常见有机溶剂的纯化方法总结

在实验室里是不是常碰到这种情况:做某个实验,用不同品牌甚至同一品牌不同批次的试剂,能做出完全不同的结果,然后买了纯度更高的试剂回来做,结果就是正常的了…… 化学供应商提供的常用试剂仅可满足一般化学反应的需要。为了确保一些有机合成反应的顺利进行,常常要对试剂进行进一步的纯化处理。常用的溶剂处理方法是蒸馏。如果反应要求仅仅是无水,可在冷凝管上加干燥管,油封或充氮气球即可,如果需要达到无水无氧的条件,溶剂则需要脱氧处理。一般在氮气氛下进行。 试剂级溶剂的纯化无水的试剂级溶剂常有足够的纯度,有时可以不用蒸馏。为保证充分的干燥度,可在储藏时向其加入活性分子筛。欲使溶剂脱氧,可利用注射器或玻璃管向其中鼓入氮气约五分钟。一般溶剂的纯化大多数溶剂,只要在惰性气氛中将其从干燥剂中蒸馏出来,就可以达到足够的纯度。 1、烷烃 如己烷、戊烷等。首先用浓硫酸洗涤几次以除去烯烃,水洗,CaCl2干燥,必要时用钠丝或P2O5干燥,蒸馏。存放于带塞......阅读全文

常见有机溶剂的纯化方法总结

  在实验室里是不是常碰到这种情况:做某个实验,用不同品牌甚至同一品牌不同批次的试剂,能做出完全不同的结果,然后买了纯度更高的试剂回来做,结果就是正常的了……  化学供应商提供的常用试剂仅可满足一般化学反应的需要。为了确保一些有机合成反应的顺利进行,常常要对试剂进行进一步的纯化处理。常用的溶剂处理方

蛋白纯化常见问题总结

蛋白纯化过程中常遇见一些问题,这里整理了以下几个蛋白纯化实验中遇见的问题及其解决方案。1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我用助

蛋白纯化常见问题总结

蛋白纯化过程中常遇见一些问题,这里整理了以下几个蛋白纯化实验中遇见的问题及其解决方案。1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我用助

蛋白纯化常见问题总结(二)

3)Sephadex G-25(medium)柱脱盐时,盐浓度太高对柱效有影响吗?若有,一般对盐浓度限度如何?大家别客气,除盐对于浓度应该也是有一定的限制的,同样的样品盐浓度高的自然要比浓度低的要在柱子上走的峰要宽些,相对需要的柱子的分辨率也要高点,但是在正常的范围如1-2M应该影响不大,不过要除得

蛋白纯化常见问题总结(一)

蛋白纯化过程中常遇见一些问题,这里整理了以下几个蛋白纯化实验中遇见的问题及其解决方案。1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我用助

蛋白质纯化常见问题总结

蛋白质纯化过程中常遇见一些问题,这里整理了以下几个蛋白质纯化实验中遇见的问题及其解决方案。1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我

蛋白质纯化方法总结

分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。1.前处理:分离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态(如果做不到呢?比如蛋白以包涵体形式存在),不丢失生物活性。为此,动物材料应先提出结缔组织和脂肪组织,种子材料应先去壳甚至去种

蛋白纯化系统化常见问题总结

使用Blupadstart蛋白纯化系统过程中常遇见一些问题,这里整理了以下几个蛋白纯化实验中遇见的问题及其解决方案。        1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,

蛋白纯化实验一些常见问题总结

蛋白纯化过程中常遇见一些问题,这里整理了下几个蛋白纯化实验中的遇见的问题及其解决方式。1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我用助

蛋白纯化实验一些常见问题总结

蛋白纯化过程中常遇见一些问题,这里整理了下几个蛋白纯化实验中的遇见的问题及其解决方式。1)我现在手头有个融合蛋白,纯化的时候用助溶剂溶解后做了GST亲和层析,之后用蛋白酶切割后却发现目的蛋白没有活性。请问有哪些可能会出现这种原因?怎么解决?测过基因序列,没有问题。细胞破碎后,融合蛋白在沉淀里,我用助

几种蛋白质纯化方法总结

  别离纯化某一特定蛋白质的普通程序能够分为前处置、粗分级、细分级三步。   1.前处置:别离纯化某种蛋白质,首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并坚持原来的自然状态(假如做不到呢?比方蛋白以包涵体方式存在),不丧失生物活性。为此,动物资料应先提出结缔组织和脂肪组织,种子资料应先

纯化方法的常见应用比较

为了纯化合成的寡核苷酸 ,将采取方法有脱盐、BioRP、PAGE、HPLC等进行oligos纯化的工作。各种方法的侧重点不同,需根据具体实验的要求来选择*适合的纯化方法: 脱盐 寡核苷酸 合成后,为了纯化寡核苷酸成为天然的DNA结构,首先必须去除保护基团。通过浓氨水处理,合成的寡核苷酸从固相载体

常见细胞增殖检测方法总结

细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞;同时,多细胞生物可以由一个受精卵,经过细胞的分裂和分化,最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出,通过细胞分裂

常见细胞增殖检测方法总结

细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。单细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的个体。多细胞生物,以细胞分裂的方式产生新的细胞,用来补充体内衰老或死亡的细胞;同时,多细胞生物可以由一个受精卵,经过细胞的分裂和分化,最终发育成一个新的多细胞个体。必须强调指出,通过细胞分裂,可以将复制的遗

