原理
植物的蒸腾作用,气孔蒸腾占着重要的地位,而气孔在叶面上的数目及孔度的大小与气孔蒸腾的强度有密切的关系,因此了解气孔在叶面上的分布和面积,对于理解植物的蒸腾作用着重要的意义。
单位面积上气孔的数目可用显微镜数得每一视野中的数目,而后用物镜测微尺量得视野的直径,求得视野面积,由此而计算单位叶面上气孔的数目。气孔面积的测量借助于显微镜描绘器,在毫米方格纸上绘图后求得。
仪器
显微镜 物镜测微尺
绘图仪(或显微镜描绘器) 载玻片、盖坡片
毫米方格纸
操作步骤
1.测定气孔数目及密度
将新鲜叶子上(或下)表皮制片,置于显微镜下计算视野中气孔的数目(用低倍镜还是用高倍镜,决定于表皮上气孔的数目),移动制片,在表皮的不同部位进行5梍6次计数,求其平均值。随后用物镜测微尺量得视野的直径,则半径r为已知,按公式S=r2 (S为视野面积)计算视野面积,用视野中气孔的平均数/视野面积,即可求出气孔的密度,以“气孔数/mm2 ”表示。
2.测量气孔的面积要测量单位叶面上气孔的总面积,只要测得一个气孔的平均面积就可以了,因为据上法已求得气孔的密度。
用图钉将毫米方格纸固定在显微镜右边的桌面上,调节描绘器上的反光镜,使成45°倾斜,然后调节光线亮度,使气孔与毫米方格纸的形象在显微镜视野中重合,用铅笔在方格纸上绘若干个气孔图,这样放大后的气孔在面积等于20mm2 ,要求出气孔的实际面积,还必须知道显微镜的放大倍数。为此,取物镜测尺置于显微镜下,如前法绘若干测微尺的刻度于方格线上,以确定放大后的测微尺每一刻度相当于若干mm,由于物镜微尺每一小格刻度的实际长度为10μm是已知的,所以显微镜的放大倍数即可求得。例如测微尺的每一刻度等于毫米方格纸上的5mm,那么显微镜的放大倍数即为500。
确定了长度的放大倍数后,还需要算出面积的放大倍数,由上面可知实际面积为100μm2 ,放大后则得25mm2 。用比例法即可求得气孔的实际面积。
100∶25=X∶30
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