病原微生物染色实验
实验方法原理 真菌是常见的致病菌,其成分含有较多的黏多糖和蛋白质,通过氧化剂,能够促使菌壁的多糖暴露出醛基,然后再与 Schiff 试剂进行结合,生成新的复红复合物而显示真菌的存在,常用高碘酸-复红染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水高碘酸Schiff 试剂仪器、耗材 滴管实验步骤 高碘酸氧化剂:高碘酸 0.5 g,蒸馏水 99 ml。Schiff 试剂染色液(参见糖原染色液)。1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。2. 高碘酸氧化剂处理 10 min,流水洗 2 次。3. 蒸馏水洗 2 次,Schiff 试剂染色液处理 20 min 左右,15℃ 以下时在湿盒内加入 50℃ 温水,可加快染色时间。4. 浸入自来水洗 2 min,明矾-苏木精进行复染 10 s。5. 无水乙醇脱水,二甲苯透明和中性树胶封固。 注意事项 1. 高碘酸氧化剂置冰箱内保存,可用较长时间。2. Schiff 试剂......阅读全文
病原微生物染色实验
实验方法原理 真菌是常见的致病菌,其成分含有较多的黏多糖和蛋白质,通过氧化剂,能够促使菌壁的多糖暴露出醛基,然后再与 Schiff 试剂进行结合,生成新的复红复合物而显示真菌的存在,常用高碘酸-复红染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水高碘酸Schiff 试剂仪器、
病原微生物染色实验_真菌
病原微生物的种类繁多,包括属于真核微生物的真菌、厉于原核微生物的细菌(抗酸杆菌)、来自病毒的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)等。这些物质的化学成分中,含有不同的黏多糖、酸性蛋白和脂蛋白成分。染色后,通过氧化剂或直接加热条件下,可使染色剂与物质结合而形成牢固的复合物。实验方法原理真菌是常见的致病菌,其成
病原微生物染色实验——细菌
实验方法原理细菌体积较小,可在显微镜油镜下进行观察。细菌中的酸性蛋白质,通过革兰(Gram)碱性染料进行结合,遇革兰碘以后形成复合物,再经过分化剂,则显示革兰阳性菌(+)和革兰阴性菌(-)。常用 Gram 碱性复红-结晶紫革兰法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水碱性复红石
病原微生物染色实验——抗酸杆菌
实验方法原理结核杆菌和麻风杆菌通常称为抗酸杆菌,由于菌体内含有脂质蛋白质和多糖类物质,并由糖脂形成一个蜡质的外壳,当染色剂结合形成复合物后,用含酸分化剂处理也不易脱色,具有抵抗酸的作用,所以被称为抗酸杆菌。常用 Ziehl-Neelsen 抗酸杆菌染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙
病原微生物染色实验——乙型肝炎表面抗原
实验方法原理乙型肝炎表面抗原(HBsAg)是由多肽组成的脂蛋白,由于抗原内含有丰富的二硫键成分,经过氧化剂而转变为磺酸,然后再与染色液产生较强的亲和力进行着色。通过地衣红(Orcein)染色法,能够较好地显示乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水
病原微生物实验室对动物病原微生物分类
一、 一类动物病原微生物 口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水泡病病毒、非洲猪瘟病毒、非洲马瘟病毒、牛瘟病毒、小反刍兽疫病毒、牛传染性胸膜肺炎丝状支原体、牛海绵状脑病病原、痒病病原。 二、 二类动物病原微生物 猪瘟病毒、鸡新城疫病毒、狂犬病病毒、绵羊痘/山羊痘病毒、蓝舌病病毒、兔病毒性出血
糖类染色实验——糖原染色
实验方法原理糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双重蒸馏水
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理 细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体
糖类染色实验——黏液物质染色
实验方法原理在人体和动物体中能够分泌黏液物质,依其物质中含有的酸基不同,所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液,也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖,常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应(ABPAS)染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒阿尔辛蓝 8 GS冰醋酸蒸馏水麝香
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷(5-Bromodeoxyuridine:BUdR)的培养基中,当细胞在DNA 合成时,BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷(Thymidine:TdR)被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时,由于半保留复制的机制,中期染色体的每条染色单体D
姐妹染色单体分化染色实验
实验概要本文介绍了姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation,SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处
核酸染色实验
实验方法原理 在一般情况下,通过盐酸水解后使 DNA 残基分解碱基,然后从碳键处打断糖苷键而游离出醛基,再与无色复红液(Schiff)进行反应,形成紫红色的复合物(DNA)。常用 Feuhgen-Rossenbeck 染色法(孚尔根染色法)。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 Schiff 试剂染色
鞭毛染色实验
实验方法原理 鞭毛染色的基本原理,是在染色前先用媒染剂处理含使它沉积在鞭毛上,使鞭毛直径加粗,然后再进行染色。实验材料 苏云金芽孢杆菌假单胞菌金黄色葡萄球菌试剂、试剂盒 硝酸银鞭毛染色液0.01% 美蓝水溶液仪器、耗材 载玻片盖玻片凹载玻片无菌水凡士林显微镜实验步骤 1. 菌种的准备 要求用活跃生长
Hoechst染色实验
基本方案 试剂、试剂盒 Hoechst染料 二甲基亚砜染料 二苯亚胺 甲基
Hoechst染色实验
