实验概要
了解动物胆汁和胰液的分泌,以及神经、激素对它们分泌的调控。
实验原理
胰液和胆汁的分泌受神经和体液两种因素的调节。与神经调节相比较,体液调节更为重要。在稀盐酸和蛋白质分解产物及脂肪的刺激作用下,十二指肠粘膜可以产生胰泌素和胆囊收缩素。胰泌素(促胰液素)主要作用于胰腺导管的上皮细胞,引起水和碳酸盐的分泌;而胆囊收缩素主要引起胆汁的排出和促进胰酶的分泌。此外,胆盐(或胆酸)亦可促进肝脏分泌胆汁,称为利胆剂。
主要试剂
40%酒精生理盐水合剂、0.4% HCl溶液、胆囊胆汁、肾上腺素1:10000、乙酰胆碱1:1000。
主要设备
兔手术台、常用手术器械、注射器及针头、各种粗细的塑料管(或玻璃套管)、纱布、丝线。
实验材料
兔。
实验步骤
1. 收集胰液和胆汁的方法
1) 按常规行气管插管术后,于剑突下沿正中线切开腹壁10 cm,拉出胃;双结扎肝胃韧带从中间剪断。将肝脏上翻找到胆囊及胆囊管;然后,用注射器抽取胆囊胆汁数毫升备用。
2) 胆管插管 通过胆囊及胆囊管的位置找到胆总管,插入胆管插管,并同时将胆总管十二指肠端结扎。
3) 胰管插管 从十二指肠末端找出胰尾,沿胰尾向上将附着于十二指肠的胰液组织用盐水纱布轻轻剥离,约在尾部向上2~3 cm处可看到一个白色小管从胰腺穿入十二指肠,此为胰主导管。待认定胰主导管后,分离胰主导管并在下方穿线,尽量在靠近十二指肠处切开,插入胰管插管,并结扎固定。
2. 实验项目
1) 观察胰液和胆汁的基础分泌: 未给予任何刺激情况下纪录每分钟分泌的滴数。胆汁为不间断地少量分泌,而胰液分泌极少或不分泌。
2) 酸化十二指肠的作用: 将十二指肠上端和空肠上段的两端用粗棉线扎紧,而后向十二指肠腔内注入37℃的0.4% HCl 25~40 ml,记录潜伏期,观察胰液和胆汁分泌有何变化(观察时间约10~20 min)。
3) 耳缘静脉注射胆囊胆汁l~2ml,观察胰液和胆汁的分泌量有何变化。
4) 耳缘静脉肾上腺素lml,观察胰液和胆汁的分泌量有何变化。
5) 耳缘静脉注射乙酰胆碱l~2 ml,观察胰液和胆汁的分泌量有何变化。
注意事项
1. 术前应充分熟悉手术部位的解剖结构。
2. 手术操作应细心,尽量防止出血,若遇大量出血须完全止血后再行分离手术。
3. 剥离胰液管时要小心谨慎,操作时应轻巧仔细。
4. 实验前2~3 h给动物少量喂食,用以提高胰液和胆汁的分泌量。
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