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染色体制备仪

培养细胞的染色体核型分析技术在产前诊断,肿瘤预后,不孕不育查因,科学研究等方面应用广泛,也是细胞遗传的一项基本检测技术。 通过体外培养获得大量的分裂细胞之后,加入秋水仙素,使分裂中的细胞停止于分裂中期,再经过染色体制备,将染色体的条带染色显示出来,显微镜下计数细胞核型、染色体数目及条带,分析后给出诊断意见。 但社会发展的同时科学技术也在进步,临床需求也在提高,培养细胞的染色体核型分析技术面临着时代发展的挑战,现就该技术应用现状做一个简单分析。 1 检测周期长 细胞培养周期长,如外周血细胞培养需要72小时,羊水细胞培养需要5-7天,再加上染色体制备时间,在显微镜下核型分析(计数染色体数及条带分析)过程,这一系列操作到出报告时间较长(一周到一个月时间不等),给患者增加心理负担也让临床对病情的掌控略显被动。 2 技术人才培养周期长,要求高 细胞培养及染色体制备容易受环境温湿度影响,细胞分裂中止时间点选择不恰当容易引......阅读全文

人癌细胞染色体制备

实验概要本实验介绍了人癌细胞染色体制备的基本原理及操作步骤。有助于学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括

用于染色体分析的妊娠产物及其他固体组织来源样本的...

用于染色体分析的妊娠产物及其他固体组织来源样本的培养及制备实验实验材料 组织样本试剂、试剂盒 含标准抗生素的 HBSS 溶液仪器、耗材 完全培养基培养皿解剖器械 塑料组织培养瓶实验步骤 基本方案1.用无菌解剖器械将组织标本放入含有5 mlHBSS及5倍浓度抗生素的35 mm 培养皿中。室温下放置&g

妊娠产物及其他固体组织来源样本的培养及制备实验

实验材料组织样本试剂、试剂盒含标准抗生素的 HBSS 溶液仪器、耗材完全培养基培养皿解剖器械塑料组织培养瓶实验步骤基本方案1.用无菌解剖器械将组织标本放入含有5 mlHBSS及5倍浓度抗生素的35 mm 培养皿中。室温下放置>30 min。2.将组织标本转移至一个新的含有约 2 ml 完全培养

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段...

实验材料核苷酸                                         &n

人癌细胞染色体制备及观察

一、实验目的学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。二、实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括:1.秋水仙素的预处理:秋水仙素又叫秋水仙碱,它是

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合转基因片段实验

实验材料核苷酸试剂、试剂盒冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤原位杂交的基本操作方法(图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交:标底是玻片上的染色体和细胞核,探针是带标记的待测 DNA 序列 [ 本书中即是转基因和对照,图 14.3(a)

人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备

实验概要本文介绍了人外周血染色体制备和体外培养细胞染色体标本制备的原理、操作流程及注意事项。实验原理人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种

用比较基因组杂交描述染色体结构异常实验

实验方法原理比较基因组杂交(CGH)是一种能够在一步全基因组筛查程序,描述G带不能发现的细胞遗传物质增加或减少的分子细胞遗传学技术。CGH优于进行全染色体涂染(wcp)的常规荧光原位杂交(FISH)和多色FISH之处,是它不仅能够识别增加的未知片段的染色体来源,而且还可将该片段定位于特定的染色体区带

动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤-1

实验九 动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片 一、实验目的: 了解动物细胞染色体制片的原理,学习骨髓细胞染色体的制片方法,观察动物细胞染色体的数目和形态。 二、实验原理: 染色体是基因的载体。真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色

用比较基因组杂交描述染色体结构异常实验(三)

六、中期染色体标本的变性1.在染色缸中加入大约50mL变性液,将染色缸放于75〜76℃水浴中。预热变性液使其温度达到(73±2)℃。2.从-20℃冰箱中取出实验所需的标本,室温下系列乙醇脱水,各2min。3.室温干燥片子(5min),或在实验室抽风橱中微风吹过标本使标本干燥。4.在37〜40℃电热板

小鼠细胞染色体制备及核型分析实验1

 培养以及小鼠外周血分裂相细胞收获实验实验材料雌性小鼠7〜10周龄试剂、试剂盒完全的RPMIPHA 溶液LPSFBS肝素钠溶液秋水仙碱溶液固定剂仪器、耗材聚苯乙烯组织培养管肝素化的微量毛细分血管有盖的12mm X 75mm 无菌管锥形玻璃离心管清洁的显微镜玻片实验步骤基本方案 培养以及小鼠

如何巧妙提高外周血培养成功率?

人体外周血淋巴细胞培养搭配染色体核型分析技术是诊断染色体变异的重要手段。淋巴细胞的培养是染色体标本制备的关键。培养基的选择、秋水仙素的用量及时间、温度、pH,固定、滴片等其中任何一点处理不当,就极有可能导致实验失败。本期专题,我们就聊聊 “外周血淋巴细胞培养,如何简化操作、做好细节、提高细胞培养

染色体制备体会

1、 培养基PH浓度、小牛血清量及培养箱温度的恒定是培养成功关键;  2、秋水仙素适量、适宜的处理时机和时间,是获得良好、足够分裂相的条件。分裂相的多少和染色体形态及带型处理良好与否均受其影响。  3、低渗处理是获得分散良好的分裂相关键步骤,低渗过度或不足都会造成染色体形态不良的结果。在低渗处理时期

羊水细胞染色体标本的制备

一、原理人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生长,所以在培养过程中的生长期最短。AF细胞在再培

