AAVTBGCre／GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用...
AAV-TBG-Cre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用与优势分析AAV-TBG-Cre/GOI系统简介：l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子，用于肝脏特异性转外源基因表达。Ø Cre重组酶是在P1噬菌体中发现的一种重组酶，具有催化活性，而且与限制酶相似，能识别特异的DNA序列，即LoxP位点。Cre重组酶作用于同一DNA链上两个同方向的LoxP位点时，可以有效删除两个LoxP位点之间的碱基序列，达到重组靶DNA链的目的。Ø AAV8-TBG-Cre腺相关病毒可高效快速感染小鼠肝脏，目前被认为是最特异的肝实质细胞示踪工具。l 此外，本公司还提供靶基因的病毒定制服务AAV8-TBG-GOI（Gene of Interest），实现外源基因在肝实质细胞中快速特异表达。AAV-T......阅读全文
AAVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用...
AAV-TBG-Cre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用与优势分析AAV-TBG-Cre/GOI系统简介：l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子
AVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达敲除应用与分析
AAV-TBG-Cre/GOI系统简介： l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。 Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子，用于肝脏特异性转外源基因表达。 Ø Cre重组酶是
基因敲除小鼠在药物依赖性研究中的应用（二）
3. 2 D2 受体在阿片类诱导的运动增强效应实验中, D2 受体KO 小鼠对内源性和外源性阿片类物质诱导的运动增强效应与 WT 小鼠无显著性差异, 表明 D2 受体缺失未影响阿片诱导的运动增强效应。在药物身体依赖性实验中,D2 受体 KO 小鼠和 WT 小鼠的戒断症状没有明显差别,说明 D2
基因敲除小鼠在药物依赖性研究中的应用（一）
基因敲除(gene knockout ) 是 80年代初出现的一项新的基因工程技术, 是制备转基因动物的重要技术之一。利用该技术可以培育先天缺陷某一特定基因的动物, 以此研究该特定基因的生理功能或在疾病发生发展中的意义。近年来基因敲除小鼠在药物依赖性研究中也得到广泛的应用。在传统的药物依赖性
基因敲除小鼠在抗体药物研发平台的应用
“千鼠万抗”计划 (Project Integrum) 是百奥赛图抗体药物研发平台的重要组成部分。目标是利用3-5年时间，在全人抗体小鼠RenMab上，逐一对上千个潜在抗体药物靶点进行基因敲除，并利用这些基因敲除小鼠制备抗体的计划。其主要内容包括： 在RenMab上完成1000多个Ta
基因敲除小鼠在抗体药物研发平台的应用
“千鼠万抗”计划 (Project Integrum) 是百奥赛图抗体药物研发平台的重要组成部分。目标是利用3-5年时间，在全人抗体小鼠RenMab上，逐一对上千个潜在抗体药物靶点进行基因敲除，并利用这些基因敲除小鼠制备抗体的计划。其主要内容包括： 在RenMab上完成1000多个Targets的
基因敲除（KO）在验证抗体特异性的应用
抗体作为基础科学研究和临床试验常用的工具之一，主要通过抗原-抗体的反应揭示蛋白质在生命活动中的变化。尽管它们被广泛的使用，但是没有相关标准以确保商业抗体特异性和质量上的一致性。这使得科学界一直存在“重现危机”，浪费了科学家们大量的时间和金钱，妨碍生命科学研究的快速发展。因此，对抗体进行敏感性和特异性
肝脏特异性TMEM16A敲除小鼠在发现治疗非酒精性脂肪肝...
