食品中总汞的测定：双硫腙法

　　一、原理：

　　样品经消化后，汞离子在酸性溶液中可与双硫腙生成橙色络合物，溶于三氯佐烷，与标准系列比较定量。

　　 二、试剂与仪器：

　　 1、硝酸

　　 2、硫酸

　　 3、1N硫酸：量取5m1硫酸、缓缓倒入l5Oml水中，冷却后加水至180ml。

　　 4、5％硫酸：量取5ml硫酸，缓缓倒入90ml水中，冷却后加水至98ml。

　　 5、氨水。

　　 6、溴麝香草酚蓝指示液：0.1％乙醇溶液。

　　 7、20％盐酸羟胺溶液：吹清洁空气，可使含有的微量汞挥发除去。

　　 8、三氯甲烷：不应含有氧化物。

　　 9、双腙硫溶液：同食品中铅的测定方法。

　　 10、双腙硫使用液：同铅的测定方法。

　　 11、汞标准溶液：精密称取0.1354克经干燥器干燥过的二氯化汞，加1N硫酸使其溶解后，移入lOOml容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1ml汞。

　　 12、汞标准使用液：吸取1.Oml汞标准溶液，置于lOOml容量瓶中，加1N硫酸稀释至刻度，此溶液每毫升相当于lOug汞。再吸取此液5.Oml于50ml容量瓶中，加1N硫酸稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1ug汞。

　　13、消化装置

　　14、分光光度计

　　三、操作方法：

　　(一)样品消化

　　 1、粮食或水分少的食品：称取20克样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及80ml硝酸、15ml硫酸、转动锥形瓶，防止局部炭化。装上冷凝管后，小火加热，待开始发泡即停止加热，发泡停止后加热回流2小时。如加热过程中溶液变棕色，再加5ml硝酸，继续回流2小时，放冷，用适量水洗涤冷凝管，洗液并入消化液中，取下锥形瓶，加水至总体积为150ml。取与消化样品相同量的硝酸，硫酸按同一方法做试剂空白试验。

　　 2、植物油及动物油脂：称取10克样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及15ml硫酸，小心混匀至溶液变棕，然后加入45ml硝酸，装上冷凝管后，以下按1自“小火加热”起依法操作。

　　 3、蔬菜、水果、薯类、豆制品：称取50克捣碎混匀的样品(豆制品直接取样，其他样品取可食部分洗净，晾干)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45ml硝酸，15ml硫酸，转动锥形瓶，防止局部炭化，装上冷凝管后，以下按l自“小火加热”起依法操作。

　　 4、肉、蛋、水产品：称取20克捣碎混匀样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45ml硝酸，15ml硫酸，装上冷凝管后，以下按1自“小火加热”起依法操作。

　　 5、牛乳制品：称取50克牛乳、酸牛乳，或相当于50克牛乳的乳制品(6克全脂乳粉，20克甜炼乳，12.5克淡炼乳)置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45ml硝酸、牛乳、酸牛乳加15ml硫酸，乳制品加lOml硫酸装上冷凝管后，以下按1自“小火加热”起依法操作。

　　 (二)测定

　　 1、取1-5消化液(全量)，加20ml水，在电炉上煮沸10分钟，除去二氧化氮等，放冷。

　　 2、于样品消化液及试剂空白液中各加5％高锰酸钾溶液至溶液呈紫色，然后再加20％盐酸羟胺溶液使紫色褪去，加2滴麝香草酚蓝指示液，用氨水调节PH，使橙红色变为黄色(PHl—2)定量转移至125m1分液漏斗中。

　　 3、吸取0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.Oml汞标准使用液(相当于0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.Oug汞)，分别置于125m1分液漏斗中，加lOmll5％硫酸，再加水至40ml混匀。再各加lml20％盐酸羟胺溶液，放置20分钟并时时振摇。

　　4、于样品消化液，试剂空白液及标准液振摇放冷后的分液漏斗中加5.Oml双硫腙使用液，剧烈振摇2分钟，静置分层后，经脱脂棉将三氯甲烷层滤人1cm比色杯中，以三氯甲烷调节零点。在波长490nm处测光度，标准管吸光度减去零管吸光度，绘制标准曲线。

　　计算：

　　X=((A1-A2)×1000)/( M×1000)