试剂盒如何运用可将优点最大化？

试验操作者们能够随口说出。谈到ELISA的长处，也正是因而，使得ELISA试剂盒在试验室中得到广泛的应用范围。可是，试验成果的影响遭到多方面因素。而试剂盒产品的挑选也很重要，乃至彻底表现不出ELISA试验的含义与长处。那么怎么运用ELISA试剂盒可将长处放到最大呢？

1. ELISA最后一次洗刷一定要彻底！这一进程不是是反响聚，但却是决定试验胜败的要害！在ELISA测定的反响进程中应尽量防止非特异性吸附，应把这种非特异性吸附的搅扰物质洗刷下来。洗刷如不彻底，特别在最后一次，如有酶结合物的非特异性吸附，将使空白值升高。别的，在间接法中如血清标本内的非特异性IgG吸附在固相上而未被洗净，也将与酶标抗体效果而发生搅扰。

2. 洗板办法的挑选

① 主动洗板：如果有主动洗板机，应在熟练运用后再用到正式试验进程中。

② 手工洗板办法：吸去(不行触及板壁)或甩掉酶标板内的液体；在试验台上衬托几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几回；将引荐的洗刷缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此进程数次。

阴性和空白值高有几种可能：

① 酶标抗体浓度过高

② 显色时刻太久，显色温度过高(能够试一下室温)

③ 板条关闭不彻底

④ 板条吸附性太强，形成本底过高

3. 洗刷参数

洗刷量：主动洗板机会分配洗刷液。如果您之前遭受过高布景，那么不要犹豫，将洗刷量调为高，最好是比包被体积更高。太少的洗刷液会让一部分剖析外表洗刷不到，然后明显增加布景。一切反响孔的洗刷量有必要相同。ELISA板的制造商一般会在试剂盒的运用手册中列出包被量。职业中一般运用的包被量是200 μl。

如果您你的试剂盒也是这样，那么制造商可能会主张运用300 μl洗刷液进行洗刷，以便清洁整个反响孔的壁。一般来说，洗刷量越高，则孵育过程残留的抗体或抗原量就越少。

4. 清洗液

一般选用0.01Mol/L pH 7.2 PBS吐温缓冲液。吐温是聚氧乙烯去水山梨醇脂肪酸酯，为非离子型的外表张力物质，常做助溶剂。吐温的编号依聚合山梨醇所结合的脂肪酸品种不同而定。吐温20是结合月桂酸、吐温40是结合棕榈酸、吐温60是结合硬脂酸，吐温80是结合油酸等。一般用吐温20参加缓冲液内做为湿润剂，以削减非特异性吸附。也可在PBS缓冲液中参加1%牛血清白蛋白(或10%小牛血清或卵清蛋白)，特别在抗原包被今后，以牛血清白蛋白缓冲液再包被一次，而占有孔内剩余方位，这样来削减非特异性反响。