电镜固定(电镜,戊二醛,灌流,多聚甲醛)

问:做电镜灌流,用2%多聚甲醛+2%戊二醛灌流固定,结果配成1%多聚甲醛+1%戊二醛了,这两个浓度对电镜的固定有影响吗?我怕固定得不好,修完组织块儿后放在2.5%的戊二醛里固定5小时,这样可以吗?答:没问题的,我们不灌流,取完了放2.5%的戊二醛也没问题。这个要看你做那部分组织,如果是脑组织,那么灌流固定就很重要了,因为取脑操作的时间会比较长,灌流能保证及时固定,浓度高渗透速度自然就快些,对深部组织固定效果会好于浅表组织,而且由于脑组织内髓鞘这类致密组织较多,固定液浓度低了渗透效果差,这部分组织固定效果不会很理想;如果是胸腹腔的脏器组织,灌不灌流其实影响不大,主要是动作要快。天坛医院的孙老师是电镜专家,你可以多问问他们室的人,多沟通肯定没问题,我想他们既然接收了你的样本,一定会想办法帮你做到最好的。补充下,组织块别取太大了,一般情况1个立方毫米大小的块固定效果会比较好,取材的时候可以先剪下一块组织,放到固定液里预固定10分钟,然......阅读全文

电镜固定(电镜,戊二醛,灌流,多聚甲醛)

问:做电镜灌流,用2%多聚甲醛+2%戊二醛灌流固定,结果配成1%多聚甲醛+1%戊二醛了,这两个浓度对电镜的固定有影响吗?我怕固定得不好,修完组织块儿后放在2.5%的戊二醛里固定5小时,这样可以吗?答:没问题的,我们不灌流,取完了放2.5%的戊二醛也没问题。这个要看你做那部分组织,如果是脑组织,那么灌

戊乙稀醇缩甲醛是电镜中的固定剂吗

戊二醛,分子式为C5H8O2,是一种有机化合物,呈带有刺激性气味的无色透明油状液体,常用作杀菌剂、食品工业加工助剂、消毒剂、鞣革剂、木材防腐剂、药物和高分子合成原料等。戊二醛和多聚甲醛分子中的醛基均能与蛋白质结合形成分子间的交联, 影响蛋白质构象而使之固定, 而戊二醛与蛋白质分子中的氨基、肽链N-端

一文了解电镜固定液选择及配制

  自1931世界上第一台电子显微镜诞生以来,微观世界的大门开放的更加广阔。目前电镜被广泛运用于各器官系统疾病的病理诊断中,除了运用在肿瘤的诊断与鉴别诊断中,用得最多的是肾脏活检和某些皮肤疾病的诊断,其中透射电子显微镜是最早,最广泛应用于医学领域的一种电镜。随着电镜在医学上的应用,人类通过观察细胞膜

电镜组织样品固定液的选择及其配制

  自1931世界上第一台电子显微镜诞生以来,微观世界的大门开放的更加广阔。目前电镜被广泛运用于各器官系统疾病的病理诊断中,除了运用在肿瘤的诊断与鉴别诊断中,用得最多的是肾脏活检和某些皮肤疾病的诊断,其中透射电子显微镜是最早,最广泛应用于医学领域的一种电镜。随着电镜在医学上的应用,人类通过观察细胞膜

电镜用戊二醛固定液配制使用

电镜用 戊二醛固定液(2.5%, 电镜专用)戊二醛固定液(2.5%, 电镜专用)别名:Glutaric dialdehyde solution;Pentane-1,5-dial分子式:C5H8O2分子量:100.12CAS#:111-30-8外观:几乎无色液体特性:类型:Grade IIR:22-2

免疫电镜技术关键的几个问题

免疫电镜技术关键的几个问题免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体,能显示抗原或抗体在细胞超微结构水平的位置,已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。由于免疫电镜制作过程长,操作程序烦锁,因此,要得到满意的免疫金染色切片,必须在关键环节上给予注意,以下我们就免疫电镜染色技术中的几个问题进行探

