问:做电镜灌流,用2%多聚甲醛+2%戊二醛灌流固定,结果配成1%多聚甲醛+1%戊二醛了,这两个浓度对电镜的固定有影响吗?
我怕固定得不好,修完组织块儿后放在2.5%的戊二醛里固定5小时,这样可以吗?
答:没问题的,我们不灌流,取完了放2.5%的戊二醛也没问题。
这个要看你做那部分组织,如果是脑组织,那么灌流固定就很重要了,因为取脑操作的时间会比较长,灌流能保证及时固定,浓度高渗透速度自然就快些,对深部组织固定效果会好于浅表组织,而且由于脑组织内髓鞘这类致密组织较多,固定液浓度低了渗透效果差,这部分组织固定效果不会很理想;如果是胸腹腔的脏器组织,灌不灌流其实影响不大,主要是动作要快。
天坛医院的孙老师是电镜专家,你可以多问问他们室的人,多沟通肯定没问题,我想他们既然接收了你的样本,一定会想办法帮你做到最好的。
补充下,组织块别取太大了,一般情况1个立方毫米大小的块固定效果会比较好,取材的时候可以先剪下一块组织,放到固定液里预固定10分钟,然后用手术刀或双面刀修小,剪刀剪过的地方不要,镊子夹取的时候要轻,带点固定液移取样本;戊二醛要新鲜,保存不好容易失效。
这个要看你做那部分组织,如果是脑组织,那么灌流固定就很重要了,因为取脑操作的时间会比较长,灌流能保证及时固定,浓度高渗透速度自然就快些,对深部组织固定效果会好于浅表组织,而且由于脑组织内髓鞘这类致密组织较多,固定液浓度低了渗透效果差,这部分组织固定效果不会很理想;如果是胸腹腔的脏器组织,灌不灌流其实影响不大,主要是动作要快。
天坛医院的孙老师是电镜专家,你可以多问问他们室的人,多沟通肯定没问题,我想他们既然接收了你的样本,一定会想办法帮你做到最好的。
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