非病毒转染技术在基因编辑中的应用
印第安纳大学医学院的印第安纳再生医学与工程中心(ICRME)是组织纳米转染(TNT)再生医学技术的发源地，该技术可在活体中实现功能性组织重编程。去年，ICRME的研究人员在《Nature Protocol》上发表了关于如何制造TNT 2.0硅芯片硬件的文章。现在，他们的研究首次证明了TNT可以作为一种非病毒的、局部的、基因编辑的传递装置。TNT是一种微创设备，它可以通过使用无害的电火花脉冲将特定的感兴趣基因传递到皮肤，从而在活体体内重新编程组织功能。通讯作者Chandan K. Sen博士、J. Stanley Battersby主席和特约外科教授、ICRME印第安纳大学医学院主任和印第安纳大学健康综合伤口护理中心执行主任说:“基于TNT的传递可以实现细胞特异性的基因编辑。你的皮肤有数千个基因，在慢性创伤中，许多关键基因会被DNA甲基化沉默。基于TNT的基因编辑技术可以消除这一障碍。”在这项研究中，在患者的慢性伤口组织中观察到全......阅读全文
基因转染技术的非病毒方法运载介绍
1、化学转染法 （1）DEAE-葡聚糖和polybrene聚阳离子法：带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体复合物和带负电的DNA分子使得DNA可以结合在细胞表面。通过使用DMSO或甘油获得的渗透休克将DNA复合体导入。DEAE－葡聚糖仅限于瞬时转染。 （2）磷酸钙共沉淀法 ：将
非病毒转染技术在基因编辑中的应用
印第安纳大学医学院的印第安纳再生医学与工程中心(ICRME)是组织纳米转染(TNT)再生医学技术的发源地，该技术可在活体中实现功能性组织重编程。去年，ICRME的研究人员在《Nature Protocol》上发表了关于如何制造TNT 2.0硅芯片硬件的文章。现在，他们的研究首次证明了TNT可以作为一
新的非病毒基因载体提高5倍转染率
聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）是一种阳离子聚合物，已经被广泛地进行研究，显示出作为一种有效的基因传递工具的前景。同样地，HIV-1 Tat肽，是一种可透过细胞膜的肽，已经被成功应用于细胞内的基因传递。为了提高这两种载体的良好性能，纽约大学理工学院（NYU-Ploly）和纽
基因转染技术的病毒方法转染介绍
病毒作为基因转染是基因递送良好的工具，病毒载体的优点有： （1）在转化的细胞中传播重组的DNA分子作为稳定的遗传成分； （2）可能将有缺陷的或突变的基因置于病毒调节信号的控制下以进行研究； （3）能将克隆的基因作为病毒微染色体的一部分 ，并能进行分离； （4）转移效率较高。其主要缺点是病
杆状病毒表达系统用于表达多个非融合蛋白的转染载体
这种载体的主要特征是含有2个或2个以上相同的启动子，可表达2条或2条以上多肽链的蛋白。 如Emery和Bishop[8]等构建的pAcVC2转染质粒，含有两个方向相反的多角体基因启动子。重组病毒可同时表达多角体蛋白和淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒（LCMV） N蛋白。Takehara[9]等构
慢病毒转染细胞步骤
一、慢病毒转染 贴壁细胞实验方法1、慢病毒转染 前18-24小时，将贴壁细胞以1×10^5/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5/孔左右。2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基替换原培养基，加入适量病毒悬液。37℃孵育。3、(对polybrene
慢病毒转染细胞步骤
一、慢病毒 转染贴壁细胞实验方法 1、慢病毒转染前18-24小时，将贴壁细胞 以1×10^5/孔铺到24孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×10^5/孔左右。 2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鲜培养基 替换原培养基，加入适量病毒悬液。37℃孵育。
杆状病毒表达系统用于表达单一非融合蛋白的转染质粒
由于外加的多角体蛋白或其它的氨基酸可能对外源蛋白的生物活性或细胞定位产生影响，所以用于表达非融合型蛋白的转移载体被广泛应用。几种不同的策略被用于设计高水平表达非融合蛋白的转移载体： (1)如pAcRP[5]系列等，都在多角体基因启动子启始密码ATG上游引入一个单一的限制性多克隆位点； (2)
慢病毒转染肝细胞方法
Lentivirus Transduction of Hematopoietic CellsMing-Jie Li and John J. RossiDivision of Molecular Biology, Beckman Research Institute of the City of Ho
质粒转染和病毒转染有什么本质上的区别
两者在本质上并没有区别。无论是质粒转染，还是病毒转染，均是真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。随着基因