又一胃癌患者受益！CAR‑T疗法有望作为实体瘤的潜在治疗

　最近，江西首例实体瘤CAR-T细胞治疗在南昌大学第二附属医院肿瘤中心顺利完成。在本次治疗中，该患者首次诊断为晚期胃癌，肿瘤已广泛转移至腹腔及多处骨骼，患者按照指南规范进行标准的化疗联合免疫检查点抑制剂治疗后，肿瘤控制不佳，且因腹胀、饮食差及血细胞反复重度减低等并发症导致其难以继续接受化疗。经过CAR-T治疗，目前，患者已安全度过CRS高峰期，腹胀、饮食差等症状明显改善，细胞治疗前明显升高的肿瘤标志物已下降至正常范围，精神、体力状况等也获得了显著改善。

　　这则案例的成功，让人们对CAR-T细胞治疗实体瘤有了更多的期待。

　　今天我们通过最新发表在《Current Oncology Reports》上的综述一起来了解CAR-T治疗实体瘤的最新进展。

　　根据研究报道，目前CAR-T治疗实体瘤的临床研究已经涉及到多种肿瘤，包括胃癌、肝癌、小儿脑肿瘤、神经母细胞瘤和肉瘤等。

　　这篇最新的综述总结了CAR-T疗法在实体瘤治疗中面临的挑战，以及小儿脑肿瘤、神经母细胞瘤和肉瘤的潜在肿瘤靶点。

　　CAR-T免疫细胞治疗实体瘤的挑战及解决方案

　　CAR-T 细胞疗法在治疗恶性血液病患者方面取得了相当大的成功。美国食品和药物管理局 (FDA) 已批准六种 CAR-T 细胞疗法用于治疗血液癌症。然而，它在治疗实体瘤上仍然有很大的挑战。

　　用 CAR-T 细胞疗法治疗实体瘤的主要挑战是异质性抗原的表达、肿瘤渗透不足、不利的肿瘤微环境 (TME) 和肿瘤外毒性。

　　实体瘤具有肿瘤相关抗原 (TAA)，其在肿瘤中高水平表达，而在正常组织中低水平表达。此外，转移性和原发性肿瘤在 TAA 和患有相同癌症的不同患者中表现出异质性。

　　为了解决这个问题，科学家们正在开发多特异性 CAR-T 疗法，如串联 CAR (TanCAR)，将两种不同的 CAR 引入同一个 T 细胞。串联 CAR 包含两个 scFv 结合域，当这些域中的任何一个与靶抗原结合时被激活。因此，它可以同时识别两种不同类型的表面抗原。据报道，串联 CAR在杀伤神经胶质瘤方面比单靶点CAR-T细胞更有效。

　　第二：异常的脉管系统和肿瘤间质阻碍了 CAR-T 细胞的充分渗透。科学家们已经尝试使用称为趋化因子的信号蛋白来增强 CAR-T 细胞的穿透能力。用称为 CXC 趋化因子受体 2的趋化因子受体修饰的 CAR-T 比未修饰的 CAR-T 细胞显示出更强的抗肿瘤功效和运输能力。

　　另一种增强 CAR-T 细胞浸润能力的方法涉及靶向成纤维细胞活化蛋白 (FAP)。FAP 通过促进免疫抑制和重塑由称为细胞外基质的细胞外大分子组成的网络来防止 CAR-T 细胞穿透肿瘤。在一些临床前研究中，FAP-CAR-T 细胞已显示出强大的抗肿瘤反应并增加了实体瘤中的归巢。

　　由于缺氧条件和肿瘤间质，CAR-T 细胞无法在 TME 中存活，肿瘤间质由抑制性细胞类型组成。研究人员发现，抑制一种称为程序性细胞死亡蛋白-1 (PD-1) 的免疫检查点可以增强 CAR-T 疗法的疗效。

　　另一种解决敌对 TME 的方法涉及靶向转化生长因子 β (TGBβ)，这是一种抑制巨噬细胞的细胞因子。

　　科学家们通过使用CRISPR/Cas9 的基因组编辑工具使 TGF-β 受体 II (TGF βR2) 基因失活，成功地阻止了临床前模型中的 CAR-T 耗竭。此外，表观遗传修饰也已被用于防止 CAR-T 耗竭。DNA 甲基化是一种常见的表观遗传修饰类型，负责 T 细胞的分化。一项研究表明，带有灭活 DNA 甲基转移酶 3a 基因的 CAR-T 细胞可以维持增殖能力并有助于预防肿瘤复发。

