幽门螺杆菌Omp222HpaA融合基因工程菌蛋白的表达

摘要　目的:优化幽门螺杆菌Omp222HpaA基因工程菌pMAL2c2X2Omp222HpaA2TB1的表达条件,并对其表达产物进行纯化和鉴定。方法:在不同诱导时机、不同诱导剂( IPTG)浓度和不同诱导时间条件下诱导pMAL2c2X2Omp222HpaA2TB1的表达,测定目的蛋白的表达量。在优化条件下诱导工程菌表达,并应用SDS2PAGE方法对表达产物进行分析,采用Amyloss树脂预装柱对可溶性Omp222HpaA蛋白进行分离、纯化,对纯化后的蛋白行Western blot分析。结果:工程菌培养2 h时加入IPTG(终浓度为0. 4 mmol/L)诱导7 h,目的蛋白Omp222HpaA表达量达到菌体总蛋白的20%以上。经纯化得到了较高纯度( > 90% )的目的蛋白,并具有良好的免疫原性。结论:建立了从pMAL2c2X2Omp222HpaA2TB1可溶性表达产物中纯化较高纯度Omp222HpaA融合蛋白的方法。