Pichia.pastoris酵母菌体内无天然质粒，所以表达载体需与宿主染色体发生同源重组，将外源基因表达框架整合于染色体中以实现外源基因的表达。包括启动子、外源基因克隆位点、终止序列、筛选标记等。表达载体都是穿梭质粒，先在大肠杆菌复制扩增，然后被导入宿主酵母细胞。为使产物分泌胞外，表达载体还需带有信号肽序列。
摘要:目的构建重组表达人C2型利尿钠肽(CNP)2人血清白蛋白(HSA)融合蛋白质的毕赤酵母。方法重叠PCR拼接CNP(400bp)2HSA(1800bp)成融合基因,双酶切后克隆至表达载体pPIC9......
摘要:为了探讨甲醛致真核生物与原核生物DNA2蛋白质交联(DNA2proteincrosslinks,DPC)的作用,以毕赤酵母(Pichiapastoris)和大肠杆菌(Escherichiacol......
【摘要】目的：为了获得人Leptin（瘦素或瘦蛋白）而进一步研究其生理作用、作用机制与病理意义。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法，从人腹部皮下脂肪组织中分离脂肪细胞总RNA，经逆转录......
摘要:巴氏毕赤酵母表达体系是近年发展起来的真核表达体系,具有良好的应用前景。本文综述了应用该体系高效表达外源蛋白需考虑的策略。......
巴氏毕赤酵母表达体系是近年来刚发展起来的真核表达体系，其操作技术和酿酒酵母非常相似，相比而言表达体系的应用还不够广泛，但这一体系已经显示出很好的优势和应用前景，已经成为目前分子生物学领域中用于表达重组......
摘要:采用双水相萃取与疏水层析分离纯化重组巴氏毕赤酵母表达的基因工程人溶菌酶。通过正交实验方法研究了聚合物浓度、盐浓度和pH对双水相体系萃取人溶菌酶过程的影响。结果表明:当双水相萃取的pH为4,硫酸钠......
【摘要】目的用DNA重组技术在毕赤酵母中表达多聚组氨酸融合重组乙型肝炎病毒表面抗原S蛋白,与血源乙型肝炎Dane颗粒联合使用,制备乙型肝炎表面抗体酶免试剂盒。方法将S基因插入酵母表达载体,转化毕赤酵母......
神经生长因子（NerveGrowthFactor,NGF)是一种由118个氨基组成的蛋白质，是神经科学领域中最引人注目的课题之一。但是由于NGF3个链内二硫键影响折叠的原因，用传统的基因工程方法获得大......