影响荧光测量的几种因素

1．温度影响：一般说来，荧光随温度升高而强度减弱，温度升高1℃，荧光强度下降1～10%不等。测定时，温度必须保持恒定。 
2．PH值影响：PH 值影响物质的荧光，应选择最佳PH制备样品。   
3．光分解对荧光测定的影响： 
荧光物质吸收紫外可见光后，发生光化学反应，导致荧光强度下降。因此，荧光分析仪要采用高灵敏度的检测器，而不是用增强光源来提高灵敏度。测定时，用较窄的激发光部分的狭缝，以减弱激发光。同时，用较宽的发射狭缝引导荧光。荧光分析应尽量在暗环境中进行。   
4．散射光的影响： 
主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影响较大。校正办法：先用短的激发光激发，检出溶液的拉曼峰，然后进行荧光光谱校正。因为荧光光谱不随激发光波长的改变而改变，而拉曼光却随之改变。   
5．高浓度样品的影响： 
1）当激发光照射高浓度样品时，在激发光入口附近产生荧光，但这些荧光并不能进入荧光检测器。 
2）高浓度的分子之间相互作用而发生活性阻碍现象。

3）荧光的再吸收：即荧光光谱的短波长端和激发光谱的长波长端如果相互重叠，则发生荧光再吸收。          

总之，高浓度样品进行荧光分析时，应进行稀释。