常用生化实验技术：分光光度法2
3．朗伯—比尔定律如果同时考虑吸收层的厚度和溶液浓度对光吸收的影响，则必须将朗伯定律和比尔定律合并起来，得＝KLCA＝KLC即吸光度与溶液的浓度和液层的厚度的乘积成正比，这就是朗伯—比尔定律。在上式中，若L用厘米表示，C用克／升表示，则比例常数K称为吸光系数，其值取决于入射的波长，溶液的性质和温度等，而与光的强度、溶液的浓度及液层的厚度无关。若L用厘米表示，C用摩尔／升表示，则上式中的比例常数用ε表示，得到A=εLC式中ε称为物质的摩尔吸光率(molar absorptivity)或摩尔吸光系数(molar absorption，coefficient)，其值相当于L=1cm时，C=1mol/L时，在一定波长下的吸光度，它是物质的特性常数。A=εLC=ε×1×1=ε不同的物质可能会有相同的最大吸收波长，但其摩尔吸光系数不一定相同。ε值愈大，说明该物质溶液对光吸收愈强烈，则比色测定的灵敏度愈高。第二节分光光度计结构简介 ......阅读全文
常用生化实验技术：分光光度法2
3．朗伯—比尔定律如果同时考虑吸收层的厚度和溶液浓度对光吸收的影响，则必须将朗伯定律和比尔定律合并起来，得＝KLCA＝KLC即吸光度与溶液的浓度和液层的厚度的乘积成正比，这就是朗伯—比尔定律。在上式中，若L用厘米表示，C用克／升表示，则比例常数K称为吸光系数，其值取决于入射的波长，溶液的性质和温度等
常用生化实验技术：分光光度法1
有色溶液对光线有选择性的吸收作用，不同物质由于其分子结构不同，对不同波长光线的吸收能力也不同，因此，每种物质都具有其特异的吸收光谱。有些无色溶液，虽对可见光无吸收作用，但所含物质可以吸收特定波长的紫外线或红外线。分光光度法主要是指利用物质特有的吸收光谱来鉴定物质性质及含量的技术，其理论依据是Lamb
生化实验的基本操作和常用仪器使用2
2.注意事项：（1）使用前应检查电源（电压、电流）是否符合规定，地线是否接妥。（2）挥发性物品，如盛有有机溶剂的器皿，不能放入，以防火灾和爆炸。（3）安放物品时，应小心，不要触及自动恒温控制器的窗筒和温度计，以免损坏部件。安放物品后应立即关好箱门，以便保持温度恒定。（4）烘烤洗刷完的仪器时，应尽量将
层析技术:生物化学实验常用技术(2)
在分配层析中，大多选用多孔物质作为支持物，利用它对极性溶剂的亲和力，吸附某种极性溶剂作为固定相；用另一种非极性溶剂作为流动相。如果把待分离的混合物样品点在多孔支持物上，在层析过程中，非极性溶剂沿支持物流经样品点时，样品中的各种混合物便会按分配系数大小流动相而向前移动。当遇到前方的固定相时，溶于流动相
电泳技术：生物化学实验常用技术2
琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种以琼脂糖凝胶为支持物的凝胶电泳，其分析原理与其它支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构，直接参与带电颗粒的分离过程，在电泳中，物质分子通过空隙时会受到阻力，大分子物质在泳动时受到的阻力比小分子大，因此在凝胶电泳中，带电
实验室常用技术参数资料（二）2
4．0.1mol/L腺苷三磷酸（ATP）溶液 【配制方法】 在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水定容1ml，分装成小份保存于-70℃ 5．10mol/L乙酸酰溶液 【配制方法】 把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1
实验室常用技术参数资料（一）2
四、常用抗生素溶液抗生素贮存液a工作浓度浓度保存条件严紧型质粒松弛型质粒氨苄青霉素50mg/ml(溶于水)-20℃20μg/ml60μg/ml羧苄青霉素50mg/ml(溶于水)-20℃20μg/ml60μg/ml氯霉素34mg/ml(溶于乙醇)-20℃25μg/ml170μg/ml卡那霉素10mg
常用实验动物介绍2
(2)品系特征：免疫：CBA/N小鼠对Ｔ细胞非依赖性2型抗原(TI-2抗原：聚蔗糖ficoll、右旋糖酐dextran、肺炎球菌多糖体等)不能引起抗体产生应答。而对Ｔ细胞非依赖性Ｉ型抗原(TI-I抗原：布氏菌脂多糖等)呈正常反应。CBA/N小鼠血中IgM及IgG3会计师少，而且对Ｔ细胞依赖性抗原的
