基因敲除(KO)在验证抗体特异性的应用

抗体作为基础科学研究和临床试验常用的工具之一,主要通过抗原-抗体的反应揭示蛋白质在生命活动中的变化。尽管它们被广泛的使用,但是没有相关标准以确保商业抗体特异性和质量上的一致性。这使得科学界一直存在“重现危机”,浪费了科学家们大量的时间和金钱,妨碍生命科学研究的快速发展。因此,对抗体进行敏感性和特异性测试,确保质量和可重复性至关重要。众所周知,基因敲除(Knock Out,KO)作为最被大家认可、最被信任的一种抗体特异性验证方法,是一项非常稳健的技术,可在不表达目的蛋白的 KO 细胞系或组织中通过检测目的抗体来确证其特异性。为了确定华安抗体产品的功能性、特异性、敏感性,我们对不同的产品是采用不同的验证策略来确保我们抗体产品在科研工作中的真实有效。为了确保大家可以拥有高度特异性的抗体,我们通过 CRISPR-Cas9 基因组编辑来进行 KO 验证,从而给大家提供研究所需的可靠结果。CRISPR/Cas9介导编码基因KO的原理,在......阅读全文

基因敲除(KO)在验证抗体特异性的应用

抗体作为基础科学研究和临床试验常用的工具之一,主要通过抗原-抗体的反应揭示蛋白质在生命活动中的变化。尽管它们被广泛的使用,但是没有相关标准以确保商业抗体特异性和质量上的一致性。这使得科学界一直存在“重现危机”,浪费了科学家们大量的时间和金钱,妨碍生命科学研究的快速发展。因此,对抗体进行敏感性和特异性

TetraOne-KO——基因敲除技术进展

TetraOne KO——基因敲除技术的重大突破 近日,赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布推出其全球专利技术TetraOne基因敲除,一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9(把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月),而且避免了TALEN、CRISP

基因敲除小鼠在抗体药物研发平台的应用

  “千鼠万抗”计划 (Project Integrum) 是百奥赛图抗体药物研发平台的重要组成部分。目标是利用3-5年时间,在全人抗体小鼠RenMab上,逐一对上千个潜在抗体药物靶点进行基因敲除,并利用这些基因敲除小鼠制备抗体的计划。其主要内容包括:   在RenMab上完成1000多个Ta

基因敲除小鼠在抗体药物研发平台的应用

 “千鼠万抗”计划 (Project Integrum) 是百奥赛图抗体药物研发平台的重要组成部分。目标是利用3-5年时间,在全人抗体小鼠RenMab上,逐一对上千个潜在抗体药物靶点进行基因敲除,并利用这些基因敲除小鼠制备抗体的计划。其主要内容包括: 在RenMab上完成1000多个Targets的

TetraOne-KO——基因敲除技术的重大突破

  TetraOne KO——基因敲除技术的重大突破   近日,赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布推出其全球ZL技术TetraOne基因敲除,一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9(把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月),而且避免了TALEN、

TetraOne-KO——基因敲除技术的重大突破

  近日,赛业生物科技(Cyagen Biosciences)宣布推出其全球ZL技术TetraOne基因敲除,一种不仅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9(把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6个月),而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脱靶效应困扰的革命性技术。TetraO

斑马鱼的基因敲除定制(Cas9KO)法介绍

  利用 CRISPR/Cas9 技术,针对靶基因序列设计 sgRNA, 指导 Cas9 蛋白在特定基因位点引起 DNA 双链断裂,在非同源性末端接合修复断裂 DNA 的过程中,靶基因碱基突变或缺失被引入到斑马鱼基因组中,最终导致靶基因无法正常转录翻译,达到基因敲除的目的。目前我们利用 CRISPR

斑马鱼的基因敲除定制(Cas9KO)法介绍

利用 CRISPR/Cas9 技术,针对靶基因序列设计 sgRNA, 指导 Cas9 蛋白在特定基因位点引起 DNA 双链断裂,在非同源性末端接合修复断裂 DNA 的过程中,靶基因碱基突变或缺失被引入到斑马鱼基因组中,最终导致靶基因无法正常转录翻译,达到基因敲除的目的。目前我们利用 CRIS

