最近,美国普渡大学的研究人员开发出一种方法,称为ZipChip,可大大降低ChIP分析的时间和成本,同时还能提高灵敏度。
染色质免疫沉淀(ChIP)研究,对于染色质相关蛋白和组蛋白修饰在基因组中的定位,提供了深入的见解。然而,标准的ChIP方法耗时、昂贵、费力,由于涉及大量的步骤,易受实验误差的影响。此外,全基因组ChIP研究产生了大量的数据,因此迫切需要某种方法,能够进行快速验证以及生物相关性分析。
为了克服这些挑战,研究人员最近开发出一种方法,称为ZipChIP,可大大降低ChIP分析的时间和成本。相关研究结果发表在最近的《Nucleic Acids Research》杂志。本文资深研究作者、普渡大学的Scott Briggs 指出:“ZipChIP的开发是很重要的,因为它将复杂的ChIP程序简化为一个简单的‘一下午实验’,可进行染色质相关蛋白的快速分析。”
该方法也提高了灵敏度,能够检测染色质相关蛋白和组蛋白翻译后修饰,这在以前是很难或几乎不可能检测到的。根据作者介绍,ZipChIP将是一种有用的工具,可用于各种实验室,有助于染色质和DNA模板化过程的研究。
相比较其他ChIP方法,ZipChIP需要较少的试剂和步骤。此外,研究人员优化了程序,可允许在qRT-PCR的微珠PCR反应中使用磁珠,从而带来更好的灵敏度。研究人员使用ZipChIP检测到了组蛋白修饰和两个酵母组蛋白去甲基化酶——Jhd2和Rph1,在以前用标准方法是难以检测的。
分析结果表明,在积极转录的基因上至少有两种H3K4模式。本文第一作者Kayla Harmeyer说:“这是令人惊讶的,因为只有一个主要的H3K4模式被报道过。这些富集模式的生物学意义是未知的,但现在这些问题得到了解决。”
研究还表明,这种多功能方法可用于酵母和拟南芥的更复杂的基因组。研究结果表明,ZipChIP还可以应用于一些生物,如斑马鱼,果蝇和哺乳动物细胞。Briggs说:“我们的初步数据表明,ZipChIP也对哺乳动物细胞起作用。然而,该方法的主要缺点是,本程序是用于基因特异性的分析。接下来,研究人员将优化ZipChIP,用于全基因组的研究。”
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