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试剂、试剂盒 包涵体沉淀 缓冲液 A 脱氧胆酸钠 N-十二烷基肌氨酸钠 仪器、耗材 Tissuc-TearorTM 匀浆器 透析袋 POROS 50S 阳离子交换柱 SDS-PAGE 电泳装置 实验步骤 材料与设备包涵体沉淀 (见实验 1,P.147)Tissuc-TearorTM 匀浆器（FisherScientific15-338-55)透析袋 (Spectra/PorTM6; 截留分子量 25000D......阅读全文
离子交换剂的总交换容量通常以每毫克或每毫升交换剂含有可解离基团的毫克当量数（meq / mg或meq / ml）来表示。通常可以由滴定法测定。阳离子交换剂首先用HCl处理，使其平衡离子为H?。再用水洗至中性，对于强酸型离子交换剂，用NaCl充分置换出H?，再用标准浓度的NaOH滴定生成的HCl，
(2)平衡缓冲液离子交换层析的基本反应过程就是离子交换剂平衡离子与待分离物质、缓冲液中离子间的交换，所以在离子交换层析中平衡缓冲液和洗脱缓冲液的离子强度和pH 的选择对于分离效果有很大的影响。平衡缓冲液是指装柱后及上样后用于平衡离子交换柱的缓冲液。平衡缓冲液的离子强度和pH 的选择首先要保证
其次是对离子交换剂基质的选择。前面已经介绍了，聚苯乙烯离子交换剂等疏水性较强的离子交换剂一般常用于分离小分子物质，如无机离子、氨基酸、核苷酸等。而纤维素、葡聚糖、琼脂糖等离子交换剂亲水性较强，适合于分离蛋白质等大分子物质。一般纤维素离子交换剂价格较低，但分辨率和稳定性都较低，适于初步分离和大量制备。
3.3 离子交换层析3.3.1 简介离子交换层析（Ion Exchange Chromatography简称为IEC）是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。1848年，Thompson等人在研究土壤碱性物质交换
简介离子交换层析(Ion Exchange Chromatography 简称为IEC)是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。 1848年，Thompson 等人在研究土壤碱性物质交换过程中发现离子交换
5. 正相色谱与反相色谱 正相色谱是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度快，先从柱中流出来。 反相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性，在这种层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度快而先从柱中流出。&
3)采用适当的流速，也可使理论塔板的高度降低，增大理论塔板数。太高或太低的流速都是不可取的。对于一个层析柱，它有一个最佳的流速。特别是对于气相色谱，流速影响相当大。②改变容量因子D(固定相与流动相中溶质量的分布比)。一般是加大D，但D 的数值通常不超过10，再大对提高Rs 不明显，反而使洗脱的时
分辨率： 由上式可见，Rs值越大，两种组分分离的越好。当Rs = 1时，两组分具有教好的分离，互相沾染约2%，即每种组分的纯度约为98%。当Rs=1.5时，两组分基本完全分开，每种组分的纯度可达到99.8%。如果两种组分的浓度相差较大时，尤其要求较高的分辨率。 为了提高分辨率Rs 的值，可采用以下方
本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离, 最后采用紫外吸收法进行鉴定。旨在了解并掌握RNA 碱水解的原理和方法，掌握离子交换柱层析的分离原理和方法，熟练掌握紫外吸收分析方法。实验方法原理本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离
一．概念利用混和物中各组分理化性质（吸附力、分子形状、大小、分子极性、分子亲和力以及分配系数）的差异，在物质经过两相中进行分离的一种技术。本世纪初（1903年），俄国植物学家M.C.Jber发现并使用这一技术证明了植物的叶子中不仅有叶绿素，还含有其他色素，实际上他使用的吸附层析。现在层系法已成为生化
离子交换层析法 实验方法原理 本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离
（一)层析技术层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。可分为吸附层析法、分配层析法、离子交换层析法、凝胶层析法、亲和层析法、高效液相层析法等。在层析法中，根据层析峰的位置及峰高或峰面积，可以定性及定量。层析法与光学、电学或电化学仪器连用，可检测出层析后各组分的浓度或质量，同时绘出层析图。
实验方法原理 本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离, 最后采用紫外吸收法进行鉴定。同时通过测定各单核苷酸的含量, 可以计算出酵母RNA 的碱基组成。实验材料 酵母RNA试剂、试剂盒 阴离子交换树脂聚苯乙烯-二乙烯苯-三甲胺季铵甲酸甲酸钠KOH蒸馏水过
