近年来产前筛查工作的开展,对产前诊断工作的需求大大增加。羊水细胞培养后染色体核型分析是目前应用广泛和可靠的一种产前诊断方法。但羊水细胞培养其技术要求高、难度大、成功率不稳定,如何取得较高的羊水细胞培养成功率,则是这项技术成功应用于临床的关键。
羊膜腔穿刺是损伤性的取样技术,对孕妇和胎儿有造成损伤、感染、流产的潜在危险;羊水细胞主要来源于胎儿的皮肤、消化道、呼吸道等处,大部分是衰老和固缩的脱落细胞,这使羊水细胞培养较其他组织如外周血细胞、皮肤细胞的培养更为困难,一旦培养失败,孕妇较难接受第二次穿刺取样,所以对羊水细胞培养及传代培养的成功率要求很高。
培养基的选择是培养成功的关键因素之一,常规方法多为人工配制培养基,加入一定比例的血清,由于营养成分较少,羊水细胞培养所需时间较长,培养成功率低,有人通过添加生长因子和血清代用品,但步骤繁琐,容易造成污染。用于羊水培养的一种培养基,含有多种营养成分及生长因子,省去了配制步骤,方便省时,不易污染,质量稳定。
在实验室操作程序方面,常规的胰酶消化法收获细胞,由于经过多次胰酶消化和离心,细胞染色体分裂相损失较多,收获的细胞染色体分带清晰度欠佳,从而使培养的成功率降低。掌握好羊水细胞收获的时机,当在倒置显微镜下观察到有多个良好的贴壁生长的梭形细胞克隆,可见较多透亮的圆形和双圆形细胞时,这是成功的关键。
总之,羊水细胞培养是一项技术要求高、难度大、培养时间长、分裂相较少、成功率不稳定的实验项目;所以选择羊水的全营养培养基并根据自身具体情况去制定合适的实验程序,就可以取得较高的羊水细胞培养成功率,这也是这项技术成功应用于临床的关键。
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