细菌学检测法

　　当水体污染程度增加时，腐生菌总量大大增加，因此可将其用于指示水体受有机污染的程度。但是，直接检验水中各种病源菌，方法复杂，难度较大，且结果也不能保证绝对安全。所以，在实际工作中，经常以检验细菌总数，特别是检验作为粪便污染的指示细菌如大肠菌群来间接判断水的卫生学质量。水体污染的两项常用细菌指标为细菌菌落总数和大肠菌群数。

　　 (一)细菌总数的测定

　　 细菌总数是指l mL水样在普通琼脂培养基中，于温度37℃培养24 h后，所长出的细菌菌落总数。1 mL水中，细菌总数为lO～100个，为极清洁水；100～1000个为清洁水；1000～10000个为不太清洁水；10000～100000个为不清洁水；大于100 000个为极不清洁水。

　　 细菌菌落总数测定：在无菌操作条件下，以10倍稀释法对待测水样进行系列稀释，稀释倍数依水样污染程度而定，以培养皿中的菌落数在30～300个的稀释度最合适。用无菌移液管自最后3个稀释度的试管中分别吸取1 mL稀释液，注入到无菌培养皿中，每个稀释度做两个培养皿，加入约15 mL已融化并冷却至45℃左右的营养琼脂培养基，平放于桌面旋转培养皿，充分混匀．冷却后即成平板。另取一个无菌培养皿只注人培养基作空白对照。将平板倒置于37℃恒温培养箱内培养24 h，然后进行菌落计数。

　　 (二)总大肠菌群的测定

　　 由于大肠菌群在水中存在的数目与致病菌呈一定正相关性，且具有抵抗力强、易检查等特点，因此作为水体受粪便污染的指标最理想。总大肠菌群系指需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌，在37℃培养24 h内能使乳糖发酵产酸产气者。它基本包括了粪便内全部兼性厌氧的革兰氏阴性杆菌，以埃希氏菌属为主。检验方法有发酵法和滤膜法两种。发酵法适用于多种水样，实验时间较长；滤膜法适用于杂质较少的水样，特别是自来水厂的常规监测。由于总大肠茼群既包括粪便污染，同时也包括非粪便污染的大肠菌总数。因此，有必要增加粪大肠菌群指标，以便直接反映出水源是否受到粪便污染的信息。而且，粪大肠菌群反映的是水体近期受粪便污染的情况，较总大肠茵群有更重要的卫生学意义。