WIKI资讯

包涵体蛋白溶解后的重折叠实验

实验步骤 一、常规操作方案 下面这个典型流程对许多蛋白质都有很好的效果。本 操 作 方 案 是 根 据 N g u y e n 等(1993)首先开发的方案改编而成，并用于冷泉港蛋白质纯化与鉴定课程的不溶性重组蛋白纯化部分（Burgess and K n u t h ， 1996)。其他类似的流程也可能给出相似的结果，但我们实验室几乎只使用该流程。下面我们将会对关键步骤进行讨论。 (1) 使 用 含 有 I L L B 培养基的2 L 培养瓶, 在 37°C 、振摇条件下培养携带了 p E T 载体 (克隆有目标基因）的 大 肠 杆 菌 B L 21(D E 3)p L y S 菌 株（Studieretal.， 1”0), 直 A600nm达 到 0.6。 (2) 加人异丙基-β-D-硫化半乳糖苷(I P T G ) 至 0. 5〜 I......阅读全文