病原微生物染色实验

实验方法原理

真菌是常见的致病菌，其成分含有较多的黏多糖和蛋白质，通过氧化剂，能够促使菌壁的多糖暴露出醛基，然后再与 Schiff 试剂进行结合，生成新的复红复合物而显示真菌的存在，常用高碘酸-复红染色法。

实验材料 石蜡组织切片

试剂、试剂盒 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水高碘酸Schiff 试剂

仪器、耗材 滴管

实验步骤

高碘酸氧化剂：高碘酸 0.5 g，蒸馏水 99 ml。

Schiff 试剂染色液（参见糖原染色液）。

1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。

2. 高碘酸氧化剂处理 10 min，流水洗 2 次。

3. 蒸馏水洗 2 次，Schiff 试剂染色液处理 20 min 左右，15℃ 以下时在湿盒内加入 50℃ 温水，可加快染色时间。

4. 浸入自来水洗 2 min，明矾-苏木精进行复染 10 s。

5. 无水乙醇脱水，二甲苯透明和中性树胶封固。

注意事项

1. 高碘酸氧化剂置冰箱内保存，可用较长时间。

2. Schiff 试剂染色后，不宜水洗时间较长，以免背景较深。

其他

结果：真菌呈紫红色，背景无色。