吗啡备用根大鼠脊髓组织神经营养活性物质的分离纯化和生物活性测定

[摘要] 　目的　分离纯化吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液,以期获得某些神经营养活性物质。　方法　应用Sephacryl S2200 HR 凝胶层析、高效液相色谱(HPLC) 和组织培养等技术分离和检测神经营养活性物质。　结果　备用根大鼠脊髓组织提取液能够促进体外培养的鸡胚背根节(DRG) 神经突起的生长;吗啡作用的大鼠脊髓组织提取液也具有同样的作用,但备用根大鼠和吗啡作用的大鼠脊髓组织提取液在促神经突起生长作用方面并没有明显的差异。吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液具有明显的神经营养活性作用。吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液的Sephacryl S2200 HR 凝胶层析Ⅱ峰洗脱液和Ⅳ峰洗脱液能够促进DRG神经突起的生长。经SDS2PAGE 分析, Ⅱ峰洗脱液呈现1 条分子量约为65kD 的蛋白质主带, Ⅳ峰洗脱液的蛋白质成分较为复杂。应用HPLC对凝胶层析Ⅳ峰洗脱液作进一步的分离,发现HPLC A 峰洗脱液能够促进DRG神经突起的生长。经SDS2PAGE 显示,A 峰洗脱液的两条蛋白质主带分子量分别为30kD 和18kD。结论　吗啡备用根大鼠脊髓组织提取液中具有神经营养活性作用的物质可能是分子量约为65kD、30kD 和18kD 蛋白质