农药残留量测定法

本法系用气相色谱法(附录Ⅵ E)测定药材和饮片及制剂中部分有机氯、有机磷和拟除虫菊酯类农药，除另有规定外，按下列方法测定。

一、有机氯类农药残留量测定

色谱条件与系统适用性试验弹性石英毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm) SE-54，63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度230℃;检测器温度300℃。不分流进样。程序升温：初始100℃，每分钟10℃升至 220℃，每分钟8℃升至250℃，保持10分钟。理论板数按α-BHC峰计算应不低于1×106，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。

对照品储备液制备精密称取六六六(BHC)[α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC),滴滴涕(DDT)[ PP’-DDE，PP’-DDD，OP’-DDT，PP’-DDT]及五氯硝基苯(PCNB)农药对照品适量，用石油醚(60～90℃)分别制成每1ml 约含4～5μg的溶液，即得。

混合对照品储备液的制备精密量取上述各对照品储备液0.5ml置10ml量瓶中,用石油醚(60～90℃)稀释至刻度，即得。

混合对照品溶液的制备精密量取上述混合对照品储备液，用石油醚(60～90℃)制成每1L含0μg、1μg、5μg、10μg、50μg、100μg、250μg的溶液，即得。

供试品溶液制备药材和饮片取供试品于60℃干燥4小时，粉碎成细粉，取约2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加水20ml浸泡过夜，精密加丙酮 40ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用丙酮补足减失的重量，再加氯化钠约6g及二氯甲烷30ml，称定重量，超声处理15分钟,再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，静置(使分层)，将有机相迅速移入装有适量无水硫酸钠的100ml具塞锥形瓶中，放置4小时。精密量取35ml，于 40℃水浴上减压浓缩至近干，加少量石油醚(60～90℃)如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用石油醚(60～90℃)溶解并转移至10ml具塞刻度离心管中,加石油醚(60～90℃)至5ml。小心加入硫酸1ml，振摇1分钟，离心(3000转/分)10分钟。精密量取上清液2ml置具刻度的浓缩瓶中，连接旋转蒸发器，40℃下(或用氮气)将溶液浓缩至适量、精密稀释至1ml，即得。

制剂取供试品，研成细粉(蜜丸切碎，液体制剂直接量取)，精密称取适量(相当于药材和饮片2g)，以下按上述供试品溶液制备，即得供试品溶液。

测定法分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中9种农药残留量。

二、有机磷类农药残留量测定

色谱条件与系统适用性试验弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)DB-17MS(或HP-5)，氮磷检测器(NPD)。进样口温度 230℃;检测器温度300℃，不分流进样。程序升温：初始120℃，每分钟10℃升至220℃，每分钟5℃升至240℃，保持2分钟，每分钟20℃升至 270℃，保持0.5分钟。理论板数按敌敌畏峰计算不低于6000，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。

对照品储备液制备精密称取对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪农、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷农药对照品适量，用乙酸乙酯分别制成每1ml约含100ug的溶液，即得。

混合对照品储备液的制备精密量取上述各对照品储备液1ml，置20ml棕色量瓶中,加乙酸乙酯稀释至刻度，即得。

混合对照品溶液的制备精密量取上述混合对照品储备液，用乙酸乙酯制成每1mL含0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、5μg的溶液，即得。

供试品溶液制备药材和饮片取供试品粉末(过二号筛)约5g，精密称定，加无水硫酸钠5g，加入乙酸乙酯50~100ml，冰浴超声处理3分钟，放置，取上层液滤过，药渣加乙酸乙酯30~50ml，冰浴超声处理2分钟，放置，滤过，合并两次滤液，用少量乙酸乙酯洗涤滤纸及残渣，与上述滤液合并。取滤液于40℃ 以下减压浓缩至近干，用乙酸乙酯转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，精密量取1ml，置活性炭小柱[120~400目，0.25g,内径0.9cm(如 Supelclean ENVI-carb SPE Tubes,3ml活性炭小柱)，乙酸乙酯5ml预洗]，置多功能真空样品处理器上，用正己烷-乙酸乙酯(1：1)混合液5ml洗脱，收集洗脱液，置氮吹仪上浓缩至近干，精密加入乙酸乙酯1ml使溶解，即得。

测定法分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1μl，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中12种农药残留量。

三、拟除虫菊酯类农药残留量测定

色铺条件与系统适用性试验弹性石英毛细管柱(30m*0.32mm*0.25um)SE-54(或DB-5)，63Ni-ECD电子捕获检测器。进样口温度 270℃，检测器温度330℃。分流比20：1;5：1(或根据仪器设置选择最佳的分流比)。程序升温：初始160℃，保持1分钟，每分钟10℃升至 278℃，保持0.5分钟，每分钟1℃升至290℃，保持5分钟。理论板数按溴氰菊酯峰计算应不低于1*10〈5〉，两个相邻色谱峰的分离度应大于 1.5。

对照品贮备液的制备精密称取氯氰菊酯、氰戊菊酯及溴氰菊酯农药对照品适量，用石油醚(60~90℃)分别制成每1ml约含20~25ug的溶液，即得。

混合对照品储备液的制备精密量取上述各对照品储备液1ml，置10ml量瓶中，用石油醚(60~90℃)稀释至刻度，摇匀，即得。

混合对照品溶液的制备精密量取上述混合对照品贮备液，用石油醚(60~90℃)稀释制成每1L分别含0ug、4ug、8ug、40ug、200ug的溶液，即得。

供试品溶液的制备药材和饮片取供试品于60℃干燥4小时，粉碎成细粉(过五号筛)，取约1~2g,精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加石油醚(60~90℃)-丙酮(4：1)混合溶液30ml，超声处理15分钟，滤过，药渣再重复上述操作2次后，合并滤液。滤液加入适量无水硫酸钠脱水后，于 40~45℃减压浓缩至近干，用少量石油醚(60~90℃)反复操作至丙酮除净，残渣加适量石油醚(60~90℃)溶解，置混合小柱[从下至上依次为无水硫酸钠2g、弗罗里硅土4g、微晶纤维素1g、氧化铝1g、无水硫酸钠2g、用石油醚(60~90℃)-乙醚(4：1)混合溶液20ml预洗]上，用石油醚(60~90℃)-乙醚(4：1)混合溶液90ml洗脱，收集洗脱液，于40~45 ℃减压浓缩至近干，再用石油醚(60~90℃)3~4ml重复操作至乙醚除净，用石油醚(60~90℃)溶解转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，即得。

测定法分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1ul，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中3种拟除虫菊酯农药残留量。