生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性，然后通过实验选择出最有效的纯化流程。 1.测定------分子量、PI &nbs
离子交换层析实验可应用于：（1）分离纯化蛋白质；（2）分离氨基酸；（3）分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。实验方法原理离子交换层析（Ion Exchange Chromatography简称为IEC）是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的
生物大分子制成品的正确保存极为重要，一旦保存不当，辛辛苦苦制成的样品失活、变性、变质，使前面的全部制备工作化为乌有，损失惨重，全功尽弃。影响生物大分子样品保存的主要因素有：⑴空气：空气的影响主要是潮解、微生物污染和自动氧化。空气中微生物的污染可使样品腐败变质，样品吸湿后会引起潮解变性，同时也为微生物
层析法是一类混合物分离技术，在分析化学、有机化学、生物化学等领域有广泛的应用。层析法利用混合物中各组分理化性质的差异，将多组分混合物进行分离及测定。按层析机理可分为吸附层析、分配层析、离子交换层析、凝胶过滤层析等。 泵送和分配培养基、缓冲溶液或其他液体是实验室所执行的常见任务。确保液体以高
在分配层析中，大多选用多孔物质作为支持物，利用它对极性溶剂的亲和力，吸附某种极性溶剂作为固定相；用另一种非极性溶剂作为流动相。如果把待分离的混合物样品点在多孔支持物上，在层析过程中，非极性溶剂沿支持物流经样品点时，样品中的各种混合物便会按分配系数大小流动相而向前移动。当遇到前方的固定相时，溶于流动相
基本方案 离子交换层析介质和层析柱的选择 实验材料 蛋白质
离子交换层析技术 实验方法原理 离子交换层析（Ion Exchange Chromatograph
UniGel：高载量离子交换层析的新选择 UniGel 高载量离子交换介质采用区别于传统离子交换层析基质的表面修饰技术，运用特殊的延长臂和键合技术，使其载量获得极大提升。离子交换（IEX）是根据生物分子表面电荷（种类、数目和分布）差异实现对不同生物分子的分离的方法。常规的离子交换层析介质
UniGel：高载量离子交换层析的新选择 UniGel 高载量离子交换介质采用区别于传统离子交换层析基质的表面修饰技术，运用特殊的延长臂和键合技术，使其载量获得极大提升。离子交换（IEX）是根据生物分子表面电荷（种类、数目和分布）差异实现对不同生物分子的分离的方法。常规的离子交换层析介质
离子交换层析（Ion Exchange Chromatography简称为IEC）是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒离子交换缓冲液仪器、耗材离子交换层析柱梯度混合器电导表实验步骤1.
UniGel：高载量离子交换层析的新选择UniGel 高载量离子交换介质采用区别于传统离子交换层析基质的表面修饰技术，运用特殊的延长臂和键合技术，使其载量获得极大提升。离子交换（IEX）是根据生物分子表面电荷（种类、数目和分布）差异实现对不同生物分子的分离的方法。常规的离子交换层析介质是通过直接在介
分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。前处理分离纯化某种蛋白质，首先要把蛋白质从原来的组织或细胞中以溶解的状态释放出来并保持原来的天然状态，不丢失生物活性。为此，动物材料应先剔除结缔组织和脂肪组织，种子材料应先去壳甚至去种皮以免受单宁等物质的污染，油料种子最好先用低沸点
层析技术是近代生物化学最常用的分离技术之一。它是利用混合物中各组分的理化性质（吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等）的差异，在物质经过两相中，不断地进行交换、分配等过程。任何层析都具有两个相，即固定相和流动相。固定相固定不动，流动相对固定相作单相的相对运动，从而推动样品中各组分通
原理IgG是免疫球蛋白（Immunoglobulin，简称IgG）的主要成分之一，分子量约为15万~16万，沉降生活费数约为7s。IgG是动物和人体血浆的重要成分之一。血浆蛋白质的成分多达70余种，要从血浆中分离出IgG，首先要进行尽可能除去其他蛋白质成分的粗分离程序，使IgG在样品中比例大为增高，
（一）原理IgG是免疫球蛋白（Immunoglobulin，简称IgG）的主要成分之一，分子量约为15万~16万，沉降生活费数约为7s。IgG是动物和人体血浆的重要成分之一。血浆蛋白质的成分多达70余种，要从血浆中分离出IgG，首先要进行尽可能除去其他蛋白质成分的粗分离程序，使IgG在样品中比例大为
Sartobind®膜吸附器是一种层析膜，其基质由稳定化的再生纤维素作为骨架，并带结合不同功能基团。尽管看似过滤器，但是实际上膜吸附器并非过滤器。蛋白质、DNA、内毒素或者其它带电生物分子可被结合至离子交换膜吸附器(如Sartobind®离子交换层析膜);而含有亲和性质的蛋白可被吸附至亲和配基
在分离分析特别是蛋白质分离分析中，层析是相当重要、且相当常见的一种技术，其原理较为复杂，对人员的要求相对较高，这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构