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使用方法1. 接种细胞：用胶原酶消化细胞并计数（不建议用胰酶）。转染前 18-24 小时进行细胞的铺板，以便在转染时，贴壁细胞的密度大约在 80%左右。注：培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。2. 准备 EZ Trans-DNA 复合物1）转染前将所有试剂置于室温 10 分钟。下面，以转染 24 孔板培养皿为例，说明转染的具体方法（如果在别的培养器皿中进行转染，各试剂建议使用量见表 1.：2）将 1 μg 质粒 DNA 稀释到 40 μL 无血清的高糖 DMEM 培养基，用移液枪吹吸 3-4 次。3）将 3 μL EZ Trans 转染试剂稀释到 40 μL 无血清的高糖 DMEM 培养基，用移液枪吹吸 3-4 次。注： 无血清的高糖 DMEM 培养基是稀释液， 不能使用含血清的培养基进行 DNA 和 EZ Trans 转染试剂的稀释！因为 EZ Trans-DNA 转染复合物的形成过程不能含有血清。4）将稀释好的 EZ Tr......阅读全文
使用方法1. 接种细胞：用胶原酶消化细胞并计数（不建议用胰酶）。转染前 18-24 小时进行细胞的铺板，以便在转染时，贴壁细胞的密度大约在 80%左右。注：培养液中的血清和抗生素不影响转染效率。2. 准备 EZ Trans-DNA 复合物1）转染前将所有试剂置于室温 10 分钟。下面，以转染 24
材料： 质粒DNA 指数生长的真核细胞 PEI （聚乙烯亚胺） 1×HBS （pH7.4） 配方： PEI 储存液（100 μM）：称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS （pH7.4）中， 0.2 μm 滤膜过滤，储存于4℃备用。 1×HBS （pH7.4）： 将8.76 g
材料：质粒DNA指数生长的真核细胞PEI （聚乙烯亚胺）1×HBS （pH7.4）配方：PEI 储存液（100 μM）：称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS （pH7.4）中， 0.2 μm 滤膜过滤，储存于4℃备用。1×HBS （pH7.4）： 将8.76 g NaCl 溶解
实验概要 Use PEI (Linear 25 kDa Reagent) to transfect in HEK293T cells. 主要试剂 PEI is polyethyleimine, a 25 kDa linear from Polysciences Inc. Make up
Polysciences转染试剂系列是基于PEI（Polyethylenimine）的产品，因其有效的瞬转效率和蛋白产量，已广泛应用于工业化生产和基础科研中的蛋白表达研究，年文献发表量已达上千篇。PEI是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔二个碳原子，即每“第三个原子都是质子化的氨基氮
就在上推出了一些阳离子聚合物基因转染技术，以其适用宿主范围广，操作简便，对细胞毒性小，转染效 转染试剂率高受到研究者们的青睐。 在这其中，树枝状聚合物和聚乙烯亚胺的转染性能*佳，但树枝状聚合物的结构不易于进一步改性，且其合成工艺复杂。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密
常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染（永久转染）.前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析.一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内（依赖于各种不同
线型PEI（Line PEI，LPEI）与其衍生物用作基因转染载体的研究比分枝状PEI（Branched PEI，BPEI）要早一些，过去的研究认为在不考虑具体条件，LPEI/DNA转染复合物的细胞毒性较低，有利于细胞定位，因此与BPEI相比应该转染效率高一些。但最近研究表明BPEI的分枝度高有
脂质体介导法 磷酸钙沉淀法 实验方法原理 外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的
寡核苷酸作为重要的特异性调控基因表达物质，已广泛的应用于药物开发治疗以及相关基因功能研究。但是，寡核苷酸易被核酸酶降解，具有较高的负电荷等缺点，使其直接作为治疗药物稳定性差，跨越细胞膜能力弱，治疗效果不好，为了解决以上问题我们采用聚乙烯亚胺800（PEI800）为原料，通过氮-酰化作用结合亚