分子生物学常用实验技术（page－2)
一、RNA 制备 模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人
高级生化技术实验
1、鸡卵类粘蛋白的分离与纯化 2、SDS-PAGE电泳法测定蛋白质相对分子质量 3、凝胶过滤层析法测定蛋白质分子量 4、离子交换层析技术分离单核苷酸。
微生物鉴定中常用的生化反应2
实验原理有些细菌具有合成淀粉酶的能力，可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖，淀粉水解后遇碘不再变蓝色。细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降，可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8（红）～8.0（黄）。
常用生化试剂
>>>常用生化试剂货号品 名规 格价 格(元)备 注B1005 Acridine Orange,1/2 ZnCI2 (吖啶橙)5g/10g190/320Sigma分装B1006Acrylamide (电泳级丙烯酰胺)100g/500g120/500Sigma分装B1007
细菌的生化、生理实验简介（2）
六、硝酸盐（Nitrate）还原试验有些细菌具有还原硝酸盐的能力，可将硝酸盐还原为亚硝酸盐、氨或氮气等。亚硝酸盐的存在可用硝酸试剂检验。试验方法：临试前将试剂的A（磺胺酸冰醋酸溶液）和B（α－萘胺乙醇溶液）试液各0.2ml等量混合、取混合试剂约0.1ml、加于液体培养物或琼脂斜面培养物表面，立即或于
动物实验技术2
2．于第①、②、③管内分别加乙型溶血性链球菌培养物、四联球菌培养物、生理盐水各0.5m1。 3．上述3支试管每管加入5%氯化钙0.2ml，摇匀，置37℃水浴10min，待血液凝固，再继续37℃水浴约30min，观察结果。 【结果】 l．观察时，可将小试管慢慢倾斜至30°
常用生化试剂作用
1.蛋白酶K：能水解消化蛋白质，特别是与DNA结合的组蛋白。再尿素和SDS中稳定。一般工作浓度是50—100μg/ml，推荐反应缓冲液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸钠. 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜，并解离细胞中
常用生化试剂作用
1.蛋白酶K：能水解消化蛋白质，特别是与DNA结合的组蛋白。再尿素和SDS中稳定。一般工作浓度是50—100μg/ml，推荐反应缓冲液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。2.SDS:十二烷基硫酸钠. 溶解细胞膜上的脂类与蛋白质，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜，并解离细胞中
生化实验讲义－－电泳技术
电泳技术发展简史 1809年俄国物理学家Рейсе首次发现电泳现象。他在湿粘土中插上带玻璃管的正负两个电极，加电压后发现正极玻璃管中原有的水层变混浊，即带负电荷的粘土颗粒向正极移动，这就是电泳现象。 1909年Michaelis首次将胶体离子在电场中的移动称为电泳。他用不同pH的溶液在U形管中测
生化实验讲义－－电泳技术
电泳技术发展简史 1809年俄国物理学家Рейсе首次发现电泳现象。他在湿粘土中插上带玻璃管的正负两个电极，加电压后发现正极玻璃管中原有的水层变混浊，即带负电荷的粘土颗粒向正极移动，这就是电泳现象。 1909年Michaelis首次将胶体离子在电场中的移动称为电泳。他用不同pH的溶液在U形管中
急性动物实验中常用的手术方法2
（二）兔、狗股部手术 股部手术目的在于分离股神经、股动、静脉及进行股动、静脉插管，以备放血、输血输液、注射药物等用。狗肌部神经、血管解剖特点见图2：图2 狗股部神经、血管解剖特点狗、兔等动物手术方法基本相同。现以兔为例其基本步骤如下：1、动物背位固定于兔台上，腹股沟部剪毛。2、用手指触摸股动脉搏动，
动物实验基本技术2
