纤维测定仪对饲料中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维测定

采用范氏（Van Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维原理:植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。中性洗涤纤维经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。酸性洗涤纤维经 72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。将72%硫酸处理后的残渣灰化，在灰化过程 中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。在农业领域，或者是食品界，尤其是快速测定时，我们通常不选择实验室方法来测定，而是选择快速测定法，即直接用仪器如纤维测定仪。纤维测定仪利用酸碱消煮法来进行测定，有时又叫做粗纤维测定仪，因为测定的物质中不仅含有纤维，还含有木质素等其他物质，因此被称为粗纤维。

试剂的配制：中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C10H14O8Na22H2O，分析纯）和6.8g硼 酸钠（Na2B4O7?10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后，再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和 10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解 后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）；1N硫酸：量取约27.87ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化 铵）：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤。

操作步骤：中性洗涤纤维测定.准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸 钠。将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知 重量的玻璃坩埚中进行过滤，将烧杯中的残渣全部移入，并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液呈中性为止。用20ml丙酮冲洗二次，抽滤。将玻璃坩埚置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷却30min称重，直称至恒重。酸性洗涤纤维测定。准确称取1g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入 100ml酸性洗涤剂和数滴十氢化萘。将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。趁热用已知重量的玻璃坩埚抽滤，并用沸水反复冲洗玻璃坩埚及残渣至滤液呈中性为止。用少量丙酮冲洗残渣至抽下的丙酮液呈无色为止，并抽净丙酮。将玻璃坩埚置于105℃烘箱中烘2h后，在 干燥器中冷却30 min称重，直称至恒重。酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA）测定：将酸性洗涤纤维加入72%硫酸，在20℃消化3h后过滤，并冲洗至中性。消化过程中 溶解部分为纤维素，不溶解的残渣为酸性洗涤木质素和酸不溶灰分，将残渣烘干并灼烧灰化后即可得出酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量。

结果计算：中性洗涤纤维含量的计算：NDF（%）=（W1－W2）/W×100;式中：W1—玻璃坩埚和NDF重（g）；W2—玻璃坩埚重（g）；W—试 样重（g）；酸性洗涤纤维含量的计算：ADF（%）=（G1－G2）/G×100；式中：G1—玻璃坩埚和ADF重（g）；G2—玻璃坩埚重（g）；W— 试样重（g）。半纤维素含量的计算：半纤维素（%）=NDF（%）－ADF（%）；纤维素含量的计算：纤维素=ADF（%）－经72%硫酸处理后的残渣 （%）；酸性洗涤木质素（ADL）含量的计算：ADL（%）=残渣（%）－灰分（硅酸盐，%）。