蛋白印迹膜再生液实际操作技巧和注意事项

本产品采用温和洗涤配方，可在不影响目的蛋白的情况下，去除结合在印迹膜上

的一抗和二抗，使同一张膜可进行多次抗体检测，无需反复电泳和转膜，节省样品和

时间，适用于使用NC或PVDF膜进行Western Blot检测时条件的优化或同一样品不同蛋

白的检测。

 本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及其他用途    

 注意事项

 1．建议先检测表达量较低的目的蛋白，用再生液处理后检测表达量高的蛋白，如内参蛋白等。

2．请佩戴手套操作。

 操作步骤

 1．将曝光后的膜取出，加入适量的再生液（再生液充分覆盖膜表面，8.5 cm×5.5 cm膜加入15  ml左右再生液），室温振摇孵育15分钟左右（孵育时间应根据不同的目的蛋白来调整：比如内参抗体等表达量较高的蛋白，使用再生液时可以延长孵育时间至1小时或者在37℃孵育30分钟）。

2．弃去再生液，用15 ml缓冲液（PBST或TBST）洗膜3次，每次5 分钟，室温振摇。

3．为了检测酶标二抗洗脱是否完全，此时可以用显色方法来确定二抗是否洗脱掉。

4．待检测完毕，确认膜上无残留的酶活性，再生后的膜通过加入15 ml的封闭液进行封闭，室温30分钟或者4℃封闭过夜。

5．重新加入待测一抗，进行下一轮的WB实验。