检测蛋白用WB实验还是ELISA实验好？它们有什么区别

  检测蛋白的实验有很多种,WB实验和ELISA实验是比较常用的两种实验方法,这两种方法哪一种的实验结果更为可靠呢?有些人说ELISA自己包被抗体的话会比较麻烦，WB相比更加科学，容易被杂志接纳。但是血清中没有内参可以选择。是不是ELISA实验操作要简单很多，那么又如何来解决这样的一个问题呢？今天上海恒远来为您解答这个疑惑。

一、WB和ELISA的敏感性有所区别。虽然前者用ECL显色敏感度可达pg级，但不同的样品来源和抗体的质量，不能保证每次都到这个级别;而ELISA可以达到ng级。也就是说ELISA更适于丰度低的蛋白检测。而且由于ELISA检测所用的样品少，也适用于样品来源有限的蛋白浓度检测。

二、在定量方面，ELISA一般用于定性，定量也可， WB可以做到半定量。

三、ELISA不如WB的特异性好。

四、关于血清内因子的检测，如果WB检得出就不要用ELISA。血清内参的问题，在ELISA里也一样存在。操作来说ELISA当然简单，但由于两种方法各有优点，不能全面相互代替。

ELISA:

优点：灵敏，能够定量（有标准品的情况下）

缺点：需要购买试剂盒（自己做试剂盒的话建议您放弃），价格昂贵（双抗夹心法需要两个抗体，当然贵啊），而且需要排除假阳性假阴性的问题，需要考虑的问题较多。此外就是发文章没有图片不太好看（呵呵，自己的感觉）

WB：

优点：试剂便宜，认同度高，发文章没有问题，如果用高灵敏度的发光试剂盒也可以达到非常高的灵敏度

缺点：操作步骤较多，如果实验室没有成熟的条件，想开展起来需要花一些功夫，分子量很大（个人认为>200kD）和很小（<5kD）的目的蛋白比较麻烦。