免疫电镜技术关键的几个问题

  免疫电镜技术关键的几个问题   免疫电镜集电子显微技术与免疫细胞化学技术于一体,能显示抗原或抗体在细胞超微结构水平的位置,已成为当今生物医学领域的一项重要研究手段。由于免疫电镜制作过程长,操作程序烦锁,因此,要得到满意的免疫金染色切片,必须在关键环节上给予注意,以下我们就免疫电镜染色技术中的几

扫描电镜戊二醛固定时间过长

时间过长时pH值会降低,颜色变黄,固定效力也大大降低。若戊二醛pH值降至3.5以下或含有其它杂质时,必须纯化后才能使用。

扫描电镜戊二醛固定时间过长

时间过长时pH值会降低,颜色变黄,固定效力也大大降低。若戊二醛pH值降至3.5以下或含有其它杂质时,必须纯化后才能使用。

扫描电镜戊二醛固定时间过长

时间过长时pH值会降低,颜色变黄,固定效力也大大降低。若戊二醛pH值降至3.5以下或含有其它杂质时,必须纯化后才能使用。

免疫细胞化学常用试剂

一、固定剂大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽类)

免疫电镜标本固定实验

实验步骤1. 血管灌注固定固定效果最好,能使超微结构得到很好的保存。灌注装置由加压气球、压力表、三通接头和连接管道组成。不同的组织器官必须选择合适的灌注压力,详见有关书籍。灌注固定一般维持 10~15 min。然后用相同的固定液继续浸泡固定 2~4 h。2. 浸泡固定组织块切小后立即投入到固定液中,

免疫电镜标本固定实验

实验方法原理 实验步骤 1. 血管灌注固定固定效果最好,能使超微结构得到很好的保存。灌注装置由加压气球、压力表、三通接头和连接管道组成。不同的组织器官必须选择合适的灌注压力,详见有关书籍。灌注固定一般维持 10~15 min。然后用相同的固定液继续浸泡固定 2~4 h。2. 浸泡固定组织块切小后立即

灌注固定实验

实验材料实验动物试剂、试剂盒无水乙醇二甲苯酒精甘油生理盐水等仪器、耗材灌注瓶针管剪刀摄子止血钳组织钳咬骨钳等实验步骤1灌注固定用1%戊巴比妥钠(80mg/kg)麻醉动物,沿胸骨柄剪开胸腔,剪开心包膜,暴露心脏,与心尖成30°-45°夹角剪开左心室,再剪开右心耳,将灌注针头从左心室插入主动脉,固定针头

灌注固定实验

实验方法原理 实验材料 实验动物试剂、试剂盒 无水乙醇二甲苯酒精甘油生理盐水等仪器、耗材 灌注瓶针管剪刀摄子止血钳组织钳咬骨钳等实验步骤 1灌注固定用1%戊巴比妥钠(80mg/kg)麻醉动物,沿胸骨柄剪开胸腔,剪开心包膜,暴露心脏,与心尖成30°-45°夹角剪开左心室,再剪开右心耳,将灌注针头从左心

酶的细胞化学反应的样品制备过程

酶细胞化学的一个重要问题是既要保存好细胞内酶的活性,又要保存好细胞的结构,因此选择适当的固定剂种类、浓度、固定的方式和时间是细胞化学技术的一个关键问题。光镜样品固定多选用中性福尔马林或多聚甲醛,4℃、24小时,常规的石蜡包埋切片可以满足相当一部分酶的细胞化学要求;电镜样品固定通常用0.5~2%戊二醛

电镜样品可以放在pbs里储存吗

4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠 试剂:A液:多聚甲醛40g 蒸馏水400ml B液:Na2HPO4·2H2O16.88g 蒸馏水300ml C液:NaOH 3.86g 蒸馏水200m 配制方法:A液最好在500ml的三角烧瓶中配制(方法同前),至多聚甲醛完全溶解后冷却待用。注意,在溶解多聚甲醛时

