饲料中脂肪含量测定的几个建议

　　脂肪是饲料及其原料中仅次于蛋白质的主要品质项目，目前其含量的测定普遍使用国家标准GB/T 6433 - 1994,采用索氏（Soxhlet）抽提原理，影响检测结果的主要因素有样品颗粒、抽提溶剂、抽提时间、大平和烘箱的准确度、抽提装置的性能、环境温度、所用器具清洁度、样品中水分含量水平、操作人员水平等。笔者在日常检测的具体操作过程，有时遇到检测结果受某些因素影响而不稳定的现象。为探讨出现这种现象的原因，我们就样品颗粒、抽提溶剂、抽提时间这3个主要影响因素对鱼粉、豆粕、大豆粉分别进行分析探讨和调控试验。

　　1 材料和方法

　　1.1样品的采集和制备

　　随机选用经广州黄埔港入境的鱼粉、豆粕、大豆粉。样品的抽取和制备按SN/T 0800.1- 1999《进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法》进行。

　　1.2主要仪器与试剂

　　磨样机，KNIFETEC 1095型；标准筛，BS 410/1986;脂肪测定仪；烘箱，东方B型；粗大平，PB5001,感量O.lg;分析大平，AE163,感量O.OOOlg;所需试剂主要是分析纯乙醚和沸点范围3060 0C的石油醚（ 30#） o1.3试验方法根据日常检验工作遇到的实际问题，就不同样品颗粒、不同抽提溶剂、不同抽提时间，参照现行国家标准GB/T6433- 1994《饲料粗脂肪测定方法》中的仪器法进行脂肪含量测定。

　　1.4评判依据

　　按现行国家标准GB/T 6433- 1994《饲料粗脂肪测定方法》中对实验结果限差的规定来评价测定结果数据的有效性。该国标规定：当脂肪含量大于或等于10%时，允许相对偏差为3%;当脂肪含量小于10%时，允许相对偏差为5%01.5主要计算公式1.5.1月旨肪含量脂肪含量（%）=（抽提后铝杯恒重一抽提前铝杯恒重）/风干试样重量X1001.5.2相对偏差相对偏差=（测量值一平均值）/平均值X100%

　　2 结果和分析

　　2.1不同样品颗粒大小对饲料脂肪抽提效果的影响

    在现行国家标准GB/T 6433- 1994《饲料粗脂肪测定方法》中，脂肪成分的提取主要是通过将样品浸泡在抽提溶剂中由抽提溶剂洗涤样品来实现的。样品颗粒的大小直接影响到样品能和抽提溶剂接触的广度和深度，这将直接影响到所测样品脂肪成分的提取（萃取）效率。通常在相同的试验条件卜，样品颗粒越小，脂肪成分的提取（萃取）效率越高，所测得样品的脂肪含量也会高一些。在日常检验工作中，有时怀疑因样品研磨不够细致而导致检测结果偏低。木文以现行国家标准GB/T 6433- 1994规定的0.45 mm（40目）颗粒大小为基础，随机选用鱼粉原样（即未经任何磨制）和经日常研磨方式（KNIFETEC 1095型磨样机，选2s或Ss模式，运转次数视样品性状而定）制备的大豆粉、豆粕样品作为试验组。对所有实验样品分别用1 mm X18目）， 0.45 mm X40目）， 0.212mm（70目）标准筛筛分检查样品颗粒大小的分布情况，详见表1.对将作为参照组的样品，如有0.45~筛上物的增加磨制时间，直到全部过0.45~筛。然后，对所有样品用乙醚作抽提溶剂。浸泡15min,淋洗45min进行脂肪含量检测。

　　2.2不同抽提溶剂对饲料脂肪检测结果的影响

　　现行国家标准GB/T 6433- 1994《饲料粗脂肪测定方法》中规定用分析纯乙醚作为抽提溶剂。

　　乙醚又名二乙醚，由浓硫酸与乙醇共热至130140℃时蒸馏而制得，沸点34.5 0C,相对密度0.714,易溶于乙醇和氯仿等，是良好的抽提试剂。但乙醚蒸气和空气的混合物极易爆炸，爆炸极限为1.85%一36.5%（体积）。另外，用于脂肪抽提实验后的乙醚，由于含有较多氧化物，其收集、储存、回收等方而存在安全隐患。因此，我们选用较为安全的石油醚，沸点范围3060 0C,相对密度0.630.66.石油醚由大然石油或人造石油经分馏而得，主要是戊烷和己烷等低分子量烃类的混合物，也是无色可燃易挥发澄清液体，不溶于水，溶于大多数有机溶剂，能溶解油和脂肪，多用做溶剂或化学试剂。我们参照现行国家标准GB/T6433-1994中仪器法，分别对3个大豆粉、3个豆粕和3个鱼粉共9个样品分别用乙醚和石油醚作为抽提溶剂进行浸泡15min,淋洗45 min的试验。

　　2.3不同浸洗时间对饲料脂肪抽提效果的影响

　　由于现行国家标准GB/T 6433- 1994《饲料粗脂肪测定方法》的原理属于重量分析法，所测得样品脂肪含量的数值与该样品在浸提前后两者的质量差值有直接联系，相同试验条件卜，随着浸提时间的延长，该样品在浸提前后两者的质量差值会增大，所测得样品的脂肪含量也会高一些。在日常检验实践中，我们有时怀疑因浸洗时间过短而导致检测结果偏低，木文以脂肪自动测定仪（2050型）操作说明书推荐的抽提时间60min其中浸泡15min,淋洗45 min）为基础，分别增设浸泡30min ,淋洗45 min和浸泡15min,淋洗90min两种抽提方式，对日常检验工作量较大的饲料用大豆粉、鱼粉以乙醚作抽提溶剂进行试验。

　　3 结论和建议

　　木文结合笔者在日常检测的具体操作过程和检验工作实践中，遇到检测结果受某些因素影响而有结果出入的现象，以常用饲料原料鱼粉、豆粕、大豆粉做研究对象，通过对样品颗粒、抽提溶剂、抽提时间这3个影响脂肪含量测定的主要因素分别进行分析探讨和调控试验，初步结果表明：（1）对大豆粉、豆粕、鱼粉样品，颗粒研磨至1.00~以卜。月旨肪抽提效果就可以达到现行国家标准GB/T 6433- 1994的规定；（ 2）用乙醚和与乙醚沸点相近的石油醚作为抽提溶剂来检测大豆粉、豆粕、鱼粉中脂肪含量的效果是一致的；（3）浸泡30min ,淋洗45 min和浸泡15min ,淋洗90min与浸泡15min,淋洗45 min的抽提效果，在实验误差范围内是一致的。

　　在现行国家标准GB/T 6433- 1994《饲料粗脂肪测定方法》中，脂肪成分的提取主要是靠有机溶剂来萃取，萃取过程中，除脂肪外，还有有机酸、磷脂、脂溶性维生素、色素等也溶到萃取液中，最终留在浸提铝杯里与脂肪一起恒重，影响试验，所以该国标也说明测定结果为“粗脂肪”或乙醚提取物。因此笔者建议：

　　（1）样品颗粒研磨至1.00~以卜，月旨肪抽提效果就可以达到现行国家标准GB/T 6433- 1994的规定；

　　（2）为消除安全隐患，可选用沸点范围为3060 0C的石油醚来代替乙醚作抽提溶剂；

　　（3）抽提时间以脂肪自动测定仪操作说明书推荐的60min其中浸泡15min,淋洗45min）为宜。