奶粉中亚硝酸盐检测

继恒天然曝出乳品原料肉毒杆菌污染之后，又一家新西兰乳品企业产品出问题。新西兰当地时间  8 月 19 日，中国国家质检总局、新西兰初级产业部（MPI）以及新西兰乳品企业 Westland 均公布，Westland公司生产的 390  公斤乳铁蛋白检测出硝酸盐含量超标，问题产品全部出口中国。

食物中的亚硝酸盐主要指亚硝酸钠。亚硝酸盐能使血液中正常携氧的低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，因而失去携氧能力而引起组织缺氧。有文献称其半致死量为  22 mg/kg。根据《GB 2762-2012 食品安全国家标准 食品中污染物限量》的要求，婴幼儿乳基食品中亚硝酸盐（以 NaNO2  计）不得超过 2.0 mg/kg。RephiLe 根据《GB 5009.33-2010 食品安全国家标准  食品中亚硝酸盐和硝酸盐的测定》，推出奶粉中亚硝酸盐检测方案。

一、实验原理

将奶粉试样经沉淀蛋白质、除去脂肪，经过提取和净化，以氢氧化钾溶液为淋洗液，阴离子交换柱分离，电导检测器检测。以保留时间定性，外标法定量。

二、仪器和试剂

ICS-2000离子色谱仪（Dionex）， AS11-HC 阴离子色谱柱（Dionex），PURIST UV 超纯水系统（RephiLe）。

RephiQuik Nylon 针头滤器（RephiLe）。所有色谱试剂均为色谱纯。

三、试验方法

1、试样预处理

将试样装入能够容纳 2 倍试样体积的带盖容器中，通过反复摇晃和颠倒容器使样品充分混匀直到使试样均一化。

2、提取

称取试样  2.5 g（精确至0.01 g），置于100 ml 容量瓶中，加超纯水 80 ml，摇匀，超声30 min，加入 3 %乙酸溶液 2 ml，于  4 ℃ 放置 20 min，取出放置至室温，加水稀释至刻度。溶液经滤纸过滤，取上清液备用。取上述备用的上清液约 15 ml，通过 0.22  μm 水性滤膜针头滤器、C18 柱，弃去前面 3 ml（如果氯离子大于 100 mg/L，则需要依次通过针头滤器、C18 柱、Ag 柱和 Na  柱，弃去前面 7 ml），收集后面洗脱液待测。

3、参考色谱条件

3.1 色谱柱：AS11-HC 阴离子色谱柱。

3.2 淋洗液：氢氧化钾溶液，浓度为 5 mmol/L～50 mmol/L；洗脱梯度为5 mmol/L 33min， 50 mmol/L 5min，5 mmol/L 5 min；流速1.3 ml/min。

3.3 抑制器：ASRS 300。

3.4 检测器：电导检测器，检测池温度 30 ℃。

3.5 进样体积：50 μL。

4、测定

4.1 标准曲线

取亚硝酸盐标准液，加水稀释，制成系列标准溶液，含亚硝酸根离子浓度为  0.00 mg/L、0.02 mg/L、0.04 mg/L、0.06 mg/L、0.08 mg/L、0.10 mg/L、0.15  mg/L、0.20 mg/L  的标准溶液，从低到高浓度依次进样。得到上述各浓度标准溶液的色谱图。以亚硝酸根离子的浓度（mg/L）为横坐标，以峰高（μS）或峰面积为纵坐标，绘制标准曲线或计算线性回归方程。