中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）染色及临床意义

人体有多种细胞内含有一种叫做碱性磷酸酶的物质。血细胞内也含有这种物质，但多数不表现出活性，即处于“沉睡”状态，只有中性粒细胞的成熟阶段表现出碱性磷酸酶活性，我们称之为中性粒细胞碱性磷酸酶(简称N—ALP)。

中性粒细胞碱性磷酸酶存在于成熟中性粒细胞的胞浆内，可以通过钙—钴方法使之着色来显示。然后计算出反应的阳性率和积分，即可表示中性粒细胞碱性磷酸酶活性的高低。计算方法：显微镜下观察100个成熟中性粒细胞，有阳性反应的细胞数即阳性率；再按下列标准评分，将每个细胞的积分相加，即得出积分：

　　0分——阴性反应。

　　1分——胞浆1／2以下的区域出现灰黑色到棕黑色沉淀。

　　2分——胞浆1／2～3／4的区域出现灰黑色至棕黑色沉淀。

　　3分——胞浆全部区域出现棕黑色或棕黑色沉淀(颗粒状或片块状)，但密度较低，约占3／4的区域。

　　4分——胞浆全部皆被深黑色团块状沉淀所充满，密度甚高，甚至遮盖胞核。

　　正常人的中性粒细胞碱性磷酸酶活性为：阳性率平均为20～40％，积分平均为20～60分。当患有慢性粒细胞白血病时，其活性显着减低，积分常为“0”，缓解后也无明显增高；但慢粒急变后，N—ALP可增高。因此，中性粒细胞碱性磷酸酶活性的检查，对诊断慢性粒细胞白血病是极为有用的。

　　但其它一些情况下，也可能出现中性粒细胞碱性磷酸酶活性减低，如急性粒细胞白血病时就可减低，但缓解后增高；病毒感染时可减低，但不如慢粒明显；恶性组织细胞增生症和淋巴瘤||时也会减低，但均不如慢粒那么显着。

　　至于中性粒细胞碱性磷酸酶活性增高的情况则比较多见，如常见的细菌感染、类白血病反应、甲亢、贫血、特发性血小板减少性紫癜、多发性骨髓瘤、真性红细胞增多症、急性淋巴细胞白血病、阵发性睡眠性血红蛋白尿等。

中性粒细胞碱性磷酸酶的显示方法有偶氮偶联法和钙-钴法两种。前者的染色原理是血细胞内碱性磷酸酶在pH为9.4～9.6的条件下，将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解，产生α-萘酚与重氮盐偶联形成灰黑色沉淀，定位于细胞质内酶活性所在之处。钙-钴法染色是碱性磷酸酶在碱性条件下将基质液中的β-甘油磷酸钠水解，产生磷酸钠。磷酸钠依次与硝酸钙、硝酸钴、硫化铵发生反应，形成不溶性棕黑色的硫化钴，定位于酶活性之处。

　　碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞（分叶核及杆状核），其他血细胞均呈阴性反应。阳性反应为胞质中出现灰色到棕黑色颗粒，反应强度分为5级，即"-"、"1+"、"2+"、"3+"、"4+"。反应结果以阳性反应细胞百分率和积分值来表示。血涂片染色后，在油浸镜下，观察100个成熟中性粒细胞，阳性反应细胞所占百分率即为阳性率；对所有阳性反应细胞逐个按反应强度分级，将各级所占的百分率乘以级数，然后相加，即为积分值。 成人NAP阳性率10％～40％；积分值40～80分。

　　由于各实验室条件不同，参考值也有差异。 NAP活性可因年龄、性别、应激状态、月经周期、妊娠及分娩等因素有一定的生理性变化。在病理情况下，NAP活性的变化常有助于某些疾病的诊断和鉴别诊断。

1. 感染性疾病：急性化脓菌感染时NAP活性明显增高，病毒性感染时其活性在正常范围或略低。

2. 慢性粒细胞白血病的NAP活性明显减低，积分值常为0。类白血病反应的NAP活性极度增高，故可作为慢性粒细胞白血病||鉴别的一个重要指标。

3. 急性粒细胞白血病时NAP积分值差错；急性淋巴细胞白血病的NAP积分值多增高；急性单核细胞白血病时一般正常或减低。

4. 再障时NAP活性增高；阵发性睡眠性血红蛋白尿时活性减低，因此也可作两者鉴别的参考。

5. 其他血液病：恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、骨髓增殖性疾病如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨骨纤维化症NAP活性中度增高，恶性组织细胞病时NAP活性降低。

6. 腺垂体或肾上腺皮质功能亢进时，应用肾上腺皮质激素、ACTH、雌激素等NAP积分值可增高。

碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞，其他细胞均呈阴性反应。阳性反应为在胞质中出现灰色到棕黑色颗粒，反应强度分为5级，即-、+、2+、3+、4+。反应结果以阳性反应细胞的百分率和积分值来表示。血涂片经染色反应后，在油镜下，连续观察100个成熟中性粒细胞，记录其阳性反应细胞所占的百分率即为阳性率；并对所有阳性反应细胞逐个按其反应强度||作出+~4+的分级，将各级所占的百分率乘以级数，然后想加，即为积分值。参考值：阳性率10-40%，积分值40-80。

意义：

（1）急性化脓性感染时NAP活性明显升高，病毒性感染时其活性在正常范围或略低。因此，NAP可用于细菌和病毒感染的鉴别；

（2）慢性粒细胞白血病的NAP活性明显降低，积分值常为0。类白血病反应的NAP活性极度增高，故可作为与慢性粒细胞白血病鉴别的重要指标。

（3）急性粒细胞白血病时NAP积分值减低；急性淋巴细胞白血病的NAP多增高；急性单核细胞白血病时一般正常或减低。故可作为急性白血病的鉴别方法之一。

（4）再生障碍性贫血时NAP活性增高；阵发性睡眠性血红蛋白尿时活性减低，可作为两者的鉴别。

（5）其他情况：如应用肾上腺皮质激素时NAP升高；恶性组织细胞病时NAP活性降低。