纳米孔测序发现DNA损伤的新策略

　　最近，美国犹他大学的化学家们，设计了一种新的方法来检测DNA化学损伤，DNA损伤有时会导致基因突变，引发许多疾病，包括各种癌症和神经系统疾病。相关研究结果发表在十一月六日的《NatureCommunications》。

　　本文通讯作者、化学教授CynthiaBurrows说：“我们更进一步了解了导致遗传疾病的化学机制。我们有一种标记和复制DNA损伤的方法，从而使我们能够保存‘损伤在哪里以及是什么’的信息。”

　　本文第一作者、犹他大学的博士后JanRiedl说，百分之99的DNA损伤——称为A、C、G、T的化学碱基的损伤，可自然修复。其他的损伤可能导致基因突变，即碱基序列出了错，并可能导致疾病。这种新方法可以识别和检测到致病的病变位置。

　　Burrows说：“我们正在努力寻找致使细胞发生错误和突变的碱基化学变化。我们这种方法的强大之处在于，我们可以在相同的DNA链上，阅读一个以上的损伤位点。”

　　化学家们说，他们的新方法将让研究人员能够研究DNA病灶或损伤的化学细节。这样的病变，如果不自然修复，随时间的积累会导致突变，引发许多与年龄有关的疾病，包括结肠癌、乳腺癌、肝癌、肺癌和黑素瘤皮肤癌；动脉阻塞；神经系统疾病如亨廷顿病和LouGehrig病。

　　Burrows和同事写道：“这种方法能够识别损伤出现的化学特性和位置，这对于确定这些疾病的分子病因，是至关重要的。”

　　检测致病基因损伤的方法

　　DNA是一种分子，形状像一个双链螺旋结构，它包含了生物体用来发育、活动和繁殖的遗传指令。每一条链由四个化学碱基（A、C、G、T）的大量拷贝构成，由一个由糖和磷酸盐的骨架连接起来。当两股连接成双螺旋结构时，只有两种碱基对能形成C-G（或G-C）和A-T（或T-A）。

　　研究人员将发现病灶的新方法，与其他现有的技术相结合。首先，研究人员发现损伤，并以细胞自然修复的方式将其从DNA上切割出来，用所谓的“碱基切除修复”，英国科学家TomasLindahl因为这一发现获得了今年的诺贝尔化学奖。

　　其次，研究人员将一个“非自然碱基”插在剪断了的DNA损伤部位，对其进行标记。犹他大学的研究人员没有使用天然碱基对A-T和C-G，而是使用所谓的第三碱基对或非自然的碱基对——由斯克里普斯研究所的化学家发明。Burrows说，她的研究是这一发明的第一个实用使用。

　　第三、用一个非自然的第三碱基，对具有损伤位点的DNA进行标记，然后用PCR方法进行扩增。Burrows说，这项新研究的创新点是，利用碱基切除修复来剪除损伤，然后在损伤位点插入人工碱基对，从而使我们能够产生数百万个DNA拷贝。

　　第四，另一个化学标签，命名为18-crown-6ether，被贴在所有DNA链上的不自然碱基对，然后用Burrows和犹他大学化学家HenryWhite几年前发明的一种纳米测序法，对它们进行读取或测序。这种测序方法，通过让DNA链穿过一种分子大小的小孔或纳米孔，来确定一条DNA链上碱基的顺序和位置——包括非天然碱基标记的损伤部位。

　　Burrows说：“人出生时就具有30亿个碱基对组成的基因组，然后事情发生了。由于炎症和感染、过多的代谢或环境化学物质，产生了许多氧化应激损伤。”

　　这种新方法，帮我们寻找了“我们基因组如何响应我们所吃的和我们所呼吸的空气，并最终保持健康与不健康的分子细节”。