三种鉴定葡萄球菌凝固酶方法的评价(2)

　　2  结果

　　2.1  葡萄球菌鉴定结果  经系统生化鉴定和ARIS2X细菌鉴定仪鉴定68株金黄色葡萄球菌，25株表皮葡萄球菌，6株施莱福葡萄球菌，6株孔氏葡萄球菌，3株溶血葡萄球菌，2株华氏葡萄球菌。

　　2.2  凝固酶鉴定结果  以凝固酶基因法为“金标准”，比较3种凝固酶试验的敏感性和特异性，见表1。

　　2.3  几种凝固酶试验不一致的结果  几种凝固酶试验不一致的结果经重复试验后，最终不一致的结果见表2。

　　表1  三种鉴定葡萄球菌凝固酶方法的结果比较（略）

　　表2  四种葡萄球菌凝固酶方法不一致的结果（略）

　　3  讨论

　　本研究以凝固酶基因法为检测游离和结合凝固酶的“金标准”，评价试管法、玻片法和商品乳胶血凝试验方法的敏感性和特异性。凝固酶因子试验和血浆凝固酶试验是两个不相关试验,两者不能相互替代,也不可相互印证。金黄色葡萄球菌既可产生凝固酶,亦可产生凝集因子。结合型凝固酶又称凝集因子，主要存在于金黄色葡萄球菌里昂葡萄球菌和施莱福葡萄球菌中［6，7］。本次调查中临床分离的施莱福葡萄球菌占葡萄球菌的5.4％，与国内报道近似［3］。检查凝集因子，传统的方法采用兔或人血浆与待测葡萄球菌做玻片凝集试验，该法的缺点是假阳性和假阴性较高，本次调查中有6个表皮葡萄球菌玻片法凝集因子试验阳性，这可能是由于人血浆中产生的自身抗体或血浆中的抗凝剂所致。乳胶血凝法是用提纯IgG的FC段与金黄色葡萄球菌蛋白A（SPA）结合，反应机制是双链式，所以避免了某些金黄色葡萄球菌游离凝固酶或SPA产生不足所致的假阴性；它用于检测凝集因子和蛋白质A的乳胶血凝混合试剂，大大提高了检测凝集因子的特异性。本次试验它是将纯化的纤维蛋白原致敏红细胞表面，特异性单克隆抗体（抗A蛋白）包被乳胶，可排除血浆中某些干扰物质，因而乳胶血凝法准确性佳、操作简单、敏感性强。游离型凝固酶主要存在于金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和猪葡萄球菌中［6，7］。本次调查中未检出中间型葡萄球菌，游离凝固酶阳性的都是金黄色葡萄球菌，因此试管法凝固酶试验鉴定金黄色葡萄球菌敏感性和特异性都是非常好的。但有1株金黄色葡萄球菌游离凝固酶试验阴性，可能是该菌株产生溶纤维蛋白酶，溶解纤维蛋白凝块，或该菌产生的游离型凝固酶不足所致。

　　参考文献：

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