因为毕赤酵母刚从超低温冰箱或者冷藏柜取出后,活性很低,如果保存时间过长甚至可能已经死亡,此时如果不经过活化就直接用会造成适应期长,生长缓慢甚至没有生长现象,进而影响实验的进程和准确性。YPD
或YEPD作为酵母菌常用的培养基,可以使处在低温的毕赤酵母生长繁殖,并且恢复保持到较高的活性。在日常实验过程中,如果所用的毕赤酵母的保存时间比较短,从冷藏柜取出后,放置常温也可以直接接种,结果影响不大的。
摘要:目的构建重组表达人C2型利尿钠肽(CNP)2人血清白蛋白(HSA)融合蛋白质的毕赤酵母。方法重叠PCR拼接CNP(400bp)2HSA(1800bp)成融合基因,双酶切后克隆至表达载体pPIC9......
摘要:为了探讨甲醛致真核生物与原核生物DNA2蛋白质交联(DNA2proteincrosslinks,DPC)的作用,以毕赤酵母(Pichiapastoris)和大肠杆菌(Escherichiacol......
【摘要】目的:为了获得人Leptin(瘦素或瘦蛋白)而进一步研究其生理作用、作用机制与病理意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,从人腹部皮下脂肪组织中分离脂肪细胞总RNA,经逆转录......
摘要:巴氏毕赤酵母表达体系是近年发展起来的真核表达体系,具有良好的应用前景。本文综述了应用该体系高效表达外源蛋白需考虑的策略。......
巴氏毕赤酵母表达体系是近年来刚发展起来的真核表达体系,其操作技术和酿酒酵母非常相似,相比而言表达体系的应用还不够广泛,但这一体系已经显示出很好的优势和应用前景,已经成为目前分子生物学领域中用于表达重组......
摘要:采用双水相萃取与疏水层析分离纯化重组巴氏毕赤酵母表达的基因工程人溶菌酶。通过正交实验方法研究了聚合物浓度、盐浓度和pH对双水相体系萃取人溶菌酶过程的影响。结果表明:当双水相萃取的pH为4,硫酸钠......
【摘要】目的用DNA重组技术在毕赤酵母中表达多聚组氨酸融合重组乙型肝炎病毒表面抗原S蛋白,与血源乙型肝炎Dane颗粒联合使用,制备乙型肝炎表面抗体酶免试剂盒。方法将S基因插入酵母表达载体,转化毕赤酵母......
神经生长因子(NerveGrowthFactor,NGF)是一种由118个氨基组成的蛋白质,是神经科学领域中最引人注目的课题之一。但是由于NGF3个链内二硫键影响折叠的原因,用传统的基因工程方法获得大......