发布时间:2018-09-18 11:36 原文链接: 高速逆流色谱制备分离紫甘薯花色苷

摘要采用高速逆流色谱法分离纯化紫甘薯花色苷。以正丁醇-乙酸乙酯-0. 5% 乙酸( 3∶ 1∶ 4,V/V) 为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,流速2 mL/min,进样量300 mg,分离得到两种花色苷的混合物; 混合物再以0. 2% 三氟乙酸-正丁醇-甲基叔丁基醚-乙腈( 6∶ 5∶ 2∶ 1,V/V) 为溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,流速1. 5 mL/min,进样量100 mg,分离得到纯度分别为98. 5%和96. 7% 的两个花色苷单体组分。通过紫外-可见光谱、质谱、核磁等技术进行结构鉴定,确定组分1 为3-O-{ 6-O-( E) -咖啡酰-2-O-[6-O-( E) -对羟基苯甲酰-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖苷} -[5-O-( β-D-吡喃葡糖苷) ]芍药素,组分2 为3-O-{ 6-O-( E) -咖啡酰-2-O-[6-O-( E) -阿魏酰-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖苷} -[5-O-( β-D-吡喃葡糖苷) ]芍药素。实验从450 g紫甘薯中获得63 mg 组分1 和48 mg 组分2,为紫甘薯花色苷分离提供了高效、稳定、可靠的方法。

    紫甘薯[Ipomoea batatas ( L. ) Lam.]属旋花科一年生草本植物。20 世纪90 年代初,日本首先在甘薯中筛选出花色苷含量较高的紫甘薯品种,我国近年来也已着手紫甘薯新品种的选育。研究表明,其块根富含的花色苷类化合物,具有抗氧化、清除自由基[1,2]、调节血糖[3]、减轻肝功能障碍、促进肝损伤恢复[4,5]、抗突变[6]以及抑菌[7]等多种生理活性。此外,紫甘薯花色苷多具有酰基化结构,稳定性明显强于其它种类花色苷,具有更好的开发利用前景。目前,关于紫甘薯花色苷上述生理活性的研究结果多来自花色苷粗提物,其作用机理不明确,质量控制也缺少标准品。因此,建立紫甘薯花色苷单体化合物的高效制备技术对进一步作用机理研究及产品质量控制具有重要意义。
    采用纸色谱、薄层色谱、凝胶色谱等多种技术联用[8,9],可从不同品种紫甘薯中分离出多种花色苷单体,但操作繁琐、重现性差、易造成目标组分的不可逆吸附和变性,不适于大量制备。高速逆流色谱( HSCCC) 是一种不使用固体吸附剂的液-液分配色谱技术,避免了样品的不可逆吸附,操作简单、制备量大,广泛应用于天然活性成分的制备分离[10 ~ 12]。本研究建立了国产紫甘薯中花色苷高效、快捷、稳定的HSCCC 制备方法,获得了两种酰基化花色苷单体,采用紫外-可见光谱、质谱、核磁等技术进行了结构鉴定。


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