肝脏特异性TMEM16A敲除小鼠在发现治疗非酒精性脂肪肝的新靶点的应用非酒精性脂肪肝（Nonalcoholic fatty liver，NAFLD）是一种无过量饮酒史，但产生代谢应激性肝脏损伤的病症，可从单纯性脂肪肝进展为非酒精性脂肪性肝炎、肝纤维化和肝硬化，甚至肝癌、肝衰竭，是临床上最常见、发病率
文献中遇到的实验动物知识：基因敲除小鼠
投稿人：郭晓冲 中国医科大学动物部 写给看文献的你们： 我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识，希望对大家有帮助。为了便于理解，语言偏通俗，可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识，欢迎选修实验动物学。 第一集，关于基因敲除小鼠。 基因敲除小鼠（Knoc
文献中遇到的实验动物知识：基因敲除小鼠
我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识，希望对大家有帮助。为了便于理解，语言偏通俗，可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识，欢迎选修实验动物学。第一集，关于基因敲除小鼠。基因敲除小鼠（Knockout Mice），人们使用复杂的方法使小鼠体内的某一个基因不表达，从而使小鼠呈现这个
文献中遇到的实验动物知识：基因敲除小鼠
投稿人：郭晓冲 中国医科大学动物部 写给看文献的你们： 我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识，希望对大家有帮助。为了便于理解，语言偏通俗，可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识，欢迎选修实验动物学。 第一集，关于基因敲除小鼠。 基因敲除小鼠（Knoc
Fgf21基因敲除小鼠
背景信息FGF家族成员具有广泛的促有丝分裂和细胞存活特性，并参与多种生物过程，包括胚胎发育、细胞生长、形态发生、组织修复、肿瘤生长和侵袭。成纤维细胞生长因子21（FGF21）是一种肝细胞因子——即由肝脏分泌的一种激素，通过下丘脑室旁核中的FGF21受体信号传导调节糖摄入和对甜食的偏好，并与伏隔核内多
基因敲除小鼠的原理和方法
1.利用基因同源重组进行基因敲除。基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初，胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的顺利奠定了基因敲除的技术基础。1985年，首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES
Nacia数字PCR在基因表达分析中的应用
华盛顿大学医学院儿科和加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院儿科的研究人员建立了一个稳定可靠的基于RNA磁珠提取和数字PCR的方法，可从粪便样本中检测与EE（热带肠病）关联的人mRNA，灵敏度可达20拷贝GAPDH mRNA/200mg粪便样本。已有报道表明病人粪便中存在人mRNA，可作为反应病人消化道病
组织特异性基因敲除的定义
中文名称组织特异性基因敲除英文名称tissue-specific gene knockout定 义在特定组织细胞类型中使基因功能完全丧失的实验技术。应用学科遗传学（一级学科），发育遗传学（二级学科）
应用优化CRISPR技术建立基因完全敲除的小鼠及猴
6月6日，《细胞研究》在线发表了一项成果，应用改进的“C-CRISPR”技术可以获得单基因或多基因功能完全敲除的小鼠及猴。这项研究由中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所、脑科学与智能技术卓越创新中心的杨辉研究组、熊志奇研究组以及神经所苏州非人灵长类研究平台孙强团队合作完成。该研究通过将多个
基因敲除的技术应用
基因敲除技术主要应用于动物模型的建立，而最成熟的实验动物是小鼠，对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。近年来，牛、羊、猪、猴等大型哺乳动物实现了基因敲除。但由于狗的生殖生理较为特殊，基因敲除狗的培育难度大为增加，狗基因组的定点修饰一直未获成功。针对这一问题，研究团队设计了一个自体移植的策略，
基因表达过程中哪些因素与基因表达组织特异性有关
基因表达(geneexpression)是指细胞在生命过程中，把储存在DNA顺序中遗传信息经过转录和翻译，转变成具有生物活性的蛋白质分子。生物体内的各种功能蛋白质和酶都是同相应的结构基因编码的。差别基因表达(differentialgeneexpression)指细胞分化过程中，奢侈基因按一定顺序表