　　此外，科学家们还为 CAR-T 细胞添加了氧依赖性降解结构域 (ODD)，使其能够在低氧条件下存活。

　　那么如何减轻 CAR-T 疗法的细胞因子释放综合征 (CRS) 毒性呢？科学研究发现的策略包括开关策略以及达沙替尼和来那度胺的给药策略。科学家们还发现了一种通过在 CAR 结构中整合可诱导半胱天冬酶 9自杀基因来减轻这种疗法毒性的新方法。

　　CAR-T细胞治疗实体瘤的临床应用研究

　　近年来，CAR-T细胞在多种实体肿瘤中开展了临床治疗研究，并取得了积极的临床数据。

　　小儿脑肿瘤：在一项I 期剂量递增试验中，四名患有弥漫性中线胶质瘤 (DMG) 的患者通过脑室内给药的方式接受了 GD2-CAR-T 细胞。诊断后 患者的平均预期寿命为 10 个月，但试验中四分之三的患者存活超过 20 个月。另一项临床试验表明，患有中枢神经系统肿瘤的患者可以安全地接受 6 到 9 次局部剂量的 HER-2-CAR-T 细胞。由于抗原表达的异质性，科学家们正在尝试使用双特异性和多价 CAR-T 细胞来对抗脑肿瘤。在异种小鼠模型中瘤内施用三价 CAR-T 细胞成功消除了 100% 的肿瘤细胞，并且这种 CAR-T 构建体还在临床前研究中证明了疗效。

　　成神经细胞瘤：GD2 在神经母细胞瘤 (NB) 中高度表达，并且有几项正在进行的临床试验使用具有信号共刺激分子的第二代和第三代 GD2 特异性 CAR 来治疗神经母细胞瘤。

　　在一项 II 期临床试验中，10 名高危神经母细胞瘤患者接受了CAR- T 细胞静脉输注，未出现神经毒性迹象。CAR-T细胞在这些患者中存活超过6个月，并在肿瘤复发后扩增，这表明肿瘤复发可以刺激CAR-T细胞。

　　在一项临床试验中，12 名患者在剂量递增的淋巴细胞清除方案后接受了 T 细胞静脉输注。没有患者表现出神经毒性迹象，三名接受最高剂量治疗的患者表现出疾病消退。

　　肉瘤：HER2 在多种肉瘤亚型中高表达。一项 HER2 CAR-T 细胞剂量递增研究报告称，一名患有转移性横纹肌肉瘤的儿童在输注 HER2 CAR-T 细胞和帕博利珠单抗后肿瘤得到缓解。

　　纽约食管鳞状细胞癌 1 (NY-ESO-1) 在滑膜肉瘤中的表达很高。在 I 期试验中，14 名滑膜肉瘤患者在两次 NY-ESO CAR-T 细胞给药后表现出部分反应，一名患者表现出完全反应。此外，科学家们已尝试修改 T 细胞以激活 MyD99，以防止肿瘤复发。

　　几项临床前研究正在测试肉瘤的潜在靶点，如血管内皮生长因子受体 2、成纤维细胞生长因子受体 1 蛋白和血小板衍生生长因子受体 α。

　　小结

　　由于恶劣的肿瘤微环境 和异质性抗原表达，CAR-T 细胞治疗实体癌存在着诸多挑战。尽管多种靶抗原已在临床试验中进行了安全性和可行性测试，但尚未获准用于临床。随着研究的进展，科学家发现 靶向多种抗原的CAR-T细胞可用于有效治疗实体瘤，未来的研究方向应着眼于解决免疫抑制性肿瘤微环境， 以及设计 CAR-T 疗法的递送方法和给药方案。随着研究的进展，相信未来CAR-T细胞将成为实体瘤的潜在治疗选择。

　　参考资料：

　　Guzman, G., Reed, M. R., Bielamowicz, K., Koss, B., & Rodriguez, A. (2023). CAR-T Therapies in solid tumors: Opportunities and challenges. Current Oncology Reports, 1-11.