脂肪测定仪提取桔梗总皂苷测定方法研究

　　桔梗为桔梗科多年生双子叶草本植物桔梗Platycodon grandiflorum (Jacq.)A.DC. 的干燥根，是传统大宗类常用中药材之一，性味苦、辛、平，归肺经，有宣肺、利咽、祛痰、排脓之功效。临床常用于咳嗽痰多，胸闷不畅，咽肿，音哑，肺痈吐痰，疮疡脓成不溃等症。《中国药典》2005 年版一部桔梗药材标准中以桔梗总皂苷含量作为药材质量评价的主要指标，并采用传统的索氏提取器法进行提取测定。笔者在长期实践中发现，利用这一方法进行桔梗皂苷含量测定费工费时、效率低，单个样品耗费药品量大，难以同时进行批量提取处理。为解决这一难题，本文利用脂肪测定仪对桔梗总皂苷提取方法进行了试验探索，并与传统的索氏提取器法进行了比较分析。

　　1 试验方法

　　1.1 材料 二年生桔梗药材（代号 ：060302），取自山东省农科院中药材科技示范基地（山东蒙阴）。

　　1.2 试剂 甲醇、乙醚均为分析纯 ，水为重蒸馏水。

　　1.3 仪器 索氏提取器，SZF-06C 脂肪测定仪（杭州托普仪器有限公司）。

　　1.4 索氏提取器（药典方法）法 按《中国药典》2005 年版一部桔梗项下含量测定方法进行。

　　1.5 脂肪测定仪提取法 取桔梗样品粗粉约 4 g，精密称定，置于抽提筒吊篮内，加 50 mL 甲醇，浸泡 15 h。将抽提筒内吊篮提升 5 cm，同时将冷凝管调节旋塞开启，加热回流 6 h，抽提物放置过夜。滤过，关闭冷凝器调节旋塞，加热滤液浓缩至 15~20mL，放冷，加乙醚 50 mL，振摇，放置至澄明，弃去上清液，沉淀分次加甲醇（20 mL，10 mL，5mL）加热使溶解，放冷，滤过，合并甲醇液，滤液浓缩至 15~20 mL，放冷，加乙醚 50 mL，振摇，同上法处理，合并甲醇液，置已恒重的蒸发皿中，于水浴锅上蒸发至干，在 105 ℃干燥至恒重，计算，即得桔梗总皂苷。

　　2 结果与讨论

　　2.1 两种方法测定结果比较 将同一批次的桔梗药材（060302）委托给济南市药品检验所，按照《中国药典》2005 年版一部桔梗含量测定方法进行测定 ;在实验室内采用脂肪测定仪对同一批次的桔梗药材（060302）进行提取测定，重复 3 次，结果表明，两种提取方法测定的结果间无显著差异 (P ＞ 0.05)。脂肪测定仪提取法可以替代药典规定方法测定桔梗总皂苷含量。

　　2.2 两种方法溶剂回收量的比较 用索氏提取器进行提取时，加入的甲醇在实验过程中都通过蒸发进行浓缩，挥发出的有机溶剂不但对空气造成一定的污染，而且对实验人员造成人身伤害。如果采用旋转蒸发仪进行有机溶剂回收，由于提取物在容器间的转移，容易造成较大的测定误差。而采用脂肪测定仪提取法在回收溶剂时则避免了上述现象，可以方便地进行浓缩的同时回收溶剂。试验表明，每次每个样品可以回收甲醇 50~75 mL，每次可同时测定6个样品，共回收甲醇约 300~450 mL。

　　2.3 两种方法在提取工序上的比较 实践中，索氏提取器在抽提和浓缩两个环节的转换中要更换不同的仪器，工序比较复杂，而 SZF-06C 脂肪测定仪则不存在这个环节，只需转动旋钮就可完成转换，并且 SZF-06C 脂肪测定仪有 6 个抽提瓶，对于大批量的测定材料，比传统测定方法具有明显优势。

　　3 小结

　　实验表明，脂肪测定仪法测定桔梗总皂苷含量数据准确，重复性好，可以替代传统索氏提取法，测定过程简化，对于样品的批量处理具有显著优势，是一种简便高效、经济环保的桔梗皂苷提取测定法。