博纳艾杰尔黄曲霉毒素M1&B1检测方案

　　天津博纳艾杰尔科技有限公司，基于自身技术优势，及对乳品、饲料行业检测多年来的认知，整合出一套黄曲霉毒素检测的综合解决方案，可以提供黄曲霉检测几乎全部所需关键产品。

　　目前，关于乳品中黄曲霉毒素、食品中黄曲霉毒素的检测，有很多标准，GB、SN,归纳起来，多数采用免疫亲和柱净化-HPLC法检测，以及酶联免疫吸附法（ELISA试剂盒法）。

　　博纳艾杰尔可以提供整体检测所需关键产品：

　　类别 作用 名称 规格

　　关键耗材 净化 黄曲霉毒素总量免疫亲和柱 25支/盒,1mL

　　关键耗材 净化 黄曲霉毒素B1免疫亲和柱 25支/盒,1mL

　　关键耗材 净化 黄曲霉毒素M1免疫亲和柱 25支/盒，1mL&3mL

　　关键耗材 净化 Cleanert PEP 固相萃取柱 60mg/3mL

　　关键耗材 测定 Venusil MP C18 液相色谱柱 4.6*250mm,5um

　　关键耗材 测定 黄曲霉毒素ElISA 试剂盒 96孔/48孔

　　关键耗材 测定 黄曲霉毒素总量胶体金快速检测卡 50条/盒

　　关键耗材 测定 黄曲霉毒素总量胶体金快速检测卡 50条/盒

　　关键耗材 测定 Venusil MP C18 液相色谱柱 4.6*250mm,5um

　　试剂标品 测定 黄曲霉毒素混标液体（B1、B2、G1、G2） B1 1ug/ml；B2 3ug/ml；

　　G1 1ug/ml； G2 3ug/ml

　　试剂标品 测定 黄曲霉毒素B1标准品 1mg

　　试剂标品 测定 乙腈，HPLC级溶剂 瓶/4L

　　特殊器材 测定 黄曲霉素光化学柱后衍生反应池 台

　　仪器 测定 岛津10AVP PIUS HPLC 单泵、单检测器、工作站 带荧光检测器

　　仪器 测定 微孔板酶标仪 450nm/630nm

　　仪器 测定 柱温箱 台

　　咨询电话：400-606-8099

　　邮箱：service@agela.com.cn 

　　常用检测方法对比：

　　1 免疫亲和柱-荧光分光光度法和免疫亲和术-HPLC法

　　黄曲霉毒素免疫亲和柱-高效液相色谱法比传统的HPLC法更加安全,可靠,灵敏度和准确度高.它采用单克隆抗体免疫技术,可以特效性地将黄曲霉毒素或其他真菌毒素分离出来,分离效率和回收率高，是一种准确定性定量的首选方法。

　　分析原理试样中的黄曲霉毒素用一定比例的甲醇/水提取液经过过滤,稀释后,用免疫亲和柱净化,以甲醇将亲和柱上的黄曲霉毒素淋洗下来,在淋洗液中加入溴溶液衍生,以提高测定灵敏度,然后将甲醇-黄曲霉毒素淋洗液的一部分注入HPLC中,对黄曲霉毒素B1,B2,G1,B2分别进行定量分析.免疫亲和柱是用大剂量的黄曲霉毒素单克隆抗体固化在水不溶性的载体上,然后装柱而成.该方法的测定范围0-300ug/kg.

　　参考案例：中草药酸枣仁中黄曲霉毒素的检测

　　2 酶联免疫吸附法（ELISA法）

　　原理:将已知抗原吸附在固态载体表面,洗除末吸附抗原,加入一定量抗体与待测样品(含有抗原)提取液的混合液,竞争培养后,在固相载体表面形成抗原抗体复合物.洗除多余抗体成分,然后加入酶标记的抗球蛋白的第二抗体结合物,与吸附在固体表面的抗原抗体结合物相结合,再加入酶底物.在酶的催化作用下,底物发生降解反应,产生有色物质,通过酶标检测仪测出酶底物的降解量,从而推知被测样品中的抗原量.

　　ELISA方法通常用于大规模的筛选，由于其高同量的特点，是一种性价比很高的测试方法。 

　　3一步式黄曲霉毒素检测胶体金试纸法

　　一步式黄曲霉毒素检测胶体金试纸法是利用单克隆抗体而设计的固相免疫分析法.由此产生的一步式黄曲霉毒素快速检测试纸可在5—10分钟完成对样品中黄曲霉毒素的定性测定.借助黄曲霉毒素标准样品,这种方法能估算黄曲霉毒素的含量,非常适用于现场测试和进行大量样品的初选. 

　　【背景知识】

　　黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物,是一种毒性极强的剧毒物质.黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时,可导致肝癌甚至死亡.在天然污染的食品中以黄曲霉毒素B1最为多见,其毒性和致癌性也最强.

　　黄曲霉毒素（AFT）是一类化学结构类似的化合物，均为二氢呋喃香豆素的衍生物。黄曲霉毒素是主要由黄曲霉 (aspergillus flavus) 寄生曲霉 (a.parasiticus) 产生的次生代谢产物，在湿热地区食品和饲料中出现黄曲霉毒素的机率最高。B1是最危险的致癌物，经常在玉米，花生，棉花种子，一些干果中常能检测到。它们在紫外线照射下能产生荧光，根据荧光颜色不同，将其分为B族和G族两大类及其衍生物。AFT目前已发现20余种。AFT主要污染粮油食品、动植物食品等；如花生、玉米，大米、小麦、豆类、坚果类、肉类、乳及乳制品、水产品等均有黄曲霉毒素污染。其中以花生和玉米污染最严重。家庭自制发酵食品也能检出黄曲霉毒素，尤其是高温高湿地区的粮油及制品种捡出率更高。