晶紫也可以.
PCR产物克隆
PCR克隆主要有TA克隆法, 限制性酶切与连接法，杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。但因为TA克隆法操作最简单，快速和高效的原因，成为Taq聚合酶PCR产物的最佳克隆方法。TA克隆法由Invitrogen发明，并拥有全球TA Cloning商标的ZL权。TA克隆方法（Original TA Cl
分子克隆介绍
各位小伙伴，大家还记得当初进实验室的时候接触到的一个实验技能是什么呢？没错，是 PCR 扩增。小编曾经也是，看着自己亲自配比 PCR 克隆扩增的每个组分，亲眼看着琼脂糖凝胶在紫外透光台上发出的幽绿色的荧光，也是深深被迷住。但总不可能成天就对着这个邪魅的荧光发呆，对吧？看久了，她会爱上你的眼
英国食品标准署称克隆动物食品安全但上市需批准
针对近来媒体报道有克隆牛奶非法流入英国市场一事，英国食品标准署8月2日发布公告说，克隆牛奶等来自健康克隆动物的食品目前看来是安全的，但这些新食品在上市前必须得到批准。 食品标准署说：“根据现有最好的证据，对于消费来自健康克隆动物及其后代的产品，还不存在食品安全上的顾虑。” 英国食品标准署援引