全自动定氮仪检测酒糟蛋白质含量的操作步骤

　　酿酒后的酒糟含有大量蛋白质、纤维素等，可作为开发蛋白质的原料。目前常用于检测蛋白质的方法主要有4种：全自动定氮仪法、双缩脲法、Folin-酚试剂法和紫外吸收法。下面就先简单的说说全自动定氮仪方法的操作步骤：
　　
　　首先是样品的提取:

     精确称取1g左右酒糟粉末样品2份于高腰烧杯中，力2gKZSO4-CuS04"SH20混合物及SOmL消化液。用电炉小火加热，溶液呈棕黄色，且有泡沫产生。继续加热，产生大量泡沫，溶液呈浅黄绿色并有大量SOZ白烟产生，待酒糟焦化完全，取下烧杯，稍冷，加入2-3滴30%的H202溶液，继续消化至白烟消失，溶液变为澄清的绿色，即消解完成。将消解液稍冷(以防结晶)后转移至离心管，用二次蒸馏水洗涤烧杯2-3次，洗液一并注入离心管中，于2500r/min下离心15min，将离心液转移至SOmL容量瓶，定容，备用。按同样方法消化试剂空白液。
　　
　　其次是氨气发生与吸收：

　　1)取250mL锥形瓶数个，分别加入SmL2%硼酸和2滴混合指示剂备用。

　　2)关闭冷凝水，打开自由夹，使蒸汽发生器与大气相通。将一个盛有硼酸和指示剂的锥形瓶放在冷凝器下，使冷凝器下端浸没在液体内。

　　3)用吸量管取S.OOmL酒糟样品消化液，细心地由加样室下端加入反应室，随后加入7.OmL30%的NaOH，用少量蒸馏水洗涤加样室，关闭自由夹，在加样漏斗中加入少量水做水封。关闭自由夹(图中2)，缓慢打开冷凝水。用酒精灯加热蒸汽发生器，当观察到锥形瓶中溶液由酒红色变为绿色时，蒸馏约lOmin后，移开锥形瓶，使冷凝器下端离开液而约1cm，同时用少量蒸馏水洗涤冷凝管口外侧，继续蒸馏2min-3min，取下锥形瓶。

　　C4)蒸馏完毕后，移开酒精灯，使反应室中废液溢出。全自动定氮仪待冷却至室温后，将仪器取下，打开自由夹，将蒸汽发生器内的全部废水放出，用蒸馏水清洗反应室2-3次。组装装置，接通冷凝水，按如前所述方法洗涤蒸馏器2-3次，准备下一次蒸馏。