试剂、试剂盒 Hoechst染料二甲基亚砜染料二苯亚胺甲基水杨酸仪器、耗材 荧光显微镜水浴锅烘箱培养箱实验步骤 1. 用水按1:500稀释1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度2 μg/ml。将稀释染液加于切片上或将玻片浸于染液中,置室温2 min。2. 室温下,在水中洗2 min,晾干
钙质染色实验
实验方法原理 钙质即钙化物质,在各种组织中都可以形成钙质,这种钙盐沉积物也可被称为钙盐沉着,形态多样化,有的呈颗粒状和片块状等。其主要成分为磷酸钙和碳酸钙。常用 Dahl-McGec-Russell 茜素红 S 法染色。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水茜素红乙酸淡绿氢
Hoechst染色实验
Hoechst染色时无需用DAB来显色,它直接结合细胞的DNA ,经过紫外光激发后发出蓝色荧光。试剂、试剂盒Hoechst染料二甲基亚砜染料二苯亚胺甲基水杨酸仪器、耗材荧光显微镜水浴锅烘箱培养箱实验步骤1. 用水按1:500稀释1 mg/ml 的Hoechst 染液至终浓度2 μg/ml。将稀释染
糖类染色实验
实验方法原理 糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料 石蜡组织切片试剂、试剂盒 高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸 焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双
荚膜染色实验
实验方法原理 荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色合在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高。制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。
钙质染色实验
钙质沉积于骨组织或病理变化的组织中,多见于组织坏死、动脉粥样硬化和肿瘤等钙化的组织。在茜素的作用下,可与钙形成有色的螯合物(钙质)成分。实验方法原理钙质即钙化物质,在各种组织中都可以形成钙质,这种钙盐沉积物也可被称为钙盐沉着,形态多样化,有的呈颗粒状和片块状等。其主要成分为磷酸钙和碳酸钙。常用 Da
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法,可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂:1. 结晶紫溶液:A液:结晶紫:2g,95%乙醇:20ml。B液:草酸铵:0.8g,蒸馏水:80ml。需在用前24小时将A液. B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。2.
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤改良Ryui法一、实验试剂:A液:5%石炭酸: 10ml鞣酸: 2g饱和硫酸铝钾液:10mlB液:结晶紫酒精饱和液应用液:A液10份,B液1份,混合,室温存放。二、染色方法:1. 玻片的处理:要求用新的载玻片,用前须在95%酒精中浸泡24小时以上,用时从酒精中取
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时,可以适当曾加标本涂片的厚度,以提高检出率。染厚涂片时,须掌握复染色时间,如果背景过深,影响镜检。实验步骤碱性复红染色法:(萋纳Ziehl-Neelsen法)一、实验试剂:1. 萋纳石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和溶液:10ml5%石炭酸溶液: 90m
革兰氏染色配制及染色方法实验
实验方法原理本染色法是最基本的染色法,可使用于标本涂片或菌落涂片。染色结果将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类。实验步骤一、实验试剂:1. 结晶紫溶液:A液:结晶紫:2g,95%乙醇:20ml。B液:草酸铵:0.8g,蒸馏水:80ml。需在用前24小时将A液. B液混合,过滤后装入试剂瓶内备用。2.
脂质染色实验_苏丹-III-染色
实验材料冰冻切片试剂、试剂盒苏丹 III乙醇蒸馏水自来水甘油明胶盐酸乙醇Harris 苏木精仪器、耗材弯钩玻璃棒载玻片实验步骤苏丹 III 染色液:苏丹 III 2.5 g,70% 乙醇 500 ml,充分溶解后,室温下形成饱和溶液,可存放较长时间。1. 冰冻组织切片厚 10~20 μm 左右,采用
鞭毛染色配制及染色方法实验
实验步骤 改良Ryui法一、实验试剂:A液:5%石炭酸: 10ml鞣酸: 2g饱和硫酸铝钾液:10mlB液:结晶紫酒精饱和液应用液:A液10份,B液1份,混合,室温存放。二、染色方法:1. 玻片的处理:要求用新的载玻片,用前须在95%酒精中浸泡24小时以上,用时从酒精中
抗酸染色配置以及染色方法实验
实验方法原理抗酸染色直接用于痰标本时,可以适当曾加标本涂片的厚度,以提高检出率。染厚涂片时,须掌握复染色时间,如果背景过深,影响镜检。实验步骤碱性复红染色法:(萋纳Ziehl-Neelsen法)一、实验试剂:1. 萋纳石炭酸复红溶液:碱性复红乙醇饱和溶液:10ml5%石炭酸溶液: 90m
色素类染色实验_胆色素染色
实验方法原理在不正常的情况下,如血红蛋白分解产物和代谢发生的障碍等情况,使胆红素的含量增多,在组织中形成大小不等的颗粒或团块状物质,通过 Hall 胆红素反应,能够清楚地显示胆色素。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯乙醇蒸馏水三氯乙酸三氯化铁丽春红 S 水溶液苦味酸饱和液中性树胶仪器、耗材滴管玻
脂质染色实验_油红-O-染色
实验材料冰冻切片试剂、试剂盒油红 O乙醇二甲苯蒸馏水甘油明胶苏丹 III仪器、耗材弯钩玻璃棒5 ml 染色缸载玻片插板实验步骤油红 O-乙醇染色液:油红 O(oil red O,上海试剂三厂)2.5 g,70% 乙醇 500 ml,混合后间隔摇动多次,待 24 h 形成饱和液,即可使用。置室温中可保
色素类染色实验_黑色素染色
实验方法原理黑色素不正常情况下,可在全身各处形成含有黑色素的沉着物。黑色素组织易保存,常规固定剂与石蜡组织切片均不会丢失,其形态特点为大小不等的颗粒状物质,经过 Masson Fontana 的氨银液作用一定时间后,能够较好地显示黑色素。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水硝