羊水细胞染色体标本的制备

一、原理    人的羊水细胞能长成单层并可连续进行传代培养,但它们的一些特征与一般成纤维细胞不同。在羊水中存在着各种不同类型的胎儿细胞,依据其外形和生长特征可区分为以下三类:上皮细胞(E)、成纤维细胞(F)和羊水细胞(AF)。E细胞在胰酶消化的连续培养中不再生

小白鼠骨髓细胞染色体制片技术

实验概要1、掌握哺乳动物骨髓细胞染色体玻片标本的制备方法。 2、观察动物染色体的形态特征,统计小白鼠体细胞中染色体数目。实验原理制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色体制片是进行染色体显带、组型分析、原位杂交等的先决条件。 制备动物染色体标本原则上可以从所有发生有丝分

姊妹染色单体互换标本制备与分析实验

实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU)是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有BrdU的培养液中进行DNA复制时,BrdU可专一替代胸腺嘧啶核苷,而掺入到新复制的DNA核苷酸链中。因此只要通过两个复制周期,就可使姊妹染色单体中一条单体的D

姊妹染色单体互换标本制备与分析实验

基本方案             实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU)

姊妹染色单体互换标本制备与分析实验

基本方案             实验方法原理 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU)

姊妹染色单体互换标本制备与分析实验

姐妹染色单体是由一个着丝点连着的并行的两条染色单体,是在细胞分裂的间期由同一条染色体经复制后形成的,在细胞分裂的间期、前期、中期成对存在,其大小、形态、结构及来源完全相同。实验方法原理5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromodeoxyuridinc简称BrdU)是胸腺嘧啶核苷的类似物。人体淋巴细胞在含有

染色体制备

一、 人外周血染色体制备 1. 实验原理 人的外周血淋巴细胞培养方法是1960年由Moorhead 提出来的。正常情况下,人外周血小淋巴细胞都处在G1期(或G0期),但在体外给予一定的条件,进行培养,经72 h就可获得大量的有丝分裂细胞。这种取材简易、用血量少的培养方法已被广泛采用。

动物骨髓细胞染色体的制备与观察-1

[实验目的]1. 通过青蛙或小白鼠骨髓细胞染色体的制备,初步掌握低渗法制备动物骨髓细胞染色体的方法。2. 熟悉染色体的形态、种类及青蛙、小白鼠等动物染色体的数目或类别。[实验原理]骨髓细胞是具有旺盛分裂能力的细胞,从这些分裂细胞中,可观察到处于分裂中期的染色体,能对一种动物染色体的形态特征、数目进行

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基...(一)

荧光原位杂交技术检测植物基因组中整合的转基因片段实验实验材料 核苷酸试剂、试剂盒 冰水8-羟基喹啉秋水仙素固定剂酶解缓冲液仪器、耗材 载玻片玻璃盖玻片解剖针及镊子实验步骤 原位杂交的基本操作方法(图 14 .2 ) 演化自 Southern 杂交:标底是玻片上的染色

荧光原位杂交及其在人类基因组研究中的应用(二)

1.3信号的检测在洗去未杂交和错配对的探针分子之后,载片培养在免疫荧光试剂中,使其在探针杂交的位置上产生荧光信号,偶联了荧光素分子的抗生物素蛋白被用来标记已掺入到探针分子中的生物素。地谷新,二硝基苯,AFF和硫磺酸盐则可以用相应地标上了荧光素地抗免疫球蛋白来标记。  最常用地荧光素分子有F

流式细胞术在高等植物研究中的应用(二)

3.流式细胞术在高等植物中的应用3.1应用于植物中的特殊性由于植物细胞与动物细胞在结构上的差异,例如植物细胞具有细胞壁、特殊细胞器以及中央液泡等,因此流式细胞术应用于植物细胞时,在样品制备、染色、仪器的改造等方面都应适应植物细胞的上述特点。3.1.1制备植物染色体悬液的材料1984年De Laat和

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养人淋巴细胞染色体标本制备肿瘤细胞的染色体标本制备人体染色体常规核型的分析实验方法原理采用微量全血培养人体外周血中淋巴细胞,在淋巴母细胞分裂高峰时加入秋水仙素,破坏细胞纺锤体的形成,使细胞停止在分裂中期。然后收集细胞,低渗处理,使细胞胀大,染色体伸展。接着进行固定并除去中期分裂相中残存的蛋

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析            

正常细胞常规核型的标本制备实验

微量全血培养 人淋巴细胞染色体标本制备 肿瘤细胞的染色体标本制备 人体染色体常规核型的分析            

动物骨髓细胞染色体的制备与观察-2

二、染色体制备各种动物骨髓细胞染色体的制备方法基本都采用低渗法,现以青蛙为例,说明其制备的过程。1. 取健康小鼠一只,按每10g体重由腹腔注入含量为0.02% 的秋水仙素0.3ml(此步在实验前12~24小时完成,哺乳动物在实验前2~4小时完成)。2. 将青蛙处死,迅速取出后腿长骨,包括股骨和胫骨,

胸腹水染色体标本制备

某些肿瘤细胞可脱落入胸腹水中,并继续生长、增值。因此,由胸腹水细胞可制备较好的染色体标本。胸腹水细胞染色体分析对恶性肿瘤具有辅助诊断的价值。如分裂相多,异倍性,有结构畸变,常支持阳性诊断。二、用品和试剂同外周血染色体制备。三、操作步骤1. 新鲜胸腹水20-40毫升,以1000rpm离心10分钟。弃去