通过基因工程构建谷氨酸生产菌B44的研究

摘要:从大肠杆菌E. coli k - 12中通过PCR克隆出磷酸果糖激酶编码基因( pfkA) ,将其连到表达载体pCMVTN TTM vector。连接构建成重组质粒Ku - 1,导入谷氨酸棒杆菌B4 (已经诱变改造) ,并得到表达。酶活性测定表明Ku - 1的pfkA基因在B44中得到表达(磷酸果糖激酶为128. 6 ±0. 86U /g蛋白) 。解除磷酸果糖激酶对已经改造的谷氨酸的整个代谢途径的限制。同时,B44对糖转化率比B4 (由出发菌株B1诱变而来)高10. 64% ,产酸率比B4高17. 1%。