第三节 实验动物的麻醉方法麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中服从操作，确保实验顺利进行。一、常用的麻醉药(一)常用局部麻醉剂：普鲁卡因，此药毒性小，见效快，常用于局部浸润麻醉，用时配成0.5％～1％；利多卡因，此药见效快，组
动物实验基本技术2
第五节 实验动物的采血法实验研究中，经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析，故必须掌握正确的采集血液的技术。采血方法的选择，主要决定于实验的目的和所需血量以及动物种类。一、大鼠、小鼠的采血方法(一)剪尾采血：需血量很少时常用本法，如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作
动物实验基本技术2
第三节 实验动物的麻醉方法 麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中服从操作，确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 (一)常用局部麻醉剂：普鲁卡因，此药毒性小，见效快，常用于局部浸润麻醉，用时配成0.5％
动物实验基本技术2
第五节 实验动物的采血法实验研究中，经常要采集实验动物的血液进行常规质量检测、细胞学实验或进行生物化学分析，故必须掌握正确的采集血液的技术。采血方法的选择，主要决定于实验的目的和所需血量以及动物种类。一、大鼠、小鼠的采血方法(一)剪尾采血：需血量很少时常用本法，如作红、白细胞计数、血红蛋白测定、制作
生化实验的基本操作和常用仪器使用1
（一）搅拌和振荡1.配制溶液时，必须随时搅拌或振荡混合。配制完了时，必须充分搅拌或振荡混合。2. 搅拌使用的玻璃搅棒，必须两头都烧圆滑。3.搅棒的粗细长短，必须与容器的大小和所配制的溶液的多少呈适当比例关系。不能用长而粗的搅棒去搅拌小离心管中的少量溶液。4.搅拌时，尽量使搅棒沿着器壁运动，不搅入空气
生化实验的基本操作和常用仪器使用3
1、72型分光光度:72型分光光度计是可见光分光光度计，其波长范围为420—720毫微米。（1）操作方法：① 按照接线要求，将稳压器和检流计连接在单色器上。注意，将检流计与单色器相接时，应按三股接线的颜色准确连接。而稳压器的输出接线柱与单色器相接。② 在电源电压与仪器要求的电压相符时，分别插上稳压器
实验室常用消毒技术介绍
消毒技术(一)明确消毒的主要对象应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类,有针对性地使用消毒剂。(二)采取适当的消毒方法根据消毒对象选择简便、有效、不损坏物品、来源丰富、价格适中的消毒方法。医院诊疗器械按污染后可造成的危害程度和在人体接触部位不同分为三类:1. 高度危险的器材穿过皮肤
生物技术常用实验操作简介
一、总RNA的提取（Trizol法提取） 在收集到生物材料之后，最好能即刻进行RNA制备工作。若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase的作用。 1. 提
实验室常用灭菌技术介绍
灭菌技术(一)高压蒸汽灭菌法的注意事项第一,无菌包不宜过大(小于50cm×30cm×30cm),不宜过紧,各包裹间要有间隙,使蒸汽能对流易渗透到包裹中央。消毒前,打开贮槽或盒的通气孔,有利于蒸汽流通。而且排气时使蒸汽能迅速排出,以保持物品干燥。消毒灭菌完毕,关闭贮槽或盒的通气孔,以保持物品的无菌状态
实验室常用消毒、灭菌技术
一、消毒技术 （一）明确消毒的主要对象 应具体分析引起感染的途径、涉及的媒介物及病原微生物的种类，有针对性地使用消毒剂。 （二）采取适当的消毒方法 根据消毒对象选择简便、有效、不损坏物品、来源丰富、价格适中的消毒方法。 医院诊疗器械按污染后可造成的危害程度和在人体接
生化分离技术——柱层析(colum－chromatography)分离(2)
由于某些原因，用到的淋洗剂多是大包装的（便宜嘛），我们这里是用10升或25升的塑料桶装的，就要注意这些工业品的纯度是较低的。经常能够从送来的大桶底部看见有色的杂质，其他的杂质就可想而知了，所以在比较严格的柱分时就要对溶剂重蒸。当然过原料时就可以免去这一步了，反正下面还有提纯的方法。另外溶剂在过柱子后