酶活性测定的常见方法总结

(1)定时法:(两点法)通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。酶与底物在一定温度下作用一段固定的时间,通过加入强酸、强碱、蛋白医学教育网整理沉淀剂等,使反应完全停止(也叫中止反应法)。加入试剂进入化学反应呈色测出

常见有机溶剂极性表

有机溶剂是能溶解一些不溶于水的物质的一类有机化合物,其特点是在常温常压下呈液态,具有较大的挥发性,在溶解过程中,溶质与溶剂的性质均无改变。    有机溶剂的种类较多,按其化学结构可分为10大类:    1、芳香烃类:苯、甲苯、二甲苯等;    2、脂肪烃类:戊烷、己烷、辛烷等;    3、脂环烃类:

包涵体的纯化和复性总结

关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌?  细胞的破碎方法  1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调

包涵体的纯化和复性总结

关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌  ? 细胞的破碎方法 1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖

包涵体的纯化和复性总结

关于包涵体的纯化是一个令人头疼的问题,包涵体的复性已经成为生物制药的瓶颈,关于包涵体的处理一般包括这么几步:菌体的破碎、包涵体的洗涤、溶解、复性以及纯化,内容比较庞杂 一、菌体的裂解 1、怎样裂解细菌?  细胞的破碎方法  1.高速组织捣碎:将材料配成稀糊状液,放置于筒内约1/3体积,盖紧筒盖,将调

PCR常见的问题总结

     PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些zui好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有: ①模板核酸的制备; ②引物的质量与特异性; ③酶的质量及活性; ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板: ①模板中

包涵体的纯化和复性总结2

8、包涵体复性液配方 对于包涵体复性,一般在尿素浓度4M左右时复性过程开始,到2M 左右时结束。对于盐酸胍而言,可以从4M开始,到1.5M 时复性过程已经结束。TRIS系统和PBS系统都没有明确的规定,这些需要你在实验过程中不断试验,确定合适的缓冲系统;不过复性过程主要是注意以下几个问题: 1)最适

生物碱类分离纯化技巧总结

生物碱是天然中药材中分量很重的一类活性成分,多具有显著而特殊的生理活性,在消炎、镇痛、降血压、抗癌等发面表现出越来越重要的药用价值。传统生物碱的分离方法主要有:浸渍、煎煮、溶剂回流、渗漉等,以及新开发的超临界流体萃取技术,微波辅助提取技术,超声辅助提取技术,双水相萃取技术等。上海樊克生物有限公司对生

有机溶剂的配制方法

带有脂肪性污物的器皿,可以用汽油、甲苯、二甲苯、丙酮、酒精、三氯甲烷、 乙醚等有机溶剂擦洗或浸泡。但用有机溶剂作为洗液浪费较大,能用刷子洗刷的大件仪器尽量采用碱性洗液。只有无法使用刷子的小件或特殊形状的仪器才使用有机溶剂洗涤,如活塞内孔、移液管尖头、滴定管尖头、滴定管活塞孔、滴管、小瓶等。 

儿童用药常见误区总结

  美国"福克斯新闻"网站6月16日发表美国儿科学会药品委员会主席丹尼尔·弗拉塔雷利及西雅图儿童医院温迪苏·施万森教授的文章,指出给孩子用药常见的错误。    过量用药。小儿用药剂量不好把握,应记住儿科医生推荐的剂量。服药时应用随药携带的专用药勺,而不是从厨房取来的汤勺。    急于用退热药。适度发

常见信号通路总结

1. NF-κB signaling pathwayNF-κB 通路作用机制当处于激活状态时,NF-κB 位于细胞质中且与抑制蛋白 IκBα 形成复合体。通过内在膜受体的介导,一些胞外信号物质可激活一种称为 IκB 激酶(IKK)的酶。IKK 转而磷酸化 IκBα 蛋白,这将导致后者的泛素化,使得

体外诊断中常见核酸提取纯化方法

目前,新冠疫情在全球席卷开来,对于如何确认是否感染,使用体外诊断核酸检测方法仍是不可或缺的手段。体外诊断,是指在人体之外,通过对人体样本(血液、体液、组织等)进行检测而获取临床诊断信息,进而判断疾病或机体功能的产品和服务。而检测人体样本的关键步骤之一,即是样本中的核酸(DNA和RNA)纯化。核酸纯化

Western-Blot常见问题总结

  Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与或标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电

气质常见12个问题总结

  1、样品进样一段时间后,突然进样口中压力不上不去了,这是为什么呢?  其实主要是因为我们进样次数过多,导致隔垫密封不好,压力上不去。  2、进样后,不出峰呢?这又是什么原因呢?  主要原因有以下几个问题:  第一看柱子是否连接正常;  第二看是否进到样品了,因为如果液面低于0.5ml时

农残检测前处理13种常见方法总结

  随着农业技术的不断发展,人类的生活水平不断提高,食品的质量和安全也成为每个人关心的问题,为提高食品中农药残留的精确度和准确度,各种农药残留检测的前处理技术不断更新,成为检测食品中农药残留的强有力的技术手段,本文将对食品中农药残留检测的前处理技术发展进行探讨。。。   一.振荡漂洗法:  

移液器使用常见问题及解决方法总结

   移液器,对于实验室人员而言,几乎是都要在实验室中用到的,并且在使用的过程中,也会遇到一些列问题。     一、移液器使用常见问题:     A.活塞/吸头 泄漏     B.吸头不适合移液器     C.二次使用吸头     D.移液器吸头没有碰到容器壁     E.湿度差异     F.没有