同种异体BK病毒特异性T细胞性多灶性白质脑病临床治疗

　　来自美国M.D. Anderson癌症中心的科学家们阐述了利用T细胞疗法治疗进行性多灶性白质脑病（PML）的II期临床实验结果。

　　《新英格兰医学杂志》近日发表了一篇备受瞩目的文章《Allogeneic BK Virus–Specific T Cells for Progressive Multifocal Leukoencephalopathy》，来自美国M.D. Anderson癌症中心的科学家们阐述了利用T细胞疗法治疗进行性多灶性白质脑病（PML）的II期临床实验结果。MRI核磁共振结果显示，通过向PML患者体内注射活化的外源性异体T细胞，可显著缓解PML的临床症状和影像学特征；另外患者脑脊液（CSF）中的JC病毒DNA随着T细胞的输入浓度明显降低，并最终被清除；MC质谱流式数据显示，异体T细胞可穿过患者的血脑屏障，在注射后不同的时间点取患者外周血样进行分析发现供体•病毒特异性T细胞主要为CD4细胞，其在患者体内可以扩增并分化成为具有记忆型和活化型等表型特征的多种T细胞亚群。

　　进行性多灶性白质脑病多发于免疫力低下的人群，如AIDS患者、癌症患者、接受造血干细胞移植以及免疫抑制药物治疗的病人等，引起PML的病毒有JC、BK、SV40及AS等多种类型。感染通常导致患者出现精神状态失常、运动功能障碍、共济失调等症状，并且是进行性的甚至是致命的。目前临床上除了恢复细胞免疫功能外，还没有十分有效的治疗手段，但是该方法对于绝大多数免疫功能失常的PML患者来说基本上是不可行的。

　　来自M.D. Anderson癌症中心的科学家们对3名PML患者开展了临床II期的T细胞免疫治疗。这3名患者在治疗之前依次为接受脐带血移植、ruxolitinib药物治疗以及AIDS患者。研究人员每隔4周向3位患者体内输入第三方生产的冷冻保存的BK病毒特异性T细胞，直至检测显示从CSF中清除了JC病毒，之后通过影像学检测和质谱流式分析等方法，对该异体T细胞治疗PML的效果进行多方面的临床数据评估，并对供体病毒特异性T细胞进行追踪和全面的表型分析。

　　随着供体T细胞的输入，所有三名患者CFS中的JC病毒含量均出现了不同程度的明显降低，并伴随临床症状的缓解，通过进一步MRI结果观察到脑白质病变部分缩小或是与免疫重建炎症综合征（IRIS）一致的表征。在持续接受3-4次供体T细胞注射后，患者1完全康复，患者3则完全恢复了独立生活能力。

　　在该研究中，由于供体患者1的T细胞间的HLA-Bw不完全匹配（供体病毒特异性T细胞为HLA-Bw6阳性，受体移植的脐血单元为HLA-Bw6阴性），因此研究人员可在体内通过流式检测追踪供体T细胞向CFS的运输情况。首次注射后14天，在患者外周血中检测到的供体病毒特异性T细胞群增殖至初始状态的294倍；另外患者CSF中约20％的CD3细胞是供体来源，表明供体T细胞可穿过血脑屏障向中枢神经系统转运。注射250天后，在受体CFS中仍可检测到具有Tem表型特征的供体病毒特异性T细胞，表明活化的Th1细胞归巢于CSF。

　　研究人员进一步在异体T细胞注射后的不同时间点对患者外周血样本取样进行详细的细胞表型和特征分析。利用质谱流式技术（Mass Cytometry，该技术的最大优势在于使用金属标签标记抗体，无需补偿，可大幅拓展检测通道范围），作者设计了含40个标志物的检测panel，这样通过单样本、单次上机检测即可对不同免疫细胞及肿瘤细胞的亚群和特征进行全面分析。根据MC提供的多参数检测大数据，研究人员发现供体病毒特异性T细胞的在受体内的类型主要为CD4细胞，这些细胞在患者体内能够进一步扩增、分化成为具有记忆型和活化型等表征的多个亚群，这一结果与抗病毒反应是一致的。另外，BK病毒和JC病毒存在高度同源性，数据显示针对BK病毒的特异性T细胞在PML患者体内可有效地识别和清除JC，研究人员进一步准确鉴定出了特异的抗原表位。

　　该项研究在临床水平验证了第三方生产的HLA部分匹配的BK病毒特异性T细胞用于PML治疗的有效性，并取得了良好的临床效果，为治疗那些免疫力低下的PML患者提供了新的可行性方案。