RTPCR在基因表达（gene－expression）检测中的应用
基因表达的检测有几种方法。经典的方法（仍然重要）是根据在细胞或生物体中 所观察到的生物化学或表型的变化来决定某一特定基因是否表达。随着大分子分离技 术的进步使得特异的基因产物或蛋白分子的识别和分离成为可能。随着重组DNA技术 的运用，现在有可能检测．分析任何基因的转录产物。目前有好几种方
中山大学医学院院长黄民教授发现肝再生的新靶点－PXR
中山大学医学院院长黄民教授、毕惠嫦教授课题组在肝脏学著名期刊 Hepatology （IF= 14.079）上发表题为 “Pregnane X receptor regulates liver size and liver cell fate via yes-associated protein
应用CRISPRCas9实现斑马鱼组织特异性基因敲除
近日，来自美国哈佛大学的研究人员在国际学术期刊Development cell发表了他们的最新研究进展，他们利用基于CRISPR-Cas9技术开发的载体系统在斑马鱼上实现了组织特异性基因敲除，这对于以斑马鱼为主要研究工具的科学家们无疑是一个好消息。 斑马鱼具有养殖方便、繁殖周期短、产卵量大、胚
全身敲除或兴奋神经元条件敲除L2A/LAMP2a的表达
首先，作者在小鼠中进行全身敲除或兴奋神经元条件敲除L2A/LAMP2a的表达。两种小鼠均出现了行为症状，全身敲除和条件敲除的小鼠症状类似。在到达六月龄时，兴奋神经元条件敲除小鼠出现脂褐质和K63泛素化蛋白累积，进一步提示蛋白降解清除出现了问题。 进一步，作者对小鼠的不可溶组份蛋白进行了数量蛋白
基因敲除技术的技术应用
基因敲除技术主要应用于动物模型的建立，而最成熟的实验动物是小鼠，对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。近年来，牛、羊、猪、猴等大型哺乳动物实现了基因敲除。但由于狗的生殖生理较为特殊，基因敲除狗的培育难度大为增加，狗基因组的定点修饰一直未获成功。针对这一问题，研究团队设计了一个自体移植的策略，
基因敲除技术的技术应用
基因敲除技术主要应用于动物模型的建立，而最成熟的实验动物是小鼠，对于大型哺乳动物的基因敲除模型还处于探索阶段。近年来，牛、羊、猪、猴等大型哺乳动物实现了基因敲除。但由于狗的生殖生理较为特殊，基因敲除狗的培育难度大为增加，狗基因组的定点修饰一直未获成功。针对这一问题，研究团队设计了一个自体移植的策略，
小鼠βactin基因的克隆表达（1）
动物组织RNA的提取实验目的：掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理：Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液，其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性，随后加入氯仿，酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同，造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中，RNA
小鼠βactin基因的克隆表达（3）
（2）质粒的提取及酶切鉴定分析 质粒的提取按照质粒提取试剂盒的操作步骤进行，然后进行双酶切鉴定。 管号 ① ② 质粒DNA
小鼠βactin基因的克隆表达（2）
实验步骤： （1）目的基因与表达载体的连接反应： ①表达载体和目的片段的酶切 管号 ① ② pGEX 4T-1
小鼠βactin基因的克隆表达（4）
实验步骤：（1）诱导靶蛋白表达分别挑取对照菌和重组菌1~2个菌落，接入5ml含Amp（30μg/ml）的LB培养液，37℃振荡培养过夜。取5ml过夜培养物接入500ml含Amp（30μg/ml）的LB培养液，37℃振荡培养2h以上，至对数中期（A550=0.5~1.0）。向诱导管中加入IPTG使其浓
基因表达分析在疾病诊断中的应用案例有哪些？
基因表达分析在疾病诊断中的应用案例： **癌症诊断**： - 乳腺癌：通过检测特定基因（如 HER2）的表达水平，帮助确定治疗方案。例如，HER2 基因过度表达的乳腺癌患者可能更适合使用针对 HER2 的靶向治疗药物。 - 肺癌：分析 EGFR 等基因突变和相关基因的表达情况，指导靶向药物的
为什么要用基因修饰小鼠进行研究？
2001年，拉斯克基础医学奖颁发给一项极具有创造性和影响力的技术发明: 一种对小鼠基因组进行人工改造的方法——敲除基因。 故事可以追溯到1987年，Capecchi和Smithies根据染色体同源重组的原理，在小鼠胚胎干细胞（mES）水平首次实现了外源基因的定点整合，这就是广为人知的ES基因打靶技术