非标记抗体免疫电镜实验——经典法

不标记抗体法通过系统的非标记抗体的免疫学反应,对组织中的抗原进行定位检测。分为用标记物显示和不同标记物显示两种方法。用于(1)抗体观察(2)免疫学研究。实验方法原理标记抗体法虽然具有许多优点,但也存在一些难以克服的问题,如标记抗体的分子增大,对细胞膜和组织的穿透力减弱;化学交联反应对抗体和酶的活性有

SD大鼠神经视网膜组织分离和鉴定

实验概要本研究对SD大鼠神经视网膜进行分离,并用组织学和透射电镜方法鉴定所分离的组织。主要试剂1%戊巴比妥钠,液氮,HE染色剂,4%多聚甲醛,二甲苯,苏木素-伊红,2.5%戊二醛,0.1mol/L磷酸缓冲液,1%饿酸,丙酮,环氧树脂618,醋酸铀,枸椽酸铅主要设备解剖显微镜,冻存管,光镜,LKB超薄

酶细胞化学技术的实验方法介绍

样品制备酶细胞化学的一个重要问题是既要保存好细胞内酶的活性,又要保存好细胞的结构,因此选择适当的固定剂种类、浓度、固定的方式和时间是细胞化学技术的一个关键问题。光镜样品固定多选用中性福尔马林或多聚甲醛,4℃、24小时,常规的石蜡包埋切片可以满足相当一部分酶的细胞化学要求;电镜样品固定通常用0.5~2

免疫细胞化学常用试剂介绍

一、固定剂  大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽

免疫细胞化学常用试剂介绍

一、固定剂  大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽

多聚甲醛怎样清洗

专业人士也得把管道拆了清除多聚甲醛的。当然,还有个办法是你不断的往管子里通蒸汽来清除。

透射电镜灌注固定戊二醛用多大浓度

物品, 透射电镜, 制备步骤 .一、取材: 组织块于1立毫米 二、固定:2.5%戊二醛磷酸缓冲液配制固定2或更间 用0.1M磷酸漂洗液漂洗         15 三 1%锇酸固定液固定           2-3 用0.1M磷酸漂洗液漂洗       15 三三、脱水:50%乙醇    

电镜专用戊二醛固定液(2.5%)使用说明书

戊二醛固定液(2.5%,电镜专用) 【产品组成】 Component SBJ-0639S SBJ-0639M Store at 戊二醛固定液(2.5%,电镜专用) 100ml 500ml 4℃,避光 【保存条件】 4℃,避光 【产品概述】 固定的目的在于保存

电镜专用戊二醛固定液(2.5%)使用说明书

戊二醛固定液(2.5%,电镜专用) 【产品组成】Component  SBJ-0639S  SBJ-0639M  Store at戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)  100ml  500ml  4℃,避光【保存条件】4℃,避光【产品概述】固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构,固定剂能阻止内源

扫描免疫电镜技术

实验概要本文介绍了扫描免疫电镜技术的具体操作步骤,扫描免疫电镜技术可为研究细胞或组织表面的三维结构与抗原组成的关系提供可能性。实验原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集

扫描免疫电镜技术

实验概要本文介绍了扫描免疫电镜技术的具体操作步骤,扫描免疫电镜技术可为研究细胞或组织表面的三维结构与抗原组成的关系提供可能性。实验原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集

ELISA、WB、QPCR采样及取样注意事项

ELISA取样及运输注意事项一、血清提取方法:1.全血促凝管取血,轻轻颠倒两三次,放置片刻让全血凝固,凝固后3000转15-30min离心取上清。2.全血普通EP管取血,室温放置2h左右,让其凝固,凝固后3000转15-30min离心取上清。特别注意:取血清避免震荡,以防止溶血,溶血会对结果有影响。

免疫电镜原理和影响因素

(一) 原理免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物,是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类:一类是免疫凝集电镜技术,即采用抗原抗体凝集反应后,再经负染色直接在电镜下观察;另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标记的抗体与相应抗原相结合,在电子显