酶切、回收、连接常识（3）

9． 限制酶反应结果若显示没有切割，可能原因是（A，B，C，D，E）

  A． 限制酶无活性   B  存在抑制剂如SDS，EDTA   C  DNA不纯

  D． 缓冲液组成不合适    E  DNA甲基化

10．下列关于限制酶的叙述正确的是（B，C，D）

  A． 在限制与修饰系统中，修饰主要是甲基化作用，一旦位点被甲基化了，其他限制酶就不能切割了。

  B． 限制酶在DNA中的识别/切割位点的二、三级结构影响酶切效率。

  C． 如果限制酶的识别位点位于DNA分子末端，那么接近末端的程度也影响切割。

  D． 已知某限制酶在一环状DNA上有3个切点，因此该酶切割这一环状DNA，可得到3个片段。

  E． 能产生防御病毒侵染的限制酶的细菌，其自身的基因组中没有该酶识别的序列。

11．酶在储存过程中迅速失活，可能原因是（A，B，C，E）

  A． 储存温度不合适   B  稀释后储存   C  储存缓冲液不合适

  D． 分装后储存    E  储存缓冲液中蛋白浓度低

12．限制酶切反应结果显示为部分切割，可能原因是（A，B，C，D，E）

  A． 限制酶失活  B  有抑制剂如SDS，EDTA等存在   C  反应条件不合适

  D  DNA不纯    E  DNA结构（线形或超螺旋）的影响

13．如果用限制酶切割DNA后得到的片段比预期的多，可能原因是（B，C，E）

  A． 限制酶失活   B  限制酶的星号活性   C  有其他限制酶污染

  D  有抑制剂存在     E  测试DNA中有其他DNA污染

14．限制酶切割后的产物连接反应效果差，可能原因是（A，B，C，E）

  A．限制酶去除不完全   B  平端连接   C  核酸外切酶污染

  D．连接反应温度低于16℃

  E．从限制酶消化中带来太高浓度的磷酸盐或其他盐类

15．下列限制酶属同裂酶的是（A，B，D，E）

  A．BamHI  G↓GATCC                Sau3AI  ↓GATC

             CCTAG↑G                         CTAG↑

 

B． Sal I     G↓TCGAC              Xho I   C↓TCGAG

             CAGCT↓G                     GAGCT↓C

C． BamH I  G↓GATCC              EcoR I  G↓AATTC

             CCTAG↓G                     CTTAA↓G

D.   Hpa II   G↓CGC                Msp I   C↓CGG

             CGC↓G                        GGC↓C

E.    Xba I   T↓CTAGA              Nhe I   G↓CTAGC

             AGATC↓T                      CGATC↓G