组织特异性基因敲除的定义

中文名称组织特异性基因敲除英文名称tissue-specific gene knockout定  义在特定组织细胞类型中使基因功能完全丧失的实验技术。应用学科遗传学(一级学科),发育遗传学(二级学科)

AVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达敲除应用与分析

  AAV-TBG-Cre/GOI系统简介:   l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。   Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子,用于肝脏特异性转外源基因表达。   Ø Cre重组酶是

AAVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用...

AAV-TBG-Cre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用与优势分析AAV-TBG-Cre/GOI系统简介:l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子

基因敲除的技术应用

基因敲除技术主要应用于动物模型的建立,而最成熟的实验动物是小鼠,对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。近年来,牛、羊、猪、猴等大型哺乳动物实现了基因敲除。但由于狗的生殖生理较为特殊,基因敲除狗的培育难度大为增加,狗基因组的定点修饰一直未获成功。针对这一问题,研究团队设计了一个自体移植的策略,

应用CRISPRCas9实现斑马鱼组织特异性基因敲除

  近日,来自美国哈佛大学的研究人员在国际学术期刊Development cell发表了他们的最新研究进展,他们利用基于CRISPR-Cas9技术开发的载体系统在斑马鱼上实现了组织特异性基因敲除,这对于以斑马鱼为主要研究工具的科学家们无疑是一个好消息。  斑马鱼具有养殖方便、繁殖周期短、产卵量大、胚

基因敲除技术的技术应用

基因敲除技术主要应用于动物模型的建立,而最成熟的实验动物是小鼠,对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。近年来,牛、羊、猪、猴等大型哺乳动物实现了基因敲除。但由于狗的生殖生理较为特殊,基因敲除狗的培育难度大为增加,狗基因组的定点修饰一直未获成功。针对这一问题,研究团队设计了一个自体移植的策略,

基因敲除技术的技术应用

基因敲除技术主要应用于动物模型的建立,而最成熟的实验动物是小鼠,对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。近年来,牛、羊、猪、猴等大型哺乳动物实现了基因敲除。但由于狗的生殖生理较为特殊,基因敲除狗的培育难度大为增加,狗基因组的定点修饰一直未获成功。针对这一问题,研究团队设计了一个自体移植的策略,

国际抗体验证工作组发布验证抗体特异性五大策略

   国际抗体验证工作组(IWGAV)是全球范围内由研究方向各异的蛋白质生物学家组成的独立工作组。IWGAV 9月19日在瑞典斯德哥尔摩披露,为满足在抗体特异性、功能性和重复性的迫切需求,该工作组已于9月在《Nature Methods》在线发表了初步的战略建议。“针对建立广泛可接受的抗体验证标准和

关于基因敲除技术应用介绍

基因敲除技术主要应用于动物模型的建立,而最成熟的实验动物是小鼠,对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。近年来,牛、羊、猪、猴等大型哺乳动物实现了基因敲除。但由于狗的生殖生理较为特殊,基因敲除狗的培育难度大为增加,狗基因组的定点修饰一直未获成功。针对这一问题,研究团队设计了一个自体移植的策略,

双特异性抗体的应用

双特异性抗体的应用:1.在体外免疫检测中的应用2.在体内免疫治疗中的应用3.在体内肿瘤放射免疫显像诊断中的应用

JBC:针对WB抗体验证提出最佳操作建议

  2020 年 1 月 28 日,英国剑桥和美国林肯:Abcam 和 LI-COR 欣喜地宣布,双方在同行评审期刊《生物化学杂志》(JBC)[1] 上发表了共同撰写的手稿,旨在提高整个生命科学行业的试剂可重复性标准。Pillai Kastoori 等人的新论文Antibody Validation

