大豆异黄酮是大豆生长中形成的一种次级代谢产物。由于是从植物中提取,与雌激素有相似结构,当大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋 白质合成、生长因子活性,是天然的癌症化学预防剂。平时多食用富含大豆异黄酮的食物有助于抑制前列腺癌细胞的生长,膳食中的大豆异黄酮主要来自大豆和大豆 制品。采用高效液相色谱仪分析测定豆制品中大豆异黄酮含量,建立了大豆异黄酮的高效液相色谱分析方法。
样品制备:
称取10g大豆样品,用10倍量80%乙醇加热回流1h后,使用超声提取30min,将上清液用定性滤纸过滤,滤液移至100ml容量瓶中,用0.32μm滤膜的溶剂过滤器进行过滤;准确吸取液体样品10ml与离心管中,采用水浴氮吹仪在50℃温度下浓缩、结晶;用5ml乙腈-0.2%乙酸溶液溶解,0.32μm滤膜过滤后移入进样瓶中供液相色谱仪分析。
检测仪器:
超高液相色谱仪(紫外检测器,四元泵,手动进样器)、氮吹仪
试剂:甲醇、乙腈(色谱纯);水:重蒸水;样品制备用酒精为分析纯;异黄酮标准品大豆甙、黄豆甙、染料木甙、大豆甙元、黄豆甙元、染料木素。
色谱条件:
色谱柱:C18柱(150mm*6mm,5μm),流动相为乙腈溶液和乙酸溶液,流速为0.15ml/min,柱温:200℃,进样量5μL。
使用溶剂过滤器处理制备样品,保证了样品纯度,有效防止样品中杂质对检测结果的影响;水浴氮吹仪对样品溶剂进行隔绝空气,高温加热结晶处理,更适于标准样品溶液的配置。液相色谱仪检测豆制品中异黄酮的方法重现性好,精密度高,回收率高。
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