抗体特异性检测提议问答国际抗体验证工作组

  The International Working Group on Antibody Validation:  国际抗体验证工作组  Proposal for Antibody Specificity Testing Q&A  关于抗体特异性检测提议的常见问题及回答  1.What is th

基因敲除小鼠在药物依赖性研究中的应用(一)

基因敲除(gene knockout ) 是 80年代初出现的一项新的基因工程技术, 是制备转基因动物的重要技术之一。利用该技术可以培育先天缺陷某一特定基因的动物, 以此研究该特定基因的生理功能或在疾病发生发展中的意义。近年来基因敲除小鼠在药物依赖性研究中也得到广泛的应用。在传统的药物依赖性

基因敲除小鼠在药物依赖性研究中的应用(二)

3. 2 D2 受体在阿片类诱导的运动增强效应实验中, D2 受体KO 小鼠对内源性和外源性阿片类物质诱导的运动增强效应与 WT 小鼠无显著性差异, 表明 D2 受体缺失未影响阿片诱导的运动增强效应。在药物身体依赖性实验中,D2 受体 KO 小鼠和 WT 小鼠的戒断症状没有明显差别,说明 D2

基因敲除的不简单论p53基因的重要性

p53基因位于17号染色体p13,全长16-20kb,含有11个外显子,转录2.8kb的mRNA,编码一种分子量为43.7KDa的P53蛋白质,是一种核内磷酸化蛋白。因蛋白条带出现在Marker所示53KDa处,命名为P53。p53基因是人体一种肿瘤抑制基因(tumor suppressor gen

基因靶向的基因敲除

实验步骤构建重组基因载体绝大多数的基因敲除策略都是基于同源重组的机制,其基因载体包括载体骨架、靶基因同源序列和突变序列及选择性标记基因等非同源序列,其中同源序列是影响同源重组效率的关键因素。用电穿孔显微注射方法把重组DNA转入受体细胞(一般是胚胎干细胞)核内。同源重组基因重组时以载体的同源序列取代染

基因敲除技术的理论基础和应用

基因敲除就是通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点,以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。它克服了随机整合的盲目性和偶然性,是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。这项技术的诞生可以说是分子生物学技术上继转基因技术后的又一革命。尤其是条件性、诱导性基因打靶系统的

基因敲除的不简单论p53基因的重要性

  p53基因位于17号染色体p13,全长16-20kb,含有11个外显子,转录2.8kb的mRNA,编码一种分子量为43.7KDa的P53蛋白质,是一种核内磷酸化蛋白。因蛋白条带出现在Marker所示53KDa处,命名为P53。p53基因是人体一种肿瘤抑制基因(tumor suppressor g

基因敲除的定义

基因敲除(geneknockout),是指对一个结构已知但功能未知的基因,从分子水平上设计实验,将该基因去除,或用其它顺序相近基因取代,然后从整体观察实验动物,推测相应基因的功能。这与早期生理学研究中常用的切除部分-观察整体-推测功能的三部曲思想相似。基因敲除可中止某一基因的表达外,还包括引入新基因

RACE技术在基因工程抗体中的应用

前言20世纪80年代后期,随着分子生物学的迅速发展,使得人们可以通过基因工程技术对天然的分子进行人为的改造,这为抗体药物带来了新的突破点和希望。了解和阐明抗体分子的结构及功能,为人类疾病诊断及治疗提供了新的推动力。基因工程抗体 为了解决传统的鼠源性单抗存在的弊端,对鼠源性单抗进行改进以及人源化单抗的

p53基因的重要性

p53基因位于17号染色体p13,全长16-20kb,含有11个外显子,转录2.8kb的mRNA,编码一种分子量为43.7KDa的P53蛋白质,是一种核内磷酸化蛋白。因蛋白条带出现在Marker所示53KDa处,命名为P53。p53基因是人体一种肿瘤抑制基因(tumor suppressor gen

基因敲除技术

一.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因敲除的目的。随着基因敲除技术的发展,除了同源重组外,新的原理和技术也逐渐被应用,比较